BAKTERI PADA TUBUH IKAN GURAMI (Osphronemus gouramy) AKIBAT INFESTASI EKTOPARASIT Argulus sp. (Bacterial Isolate in Gourami (Osphronemus gouramy) as the Result of the Infestation of Ectoparasites Argulus sp.) M. Irfan Maulana T.Syihab1, Dwi Suryanto2, Zulham Apandy Harahap3, Orbita Roiyan Dhuha4 1
Mahasiswa Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia 20155 (Email:
[email protected]) 2 Departemen Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Sumatera Utara, Medan, Indonesia 20155 3 Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara Medan, Indonesia 20155 4 Laboratorium Parasit dan Nekropsi, Stasiun Karantina Ikan Pengendalian Mutu dan Keamanan Hasil Perikanan Kelas I Medan II, Belawan, Indonesia 20414 ABSTRACT Argulus sp. are parasites that act as mediators for viruses or bacteria frequently causing diseases by leaving a bite scar. This study was aimed to know potential pathogenic bacterial in the internal and external organs of gourami as result of ectoparasites Argulus sp. infestation. Twelve Argulus sp. were infested on gourami for 14 days. The isolation of the bacterial of the gourami and water was conducted using dilution methods. Bacterial characteristic was conducted to their morphology and biochemical properties followed by identification of the bacterial. Two bacterial species were found in the samples of fish and water, i.e. Corynebacterium aquaticum and Micrococcus luteus. Keywords : Osphronemus gouramy, Argulus sp., Corynebacterium aquaticum, Micrococcus luteus.
PENDAHULUAN Seiring dengan meningkatnya usaha budidaya ikan konsumsi, semakin besar kendala yang dihadapi para pembudidaya. Salah satu kendala dalam budidaya ikan adalah berjangkitnya wabah penyakit terutama yang disebabkan oleh parasit. Beberapa jenis parasit yang sering menyerang ikan budidaya adalah Lernaea sp., Dactylogyrus sp., Gyrodactylus sp., Epistylis sp., Trichodina sp., Ichtyophthirius multifiliis, Argulus sp., Chilodonella sp., dan Costia sp. (Muhammad, 2003). Di Indonesia sedikitnya telah tercatat tiga kali wabah yang mengakibatkan kerugian besar yang disebabkan penyakit, baik parasitis maupun bakterial (Dana dan Angka, 1990).
Parasit yang biasanya menyerang ikan gurami adalah Argulus sp., parasit ini biasanya disebut sebagai kutu ikan yang menginfeksi dan menyebabkan penyakit pada ikan (Steckler dan Yanong, 2012). Argulus adalah Anggota subclass Branchiura sebagai parasit Crustacea yang terutama ditemukan pada ikan air tawar (Moller, 2009). Kebanyakan spesies dari genus Argulus berukuran 5-10 mm dan ditemukan hampir di seluruh dunia (Bauer 1991). Pada siklus hidupnya, Argulus secara langsung menggunakan ikan sebagai inang untuk bertahan hidup (Mikheev dkk., 2001). Argulus berulang kali menempel dan melepaskan diri dari inang sehingga menyebabkan kerusakan jaringan dan stres pada ikan. Argulus berpotensi menyebarkan
patogen dan bertindak sebagai perantara penyakit antar ikan (Cusack dan Cone, 1986). Argulus sp. merupakan penyakit penyerang utama (primary infection) yang dapat menyebabkan luka pada inang dengan diikuti tumbuhnya bakteri, virus dan jamur pada luka serta dapat mengakibatkan kematian pada inang (Partasasmita, 1978). Menurut Afrianto dan Liviawati (1992) bakteri (patogen) yang mampu menyebabkan penyakit pada ikan hampir selalu terdapat pada bagian tubuh baik eksternal maupun internal. Semua ikan rentan terhadap infeksi bakteri yang dapat mengakibatkan berjangkitnya penyakit dan tingkat kematian yang tinggi, baik itu pada spesies liar maupun budidaya (Frerichs dan Millar, 1993). Bakteri patogen ikan tergolong mesofilik (bakteri yang tumbuh dengan baik pada suhu 10 - 30 oC). Umumnya bersifat Gram negatif dan berbentuk batang. Namun beberapa patogen berbentuk batang atau bulat dan beberapa diantaranya berbentuk batang tahan asam dengan sifat Gram positif (Alifuddin, 2001). Gejala klinis ikan gurami yang terserang penyakit bakteri adalah memiliki luka kemerahan pada bagian tubuh dan sirip serta terdapatnya luka yang berwarna coklat - kuning (Minaka dkk., 2012). Penelitian isolasi dan identifikasi bakteri pada luka ikan akibat infestasi Argulus sp. sebelumnya telah dilakukan. Penelitian yang dilakukan Kismiyati, dkk (2009), menemukan beberapa bakteri pada luka ikan mas koki yang diinfestasikan Argulus sp. yaitu Aeromonas hydrophila, Pseudomonas flourescens dan Flexibacter columnaris. Ikan gurami adalah ikan yang sering diserang oleh ektoparasit Argulus sp. sehingga perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui bakteri apa saja yang terdapat pada organ tubuh ikan gurami akibat infestasi Argulus sp. METODE PENELITIAN Infestasi Argulus sp. Pada Ikan Gurami Ikan gurami dimasukkan dan diadaptasikan terlebih dahulu ke dalam
