SELEKSI BAKTERI TERMOFILIK SELULOLITIK PASCA ERUPSI MERAPI

J. Kaunia Vol. X No. 2, Oktober 2014/1435: 92-102 ISSN 1829-5266 (print) ISSN 2301-8550 (online)

SELEKSI BAKTERI TERMOFILIK SELULOLITIK PASCA ERUPSI MERAPI Anna Rakhmawati1, Evy Yulianti1, Eli Rohaeti2 1

Jurusan Pendidikan Biologi FMIPA UNY, 2Jurusan Pendidikan Kimia FMIPA UNY Email: [email protected], No hp: 081328076689

Abstract Thermophilic bacteria after the eruption of Merapi in 2010 have been isolated from the Gendol Atas river with dilution and enrichment methods. The purpose of this study was to conduct the selection of these bacteria as producers of cellulase enzymes. Selection was done by growing 348 bacterial isolates on selective media Mandels-CMC 0.5% using Carboxy Methyl Cellulose (CMC) as carbon source. Incubation was performed at 55 °C for 24 hours. The results showed 255 isolates (73.27%) were able to grow in Mandels medium-CMC 0.5%. Bacterial isolates were isolated by enrichment method (69.8%) were more able to grow on selective media compared with the dilution method (30.2%). The diameter of the three largest colonies were isolates D13a (2.44 cm); E135 (2.33 cm); and D110a (1.98 cm). Key words: selection, bacteria, thermophilic, cellulolytic, selulosa menjadi sumber energi dan

PENDAHULUAN Selulosa merupakan salah satu

glukosa tersedia sehingga berperan

biopolimer melimpah di alam dan

penting dalam pemanfaatan biomassa.

merupakan

yang

Salah satu kelompok organisme yang

dominan. Namun pemanfaatan selulosa

mampu menghasilkan enzim selulase

masih

adalah mikroorganisme. Kosim, Putra

limbah

sangat

merupakan

pertanian

terbatas.

polimer

Selulosa

glukosa

yang

(2010) dalam Yusriah & Kuswytasari

dihubungkan dengan ikatan glikosidik β

(2013)

1-4 dan dapat didegradasi oleh enzim

merupakan sumber enzim dan lebih

selulase.

menguntungkan

Jaradat

mengemukakan

et enzim

al

(2008)

menyatakan

mikroorganisme

dibandingkan

selulase

organisme lain karena pertumbuhannya

menempati 20% perdagangan enzim di

cepat, dapat tumbuh pada substrat yang

dunia. Shaikh et al (2013) menerangkan

murah,

enzim selulase merupakan kompleks

hasilnya melalui pengaturan kondisi

enzim yang merupakan sistem sinergis

pertumbuhan dan rekayasa genetika,

dan secara bertahap mampu mengubah

serta mampu menghasilkan enzim yang

lebih

mudah

ditingkatkan

J. Kaunia Vol. X No. 2, Oktober 2014/1435: 92-102

93

ekstrim. Sadhu, S & T.K. Maiti (2013)

mengisolasi

menyatakan konversi biomassa selulosa

selulolitik

oleh mikroorganisme berpotensi untuk

berpotensi

mengembangkan bioproses dan produk-

selulosa dengan memproduksi enzim

produk baru. Enzim selulase yang

selulase

dihasilkan oleh mikroorganisme telah

merupakan

diproduksi

lignoselulosa menjadi gula sederhana

secara

komersial

oleh

bakteri Bacillus

termofilik subtilis

mendegradasi

termotoleran.

limbah

Hal

alternatif

beberapa industri global dan banyak

dan bahan bakar etanol.

digunakan dalam bidang pangan, pakan,

Pengelompokan

yang

ini

konversi

bakteri

bahan bakar, industri kertas dan tekstil,

berdasarkan

serta berbagai industri kimia. Periode

pertumbuhannya

tahun 2004-2014 menunjukkan terjadi

menjadi 3 yaitu psikrofilik (suhu rendah

peningkatan penggunaan enzim selulase

yaitu -10 sampai 20 °C), mesofilik

hampir mencapai 100%. Penelitian

(suhu sedang yaitu 10-50 °C), dan

mengenai enzim selulase umumnya

termofilik (suhu tinggi yaitu 40-70 °C).