akuarium penampungan yang telah diberi aerasi selama 24 jam. Tiga ekor ikan gurami diinfestasi masing-masing oleh 12 ekor Argulus sp. dengan cara infestasi buatan selama 14 hari. Penggunaan Argulus sp. sebanyak 12 ekor dikarenakan sebelumnya telah dilakukan 3 kali infestasi Argulus sp. dengan ukuran ikan dan jumlah Argulus sp. yang berbeda setiap infestasi. Hasil pengamatan semua infestasi dapat dilihat pada Tabel 1. Infestasi buatan adalah metode penempelan Argulus sp. pada ikan gurami secara buatan dengan cara ikan dimasukkan ke dalam Beaker glass berisi air sebanyak 400 ml, kemudian Argulus sp. dimasukkan ke dalam Beaker glass dengan jumlah yang telah disesuaikan yaitu 12 ekor, selanjutnya dilakukan pengamatan selama 15 menit, ikan yang sudah terinfeksi oleh Argulus sp. dimasukkan kembali ke dalam akuarium. Pengamatan dilakukan dengan mengamati luka dan tingkah laku pada ikan gurami untuk selanjutnya akan dilakukan isolasi bakteri. Luka Buatan Pada Ikan Gurami Untuk membuat luka pada ikan gurami (O. gouramy) secara buatan menggunakan pisau steril. Pada bagian punggung di tusuk sampai mengenai daging hingga berdarah dengan panjang luka kirakira 3-5 mm. Ikan yang luka dimasukkan ke dalam akuarium dengan kondisi lingkungan yang hampir sama dengan kondisi lingkungan akuarium pada ikan terinfeksi Argulus sp. selama 14 hari. Pengambilan Sampel Air Air yang akan diisolasi bakterinya adalah air yang terdapat pada akuarium berisi ikan yang terinfeksi Argulus sp., pada akuarium yang berisi ikan dengan luka buatan dan akuarium ikan tanpa perlakuan (kontrol). Sebelumnya air telah dilakukan pengukuran suhu dan pH. Pengambilan air menggunakan botol gelas steril, setelah sampel air di ambil, lalu sampel air tersebut dibawa ke laboratorium untuk diperiksa kandungan bakterinya.
Isolasi Bakteri Pada Tubuh Ikan yang Diduga Mengalami Pengaruh Oleh Infestasi Argulus sp. Isolasi bakteri bertujuan untuk mendapatkan bakteri yang menyerang pada sampel yang diduga terinfeksi bakteri. Sumber isolasi pada ikan adalah semua bagian tubuh yang mengalami kelainan patologi yang diduga disebabkan oleh penyakit bakterial dari bagian tubuh internal dan eksternal. Isolasi bakteri ini dilakukan dengan menggunakan teknik cawan gores atau streak plate pada bagian-bagian tubuh yang mengalami kelainan patologi. Kemudian digoreskan pada media agar yang bersifat umum yaitu media TSA (Trypticase Soya Agar), setelah itu kultur diinkubasi dengan posisi cawan terbalik selama 24 - 48 jam pada suhu ruang. Isolasi Sampel Air Isolasi pada sampel air menggunakan metode seri pengenceran dan dilanjutkan dengan metode Spread plate. Metode seri pengenceran dilakukan dengan mengambil sampel air ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 ml akuades lalu dihomogenisasi menggunakan vortex stirrer 2 – 4 menit sehingga didapat pengenceran 10-1, untuk mendapatkan pengenceran 10-2 dilakukan dengan mengambil 1 ml dari pengenceran 10-1 dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berisi 9 ml akuades, demikian seterusnya dilakukan seri -3 pengenceran 10 . Hasil pengenceran 10-3 tersebut kemudian dimasukkan ke dalam cawan petri pada media TSA dengan menggunakan teknik cawan tuang. Suspensi bakteri diambil sebanyak 0,1 ml dengan pipet ukur kemudian diteteskan di atas permukaan agar yang telah memadat. Tetesan kultur disebarkan dengan batang L steril. Kultur yang ada pada media TSA tersebut diinkubasi dengan posisi cawan terbalik selama 24 - 48 jam pada suhu ruang. Karakteristik dan Identifikasi Bakteri Karakteristik dan identifikasi bakteri terdiri dari beberapa tahap yaitu pemurnian
kultur bakteri, pengamatan morfologi dan uji biokimia yang meliputi uji katalase, oksidase, uji O/F, uji motilitas, uji indol, uji MR-VP, uji gelatin, uji LIA, uji ornithin, uji TSIA, uji citrat, uji urease dan uji gula-gula. Pemurnian kultur bakteri untuk mendapatkan / memperoleh satu koloni bakteri murni. Pengamatan morfologi meliputi karakter makroskopik (ukuran, elevasi, tepian dan warna koloni bakteri) dan karakter mikroskopik dengan pewarnaan Gram (ukuran, warna dan bentuk sel bakteri) (Cappucino dan Sherman, 2005). Berdasarkan hasil uji bakteri tersebut, dilakukan upaya identifikasi bakteri sampai pada tahap definitif spesies dan apabila tidak memungkinkan pemeriksaan dilaksanakan sampai pada tahap presumtif yang mendekati definitif dengan menggunakan buku “Bergey`s Manual of Determinative Bacteriology” Holt, dkk (1994) dan “Bacteria from Fish and Other Aquatic Animals” N.B. Buller (2004). HASIL Infestasi Argulus sp. Pada Ikan Gurami Infestasi Argulus sp. telah dilakukan sebanyak 4 kali. Infestasi pertama menggunakan 3 ekor ikan gurami yang ukurannya 7 - 8 cm dengan infestasi Argulus sp. sebanyak 10 ekor. Ikan mengalami kematian pada hari ke-2 setelah infestasi. Infestasi ke dua menggunakan 3 ekor ikan gurami yang ukurannya 7 - 8 cm dengan infestasi Argulus sp. sebanyak 5 ekor. Ikan mengalami kematian pada hari ke-3 setelah infestasi. Infestasi ke ketiga menggunakan 3 ekor ikan gurami yang ukurannya 18 - 20 cm dengan infestasi Argulus sp. sebanyak 10 ekor, pada hari ke10 ikan tidak mengalami kematian dan Argulus sp. ditemukan hanya 1 - 2 ekor di bagian tubuh ikan. Karena infestasi 1 dan 2 mengalami kematian sedangkan infestasi ketiga tidak menimbulkan kelainan tingkah laku yang signifikan dan sedikit bekas luka akibat serangan Argulus sp, maka infestasi 1, 2 dan 3 tidak dapat dilanjutkan ke tahap
isolasi. Dilakukanlah infestasi ke-4 menggunakan 3 ekor ikan gurami ukuran 15 - 16.5 cm dengan Argulus sp. sebanyak 12 ekor untuk masing-masing ikan selama 14 hari. Hasil infestasi dapat dilihat pada Tabel 1. Pengamatan Tingkah Laku dan Gejala Klinis Ikan Selama Pemeliharaan Pengamatan tingkah laku ikan selama pemeliharaan dengan infeksi parasit Argulus sp. meliputi respon gerakan tubuh tidak normal, berenang pasif, berada di dasar perairan dan nafsu makan menurun, sedangkan gejala klinis yang terjadi yaitu terdapat bekas luka pada bagian sirip ekor, sirip punggung dan sirip anal. Pengamatan tingkah laku pada ikan yang diberi luka buatan dan ikan kontrol (tidak diberi perlakuan) menunjukkan gerakan tubuh dan nafsu makan yang normal serta tidak terdapat luka pada bagian tubuh eksternal. Pengamatan Organ-Organ Pada Ikan Pasca Pemeliharaan Pengamatan pasca pemeliharaan seluruh ikan secara visual terlihat bahwa pada bagian eksternal tidak mengalami borok tetapi terdapat bekas luka pada ikan akibat infestasi Argulus sp. dan ikan yang diberi luka buatan. Akibatnya isolasi pada bagian eksternal tidak dilakukan, sedangkan isolasi dilakukan pada organ internal yaitu hati dan ginjal baik pada ikan yang diberi perlakuan dan yang tidak diberi perlakuan untuk melihat pengaruh infestasi Argulus sp. terhadap organ dalam ikan. Pada pemeriksaan organ dalam ikan pasca infestasi Argulus sp. terdapat gejala klinis seperti pada hati dan ginjal. Hati ikan terlihat pucat sedangkan ginjal mengalami sedikit pembengkakan. Selanjutnya pemeriksaan organ dalam ikan pasca diberi luka buatan menunjukkan hati terlihat normal, tetapi ada sedikit pembengkakan pada ginjal. Pemeriksaan organ dalam ikan kontrol (tanpa
perlakuan) baik hati dan ginjal terlihat normal. Isolasi Bakteri Pada Ikan dan Air Bakteri yang diperoleh dari hasil isolasi hati dan ginjal ikan pasca infestasi Argulus sp. sebanyak 2 jenis yaitu Corynebacterium aquaticum dan Micrococcus luteus, sedangkan hasil isolasi dari hati dan ginjal ikan pasca diberi luka buatan hanya diperoleh 1 jenis bakteri yaitu Micrococcus luteus dari hasil isolasi ginjal, sedangkan di hati tidak ada bakteri. Untuk isolasi bakteri dari organ hati dan ginjal ikan kontrol (tanpa perlakuan) tidak ditemukan bakteri. Pada sampel air diperoleh 2 jenis bakteri yaitu Corynebacterium aquaticum dan Micrococcus luteus. Hasil dari isolasi bakteri ikan dan air dapat dilihat pada Tabel 2. . Morfologi Koloni Bakteri Pada Ikan dan Air Bakteri yang ditemukan dapat dilihat dari morfologi koloni meliputi tepian, elevasi dan warna koloni yang dapat dilihat pada Tabel 3. berdasarkan pada Tabel 3. Koloni bakteri C. aquaticum dan M. luteus memiliki tepian, elevasi, dan warna yang sama, tetapi warna kuning koloni bakteri M. luteus lebih kuat. Perbedaan warna dapat dilihat pada Gambar 1. Morfologi Sel Bakteri Pada Ikan Dan Air Pengamatan morfologi sel dilakukan dengan pewarnaan Gram dan uji biokimia untuk mengidentifikasi bakteri yang menginfeksi ikan gurami. Pewarnaan Gram yang dilakukan secara mikroskopik dengan perbesaran 1000x didapat hasil pewarnaan Gram bakteri C. aquaticum dan M. luteus berwarna ungu yang merupakan Gram Positif. Kedua bakteri tersebut memiliki bentuk yang berbeda di mana C. aquaticum memiliki bentuk basil dengan ciri khas sel membentuk formasi „V‟ dan bakteri M. luteus memiliki bentuk coccus
dengan ciri khas sel membentuk tetrad. Pewarnaan Gram bakteri tersebut dapat dilihat pada Gambar 2. Hasil pengamatan morfologi sel berupa pewarnaan Gram dan uji biokimia yang dilakukan untuk mengidentifikasi bakteri yang ditemukan pada ikan dan air diduga merupakan bakteri potensial patogen, bakteri-bakteri tersebut dapat menyebabkan penyakit pada ikan gurami. Bakteri-bakteri ini juga ditemukan pada air yang merupakan tempat ikan gurami itu hidup. Hasil pengamatan morfologi sel baik pewarnaan Gram dan uji biokimia dari kedua bakteri dapat dilihat pada Tabel 4 dan Tabel 5.