dilakukan pada fungi tetapi saat ini

Keuntungan utama penggunaan bakteri

terjadi peningkatan penelitian pada

termofilik adalah memperoleh enzim

bakteri. Produksi enzim selulase oleh

selulase dengan karakter tahan panas

bakteri

keunggulan

sehingga dapat dimanfaatkan dalam

dibandingkan fungi yaitu kecepatan

bidang industri yang menggunakan

pertumbuhan

cepat

suhu tinggi. Aplikasi di bidang industri

produksi

memerlukan enzim selulase yang dapat

enzim rekombinan lebih tinggi, properti

diproduksi dalam jumlah besar dan

kestabilan pada keadaan suhu tinggi,

aktivitas tinggi tetapi dengan biaya yang

dan lebih tahan kondisi basa. Selain itu

ekonomis. Selulase yang diproduksi

enzim selulase yang dihasilkan bakteri

oleh bakteri termofilik menunjukkan

lebih

enzim

stabilitas terhadap suhu tinggi sehingga

sehingga meningkatkan fungsi serta

banyak bermanfaat. Otajevwo & Aluyi

sinerginya.

pada

(2011)

menerangkan

bahwa

strain

lingkungan yang lebih bervariasi seperti

bakteri

yang

kondisi

tidak

termofilik,

menguntungkan

memiliki

sehingga

bakteri

lebih

memungkinkan

komplek

dan

Habitat

multi

bakteri

psikrofilik,

alkalifilik,

suhu

optimum

dapat

tahan

dibedakan

umumnya

mem-

asidofilik, halofilik sehingga mampu

produksi enzim yang stabil pada kondisi

resisten

pada

ekstrim.

Acharya

et

tekanan al

lingkungan.

(2012)

berhasil

Hal

ini

memungkinkan

kenaikan kecepatan hidrolisis enzimatik,

94


fermentasi, dan pemulihan produk. Oleh

diambil dari sampel air dan pasir Sungai

karena itu, isolasi dan karakterisasi

Gendol

bakteri yang memproduksi selulase

isolasi dengan 2 metode yaitu metode

termostabil merupakan aspek penting

dilution dan metode enrichment. Salah

untuk penelitian biofuel dan produk

satu enzim yang diteliti yaitu enzim

lainnya. Hasil penelitian Prasad et al

selulase tetapi hanya dibatasi pada suhu

(2014)

enzim-enzim

inkubasi 70 °C dan hanya mendapatkan

termostabil dapat tahan suhu lebih

1 isolat yang positif memproduksi

tinggi sehingga menguntungkan dalam

selulase. Oleh karena itu, diperlukan

proses

penelitian

menunjukkan

industri

mengisolasi

serta

bakteri

berhasil

Atas

kemudian

lebih

lanjut

dilakukan

pada

suhu

termofilik

inkubasi berbeda yaitu 55 °C. Aktivitas

selulolitik Streptomyces matensis strain

enzim selulase yang dihasilkan oleh

St-5.

bakteri

Vielle

&

Zeikus

(2001)

dapat

diketahui

dengan

keuntungan enzim termofilik yaitu lebih

menggunakan medium selektif salah

mudah purifikasi dengan perlakuan

satunya yaitu medium Mandels-CMC

panas;

yang mengandung Carboxy Methyl

termostabilitasnya

berkaitan

dengan resistensi terhadap denaturan

Cellulose

kimiawi;

karbon.

reaksi

enzimatik

temperatur

tinggi

konsentrasi

substrat

viskositas

lebih

pada

(CMC)

lebih

tinggi,

METODOLOGI

rendah,

resiko

Bahan dan alat Bahan

reaksi lebih tinggi. Sharma et al (2013)

Agar/NA(Oxoid);

mengemukakan

(NH4)2SO4;

keunggulan

produser

sumber

akuades,

Nutrien

memungkinkan

kontaminan lebih sedikit, dan kecepatan

sebagai

sebagai

bakteri

selulase

yaitu

NaCl;

:

KH2PO4; K2SO4;

MgSO4.7H2O;

Carboxy

Methyl

CaCl2; Cellulose

kecepatan pertumbuhan tinggi, ekspresi

(CMC); yeast ekstrak; agar; iod

komplek multienzim, stabilitas di suhu

Alat : autoklaf (All American No 25X),

dan pH ekstrim, feedback inhibisi lebih

erlenmeyer (Pyrex), Gelas beker, hot

sedikit, dan kemampuan bertahan pada

plate, inkubator (EYELA SU-600N),

tekanan lingkungan. Anna R & Evy Y

jangka sorong, Laminair Air Flow/LAF

(2012)

penelitian

(Shimadzu), lampu spiritus, petridish

mengenai eksplorasi bakteri termofilik

(Pyrex), pipet ukur, tabung reaksi

pasca erupsi Merapi sebagai penghasil

(Pyrex), timbangan analitik (AND HF-

enzim ekstraseluler. Bakteri termofilik

300), ose, oven (UCHIDA IST-150D).