Kondisi Lingkungan Kondisi lingkungan perairan merupakan faktor yang dapat mempengaruhi kehidupan ikan dan tingkat patogenitas ektoparasit Argulus sp. dalam menyerang inang. Akuarium pemeliharaan tidak terkena cahaya matahari langsung karena berada di dalam ruangan tetapi sebagian besar dinding/tembok nya terbuka, ini menyebabkan suhu udara di dalam ruangan berfluktuasi sesuai kondisi cuaca dan mempengaruhi suhu air. Kualitas air selama penelitian yaitu suhu air berkisar antara 25 – 27 °C sedangkan pH air berkisar antara 6-7.
Tabel 1. Hasil pengamatan infestasi Argulus sp. pada ikan gurami. Infestasi Ukuran Argulus sp. Kondisi Ikan Ikan(cm) (ekor) 1 7-8 5 Mati dalam 2 hari
Keterangan Tidak di isolasi
2
7-8
10
Mati dalam 3 hari
Tidak di isolasi
3
18 - 20
10
Tidak di isolasi
4
15 - 16.5
12
Hidup, Argulus sp. yang menempel sebanyak 1-2 ekor pada hari ke-10 Hidup, Argulus sp. yang menempel sebanyak 4-5 ekor pada hari ke-14
Tabel 2. Hasil isolasi bakteri pada organ dalam ikan dan air pemeliharaan Ikan Organ Bakteri yang ditemukan Infestasi Argulus sp. Ginjal Corynebacterium aquaticum Hati Micrococcus luteus Luka Buatan Ginjal Micrococcus luteus Hati Tanpa perlakuan Ginjal Hati Corynebacterium aquaticum Micrococcus luteus Air
Isolasi
Tabel 3. Morfologi koloni bakteri pada ikan dan air Media Koloni Tepian Elevasi Warna TSA TSA
Rata Rata
Sedikit Cembung Cembung
Kuning Kuning
Spesies
Corynebacterium aquaticum Micrococcus luteus
Tabel 4. Hasil pengamatan morfologi sel berupa pewarnaan Gram dan uji biokimia bakteri Corynebacterium aquaticum Karakter
Corynebacterium aquaticum
Isolat Bakteri Ikan
Air Pewarnaan Gram Bentuk Basil Basil Basil Sifat Gram + + + Uji Biokimia Oksidase Katalase + + + Motilitas + + + H2S Indol Citrat Urease LIA + + MIO + + TSIA K/A K/A Mr Vp + + + O/F i N/R N/R Gelatin V Uji Gula-Gula Glukosa + + Laktosa sukrosa Inositol Maltosa Manitol Sorbitol Media tumbuh TSA + + + Keterangan: (+) positif, (-) negatif, N/R (not reaction), V (Variabel), (A) Acid, (K) Alkali, i (inert reaction)
Tabel 5.
Hasil pengamatan morfologi sel berupa pewarnaan Gram dan uji biokimia bakteri Micrococcus luteus. Karakter
Pewarnaan Gram Bentuk Sifat Gram Uji Biokimia Oksidase Katalase Motilitas H2S Indol Citrat Urease LIA MIO TSIA Mr Vp O/F Gelatin Uji Gula-Gula Glukosa Laktosa sukrosa Inositol Maltosa Manitol Sorbitol
Micrococcus luteus
Isolat Bakteri Ikan
Air
Coccus +
Coccus +
Coccus +
+ + V -
+ + + A/A
+ + + A/A
O +
O +
O -
V -
+ + + -
+ + + -
V -
-
-
Media tumbuh TSA + + Keterangan: (+) positif, (-) negatif, O (Oksidatif), V (Variabel), (A) Acid, (K) Alkali
A
+
B
Gambar 1. A. Bentuk koloni isolat Corynebacterium aquaticum B. Bentuk koloni isolat Micrococcus luteus (pembesaran 100x).
(a) (b) Gambar 2. Bentuk sel dari isolat (a) Corynebacterium aquaticum (b) Micrococcus luteus (pembesaran 1000x).
Pembahasan Infestasi Argulus sp. Pada Ikan Gurami Dari hasil pengamatan pada infestasi pertama dan kedua ikan dengan ukuran 7-8 cm yang diinfestasikan Argulus sp. sebanyak 5-10 ekor mengalami kematian dalam 2-4 hari. Kismiyati, dkk (2009), menjelaskan bahwa serangan parasit lebih sering mematikan pada beberapa ikan muda yang biasanya berukuran kecil karena belum berkembangnya sistem pertahanan tubuh. Menurut Fryer (1968) Argulus sp. biasanya tidak mengakibatkan masalah dalam lingkungan alami. Satu jenis parasit atau beberapa jenis parasit tidak mungkin mengakibatkan kerusakan yang signifikan ataupun menimbulkan kematian kecuali jika menginfeksi ikan kecil ataupun ikan yang lemah. Dalam infestasi ketiga dengan ukuran ikan gurami 18-20 cm yang diinfestasikan Argulus sp. sebanyak 10 ekor, hanya sedikit sekali ditemukan bekas luka pada permukaan tubuh ikan dan Argulus sp. dalam waktu 10 hari terlihat hanya 1-2 ekor yang masih menempel pada permukaan tubuh ikan gurami. Sedangkan pada infestasi ke empat, Argulus sp. yang menempel pada permukaan tubuh gurami sebanyak 4-5 ekor pada hari ke-14 setelah infestasi. Ini menunjukkan bahwa infestasi Argulus sp. tidak permanen tetapi dapat lepas dari tubuh inang. Hal tersebut terjadi akibat Argulus sp. mengalami kematian, kondisi Argulus sp. yang melemah atau akibat
perkawinan. Hal ini sesuai dengan pendapat Olsen (1974) yang menyatakan bahwa terdapat hubungan spesifik antara inang dengan parasit yang ditentukan oleh keberhasilan parasit dalam menginfeksi, menempati, dan berkembang biak pada habitat tertentu pada bagian tubuh inang. Menurut Steckler dan Yanong (2012) setelah pasangan Argulus jantan dan betina kawin, Argulus betina dewasa lepas dari ikan tumpangan untuk bertelur. Infestasi ke empat atau infestasi terakhir dengan ukuran ikan 15-16.5 cm yang diinfestasikan Argulus sp. sebanyak 12 ekor, terlihat pada awal infeksi Argulus sp. menyerang bagian permukaan tubuh ikan seperti sirip dan kepala, beberapa hari kemudian Argulus sp. hanya menyerang bagian sirip ikan. Schulter (1978) menyatakan bahwa Argulus sp. dewasa cenderung banyak ditemukan di ujung anterior ikan, sedangkan Argulus sp. remaja cenderung banyak ditemukan di ujung ekor ikan. Menurut Nurlaela (2013) menyatakan bahwa penyerangan Argulus sp. menyebar pada beberapa organ target seperti bagian sirip, kulit dan seluruh bagian tubuh inang. Jumlah infestasi Argulus sp. terbanyak terdapat pada bagian sirip yaitu sirip dorsal, caudal dan pectoral. Argulus sp. mengakibatkan ikan mas mengalami pertumbuhan yang buruk, berenang abnormal, bahkan mengalami kematian, di mana menunjukkan adanya bintik-bintik merah kecil pada kulit, sirip caudal, dan sekitar kepala (Noaman dkk., 2010).
Tingkah laku ikan selama pemeliharaan 14 hari yang terkena parasit Argulus sp, terlihat respons gerakan tubuh tidak normal, berenang pasif, selalu berada di dasar perairan. Nafsu makan menurun. Ikan mempunyai reaksi yang lambat ketika disentuh tangan. Terdapat bekas luka pada bagian sirip ikan diantaranya sirip punggung, sirip ekor dan sirip anal. Hasil penelitian Nurlaela (2013) menyatakan bahwa perubahan tingkah laku ikan akibat serangan Argulus sp. meliputi respons gerakan tubuh yang tidak normal, berenang pasif, sering berada di dasar perairan, ikan mempunyai reaksi yang lambat atau sama sekali tidak bereaksi ketika disentuh tangan, sisik mudah rontok dan tidak teratur, sirip sering mengalami kerusakan dan terlihat pendarahan pada bagian tertentu, terdapat luka baik permukaan tubuh maupun sirip ikan dan nafsu makan menurun. Menurut Hoole, dkk (2001), bahwa ikan yang terinfeksi Argulus sp. sering menunjukkan kelainan perilaku diantaranya tubuh lemah, iritasi dan kehilangan nafsu makan. Luka yang di sebabkan serangan Argulus sp. dapat memanjang ke dalam jaringan otot ikan (Rahman, 1996). Isolasi Bakteri Pada Ikan Dan Air Serangan Argulus sp. tidak menimbulkan borok (luka busuk) tetapi menyebabkan ikan stres dan timbulnya beberapa bekas luka. Hal ini juga terjadi pada ikan yang diberi luka buatan yang mana tidak terjadi borok dan hanya mengalami bekas luka. Isolasi dilanjutkan ke organ bagian dalam ikan yaitu hati dan ginjal ikan. Menurut Irianto (2004) stres berpengaruh terhadap sistem perlindungan tubuh inang yaitu mukus, kerusakan kulit atau lapisan mukus akan mempermudah invasi agensia patogenik. Dari pengamatan terhadap organ internal ikan terinfeksi Argulus sp, hati ikan terlihat pucat sedangkan ginjal mengalami pembengkakan. Menurut Sudheesh dan Xu (2001), terjadinya penyakit sangat berkaitan dengan faktor-
faktor patogenisitas bakteri, kecepatan perkembangbiakan patogen, maupun faktor pertahanan inang dalam melawan patogen. Bakteri yang mampu bertahan tersebut akan masuk ke dalam aliran darah sehingga menyebar ke seluruh sel tubuh inang maupun menuju organ target. Dari hasil isolasi ikan terinfeksi Argulus sp. pada organ hati ditemukan 1 jenis bakteri yaitu Micrococcus luteus, sedangkan pada organ ginjal ditemukan 1 jenis bakteri yaitu Corynebacterium aquaticum. Hasil isolasi ikan pasca diberi luka buatan hanya diperoleh 1 jenis bakteri yaitu Micrococcus luteus yang diperoleh dari hasil isolasi ginjal, sedangkan di hati tidak ada ditemukan bakteri. Untuk isolasi organ hati dan ginjal ikan kontrol (tanpa perlakuan) tidak ditemukan bakteri. Kedua jenis bakteri tersebut C. aquaticum dan M. luteus juga ditemukan pada isolasi sampel air yang diambil dari akuarium pemeliharaan. Bakteri-bakteri ini merupakan bakteri patogen penyebab penyakit pada ikan yang menyebabkan penyakit bacterial kidney disease dan microccoccis. Bakteri C. aquaticum merupakan bakteri Gram Positif yang bersifat patogenik pada ikan. Baya, dkk (1992), menemukan bahwa C. aquaticum adalah bakteri oportunistik yang bersifat patogenik pada ikan. Bakteri tersebut ditemukan pada isolasi organ ginjal ikan yang terinfeksi ektoparasit Argulus sp. dan sampel air. Corynebacterium sp. merupakan penyebab penyakit ginjal pada ikan atau biasa disebut Bacterial Kidney Disease (Kordi, 2004). Corynebacterium sp. juga ditemukan pada organ kulit, hati, ginjal dan usus ikan serta air akuarium (Suhendi, 2009). Bakteri M. luteus merupakan bakteri Gram Positif yang bersifat patogenik pada ikan. Organ-organ yang diserang oleh bakteri ini adalah organ ginjal dan hati serta ditemukan pada sampel air. Menurut Aydin, dkk (2005), bakteri M. luteus biasanya dapat menyebabkan peradangan maupun infeksi
yang kronis pada ikan-ikan dewasa maupun ikan-ikan stadia larva. Efek dari patogenitas M. luteus yang menyebabkan pendaharan pada organ tubuh bagian tertentu seperti pada hati, limfa, dan ginjal ikan (Austin dan Austin, 1999). Dari sampel ikan di mana ditemukan bakteri M. luteus, pada saat pemeliharaan ikan terlihat lemah dan nafsu makan menurun serta terdapat bekas luka akibat serangan Argulus sp. Kordi (2004) menyatakan bahwa salah satu bakteri penyebab penyakit cacar pada ikan gurami adalah Micrococcus sp, dengan gejala ikan terlihat lemah, nafsu makan hilang, kulit kelihatan melepuh yang selanjutnya menjadi borok. Morfologi Koloni Bakteri Pada Ikan Dan Sampel Air Pengamatan morfologi koloni pada bakteri C. aquaticum ditemukan memiliki tepian rata, elevasi cembung dan berwarna kuning. Menurut Baya (1992), bakteri C. aquaticum memiliki ciri-ciri morfologi dengan bentuk koloni bulat, berwarna kuning dengan diameter 1-3 mm dan tumbuh pada suhu 250C selama 48 jam. Bakteri M. luteus memiliki bentuk koloni dengan tepian rata, elevasi cembung dan berwarna kuning. M. luteus memiliki koloni yang berwarna kuning atau jingga dengan elevasi cembung dan pertumbuhan optimal pada kisaran suhu 25-370C (William dkk., 2012). Morfologi Sel Bakteri Pada Ikan Dan Sampel Air Hasil pengamatan morfologi sel yaitu pewarnaan Gram menunjukkan bakteri C. aquaticum dan M. luteus bersifat Gram positif karena bakteribakteri ini mempertahankan zat warna kristal violet. Bentuk sel kedua bakteri berbeda di mana C. aquaticum berbentuk batang sedangkan bakteri M. luteus berbentuk bulat dengan ciri khas sel membentuk formasi 4 gabungan (tetrad cocci). Isolat bakteri M. luteus dari penyakit ikan rainbow trout memiliki
morfologi sel bakteri membentuk tetrad cocci (Aydin dkk., 2005). Identifikasi Bakteri Pada Ikan Dan Sampel Air Hasil dari penelitian ini ditemukannya bakteri C. aquaticum dan M. luteus pada media TSA. Setelah dilakukan uji biokimia pada bakteri yang ditemukan pada sampel ikan dan air (Tabel 3) terdapat sedikit perbedaan hasil uji biokimia. Perbedaan tersebut terdapat pada media LIA dan MIO untuk bakteri C. aquaticum sedangkan media LIA dan gelatin untuk bakteri M. luteus. Namun hasil uji tersebut tetap mengarah pada kedua bakteri tersebut. Teori dari identifikasi bakteri dengan metode konvensional adalah membandingkan bakteri yang sedang diidentifikasi dengan bakteri yang telah teridentifikasi sebelumnya. Bila tidak terdapat bakteri yang ciri-cirinya 100% serupa, maka dilakukan pendekatan terhadap bakteri yang memiliki ciri-ciri yang paling menyerupai. Oleh karena itu teknik identifikasi dengan metode konvensional akan selalu menghasilkan suatu bakteri tertentu yang sudah teridentifikasi sebelumnya dan tidak akan dapat menemukan spesies baru (Cowan, 1974). Kualitas Air Kualitas air selama penelitian yaitu suhu air berkisar antara 25-270C dan pH air berkisar antara 6-7. Dari hasil pengamatan terlihat bahwa suhu dan pH air bersifat normal. Menurut Sitanggang dan Sarwono (2002) Suhu ideal untuk pertumbuhan ikan gurami berkisar antara 24-280C Perubahan suhu mempengaruhi terhadap prevelensi dan intensitas dari parasit Argulus sp., yaitu perubahan suhu yang tajam atau drastis selama musim semi dan musim dingin. Pada musim semi, jumlah parasit cenderung lebih tinggi daripada pada musim dingin. Karena pada musim semi, parasit tersebut dapat
bereproduksi 2010).
secara
optimal
(Ozturk,
Pencegahan dan Penanggulangan Ektoparasit Argulus sp. Dari hasil pengamatan di Dinas Perikanan dan Kelautan Pusat Informasi dan Perkembangan Ikan Hias kota Medan, tempat Argulus sp. diperoleh, tindakan penanganan atau penanggulangan serangan Argulus sp. terhadap ikan budidaya yaitu dengan cara melakukan pengamatan atau pemantauan di setiap kolam dan akuarium, jika pada tubuh ikan terlihat serangan Argulus sp, akan dilakukan tindakan secara manual yaitu mengambil langsung Argulus sp. yang terdapat di permukaan tubuh ikan secara rutin, baik menggunakan pinset atau dengan menggunakan tangan. Untuk pencegahan dilakukan pergantian air atau pengeringan dengan melakukan pembersihan kolam secara rutin satu minggu sekali sehingga sisa-sisa Argulus sp. yang berada di air atau telur-telur Argulus sp. yang menempel di dinding kolam atau akuarium dapat terbuang dan mati. Menurut Kordi (2004) pengnanggulangan penyakit argulosis dalam serangan yang sedikit dapat dilakukan dengan cara mekanik atau dengan sikat yang halus tetapi jika ikan yang terserang dalam jumlah yang besar dapat dilakukan dengan cara perendaman menggunakan larutan KMnO4 dosis 10 ppm selama 30 menit, 100 ppm selama 510 menit, 1000 ppm selama 30-45 detik. Atau dengan larutan NaCl 1.0 – 1.5 % selama 15 menit, 20 gram/liter selama 15 menit. Bahan lain yang dapat digunakan adalah formalin 250 ppm selama 1 jam. Asam asetat glacial 1.000 ppm selama lima menit, ammonium klorida dengan dosis 500 ppm selama kurang lebih 24 jam atau 2.000 ppm selama 30 menit. Bromex 0.1 – 0.2 ppm, Lindane 0.01 – 0.02 dan Neguvon 1 gram/liter air. Penggunaan bahan-bahan kimia tersebut kemungkinan dapat menyebabkan gangguan kesehatan pada ikan dan jika
bahan-bahan kimia tersebut langsung dimasukkan ke kolam atau waduk dapat merusak lingkungan dan kesehatan manusia. Menurut Stickler dan Yanong (2012) cara yang paling baik untuk menghindari infeksi Argulus sp. adalah melalui biosekuriti yang baik, termasuk penapisan dan karantina ikan yang masuk, dan pengamatan ikan secara terus menerus. KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan 1. Bakteri yang ditemukan pada organ dalam ikan gurami akibat infestasi Argulus sp. dan air akuarium yaitu Corynebacterium aquaticum dan Micrococcus luteus. Bakteri yang ditemukan pada organ dalam ikan gurami akibat diberi luka buatan yaitu micrococcus luteus, sedangkan pada ikan gurami tanpa perlakuan tidak ditemukan bakteri. 2. Terdapat persamaan bakteri yang ditemukan baik pada ikan gurami yang diinfestasi Argulus sp., luka buatan dan air yaitu Micrococcus luteus, sedangkan bakteri Corynebacterium aquaticum hanya ditemukan pada organ dalam ikan gurami akibat infestasi Argulus sp. dan air akuarium. Saran Perlu adanya penelitian lebih lanjut mengenai pengaruh infeksi Argulus sp. sebagai penyebab timbulnya penyakit bakterial pada jenis ikan yang berbeda. DAFTAR PUSTAKA Afrianto, E. dan E. Liviawati. 1992. Pengendalian Hama dan Penyakit. Kanisius. Yogyakarta. Alifuddin, M. 2001. Cara Pemeriksaan Penyakit Bakterial dalam Pelatihan Dasar Pemeriksaan Ikan Pratama Karantina Ikan. Bogor. Fakultas Perikanan. Institut Pertanian Bogor.
Austin, B. dan D. A. Austin. 1999. Bacterial Fish Pathogens-Disease in Farm and Wild Fish. Third edition, Ellis Horwood, London, UK. Aydin, S., A. Ciltas, H. Yetim, dan I. Akyurt. 2005. Clinical,Pathological and Haematological Effects of Micrococcus luteus Infections in Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss Walbaum). Journal of Animal and Veterinary Advances. 4 (2): 167-174. Bauer,
R. 1991. Erkrankungen der Aquarienfishe. Verlag Paul Parey. Berlin und Hamburg.
Baya, A., B. Lupiani, I. Bandín, F. Hetrick, A. Figueras, A. Carnahan, E. May, dan A. Toranzo. 1992. Phenotypic and pathobiological properties of Corynebacterium aquaticum isolated from diseased striped bass. Diseases of Aquatic Organisms. 14: 115–126. Buller, N. B. 2004. Bacteria from Fish and Other Aquatic Animals : A Practical Identification Manual. CABI Publishing. Wallingford. Cappuccino, J. G. dan N. Sherman. 2005. Microbiology A Laboratory Manual. San Fransisco, CA . Pearson Education,Inc. Cowan, S. T. 1974. Manual for the Identification of Medical Bacteria. Cambridge University Press. London. Cusack, R. dan D. K. Cone. 1986. A review of parasites as vectors of viral and bacterial diseases of fish. J Fish Dis 9: 169–171.
Dana, D. dan S. L. Angka. 1990. Masalah Penyakit Parasit dan Bakteri pada Ikan Air Tawar Serta Cara Penang gulangannya. Seminar Nasional II Penyakit Ikan dan Udang. Balai Penelitian Perikanan Air Tawar Bogor. Hal. 10 – 23. Frerichs, G. N. dan S. D. Millar. 1993. Manual for the Isolation and Identification of Fish Bacterial Pathogens. Scotland: Pisces PressUniversity of Stirling. Fryer, G. 1968. The parasitic Crustacea of African freshwater fishes; their biology and distribution. Journal of Zoology. 156: 45-95. Holt, J. G., N. R. Krieg, P. H. A. Sneath, J. T. Staley, dan S. T. William. 1994. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. Edisi ke-9. Lippicolt Williams and Wilkins. New York. Hoole, D., D. Bucke, P. Burgess dan I. Wellby. 2001. Diseases of Carp and Other Cyprinid Fishes. Fishing News Books. Oxford Irianto, A. 2005. Patologi Ikan Teleostei. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Kordi, H. K. M. G. 2004. Penanggulangan Hama dan Penyakit Ikan. Rineka Cipta dan Bina Adiaksara. Jakarta. Kismiyati., S. Subekti, W. N. Yusuf dan R. Kusdarwati. 2009. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Gram Negatif pada LukaIkan Maskoki (Carassius auratus) Akibat Infestasi Ektoparasit Argulus sp.. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 1 (2): 129-134.
Muhammad, N. 2003. Parasitic infestation in different fresh water fishes of mini dams of potohar region, Pakistan. Pakistan J. of Biol. Sci. 6 (13): 1092-1095. Møller, O. S. 2009. Branchiura (Crustacea) survey of historical literature and taxonomy. J Arthropod Syst Phylogeny 67 (1): 41 – 55. Mikheev, V. N., A. F. Pasternak, E. T. Valtonen, dan Y. A. N. Lankinen. 2001. Spatial distribution and hatching of overwintered eggs of a fish ectoparasite, Argulus coregoni (Crustacea: Branchiura). Dis Aquat Org. 46: 123–128. Minaka, A., Sarjito dan S. Hastuti. 2012. Identifikasi Agensia Penyebab dan Profil Darah Ikan Gurami (Osphronemus gouramy) yang Terserang Penyaki Bakteri. Journal Of Aquaculture Management and Technology. 1 (1): 249-263. Nurlaela, A. 2013. Freferensi Pemilihan inang Oleh Parasit Argulus sp. Serta Pengaruhnya Terhadap Kondisi Fisiologis Ikan. [Skripsi]. Departemen Budidaya Perairan. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Institut Pertanian Bogor. Bogor. Noaman, V., Y. Chelongar dan A. H. Shahmoradi. 2010. The First Record of Argulus foliaceus (Crustacea: Branchiura) Infestation on Lionhead Goldfish (Carassius auratus) in Iran. Iranian J Parasitol. 5 (2): 71-76. Olsen, O. W. 1974. Animal Parasites, Their Life Cycle and Ecology. Dover Publications, Inc., University Park Press. Baltimore. US.
Ozturk, M. O. 2010. An Investigation on Argulus foliaceus Infection of Rudd, Scardinus Erythrophthalmus in Lake Manyas, Turkey. Scientific Research and Essays. 5 (23): 3756-3759. Partasasmita, S. 1978. Metode Diagnosa dan Epidemilogi Penyakit Ikan oleh Crustacea dan Protozoa Parasiter di dalam Lokakarya Pemberantasan Hama dan Penyakit Ikan. Bogor: Direktorat Jenderal Perikanan, Lembaga Penelitian Perikanan Darat. Rahman, M. M. 1996. Effects of a freshwater fish parasite, Argulus foliaceus Linn. infection on common carp, Cyprinus carpio Linn. Bangladesh Journal of Zoology. 24: 57-63. Schluter, U. 1978. Observations about host-attacking by the common fish louse Argulus foliaceus L. Zoologischer Anzeiger. 200: 85-91. Sitanggang, M. dan B. Sarwono. 2002. Budidaya Gurami. Penebar Swadaya. Jakarta. Steckler, N. dan R. P. E. Yanong. 2012. Argulus (Fish Louse) Infections in Fish. Article. Program in Fisheries and Aquatic Sciences, School of Forest Resources and Conservation Florida Cooperative Extension Service, Institute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. Sudheesh, P. S dan H. S. Xu,. 2001. Pathogenicity of Vibrio Parahaemolyticus in Tiger Prawn Penaeus monodon Fabricius: Possible Role of Extracelluler Proteases.Aquaculture. 196: 37-46.
Suhendi. 2009. Identifikasi dan Prevalensi Bakteri dan Cendawan yang Terseleksi Serta Parasit Pada Ikan Arwana Super Red Scleropages formosus yang Sakit. [Skripsi]. Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
William, W., A. Parte, M. Goodfellow, P. Kampfer, H. J. Busse, M. E. Trujillo, W. Ludwig dan K. I. Suzuki. 2012. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology: Fifth Edition: The Actinobacteria. Springer Science and Business Media Publisher.