telah

melakukan


Seleksi

dilakukan

me-

Perbedaan metode isolasi bakteri

numbuhkan 348 isolat bakteri yang

dari sampel menunjukkan perbedaan

telah diremajakan berumur 24 jam pada

jumlah isolat bakteri yang mampu

media selektif Mandels-CMC 0,5%

tumbuh pada medium selektif Mandels-

menggunakan sumber selulosa yaitu

CMC 0,5%. Gambar 1 memperlihatkan

Carboxy

isolat bakteri hasil isolasi dengan

Methyl

dengan

95

Cellulose

(CMC)

(Basuki, 1995). Kemudian diinkubasi

metode

enrichment

(69,8%)

lebih

selama 24 jam pada 55 ºC, ditetesi

banyak yang mampu tumbuh pada

larutan 0,1 % larutan iod. Setelah

media selektif dibandingkan dengan

diinkubasi selama 30 menit pada suhu

metode dilution (30,2%).

ruang. Zona jernih di sekitar koloni menunjukkan adanya aktivitas selulase (Bragger et al., 1989). Apabila tidak terbentuk zona jernih selanjutnya diukur diameter koloni dengan 3 kali ulangan.

HASIL DAN PEMBAHASAN HASIL Isolat murni bakteri yang diuji sejumlah 348 isolat. Hasil penelitian menunjukkan

255

isolat

(73,27%)

Gambar 1. Diagram persentase isolat hasil isolasi metode enrichment dan dilution yang mampu tumbuh pada medium Mandels CMC.

Distribusi jumlah koloni yang diisolasi dengan metode enrichment dan

mampu tumbuh pada media Mandels-

dilution

CMC 0,5%. Skrining awal uji aktivitas

diameter koloni ditunjukkan pada Tabel

selulase menunjukkan tidak adanya

1. Diameter koloni didominasi pada

zona jernih di sekitar koloni pada

kisaran 0,10-0,50 cm dan yang terkecil

medium Mandels-CMC 0,5% setelah

>2,01 cm.

dikelompokkan berdasarkan

inkubasi 24 jam. Tabel 1. Diameter koloni isolat bakteri hasil isolasi dengan metode enrichment dan dilution

Diameter koloni (cm) 0,10 - 0,50 0,51 - 1,00 1,01 – 1,50 1,51 – 2,00 >2,01 Total

Jumlah isolat Enrichment Dilution 29 128 28 47 12 1 6 1 2 1 77 178

Persentase (%) Enrichment Dilution 11,37 50,19 10,98 18,43 4,71 0,39 2,35 0,39 0,78 0,39 30,20 69,80

96


Gambar 2. Distribusi diameter koloni

Gambar 2. menggambarkan perbedaan metode isolasi mempengaruhi jumlah koloni medium

yang tumbuh pada

selektif.

Metode

PEMBAHASAN Hasil penelitian menunjukkan

dilution

73,27% isolat mampu tumbuh pada

dominan pada kisaran diameter 0,10-

medium selektif Mandels-CMC berarti

0,50 cm.

mampu menggunakan CMC sebagai sumber karbon. Hal ini dipengaruhi oleh sumber isolat diperoleh yaitu air dan pasir Sungai Gendol Atas pasca erupsi Merapi. Jumlah isolat yang diperoleh

dengan

metode

isolasi

enrichment (pengkayaan) lebih banyak Gambar 3. Diameter koloni isolat pada

dibandingkan (pengenceran).

medium Mandels-CMC

Kemampuan tumbuh isolat pada

metode Metode

dilution enrichment

dilakukan dengan menginkubasi sampel

ditandai

dengan

ditambah air Sungai Gendol Atas

koloni-koloni

bakteri

selama 3 hari sehingga memungkinkan

berbeda

lebih banyak bakteri yang tumbuh.

ukurannya. Gambar 3 menunjukkan

Sedangkan metode dilution dilakukan

diameter tiga koloni terbesar pada yaitu

dengan melakukan pengenceran berseri

isolat D13a (2,44 cm); E135 (2,33 cm);

langsung pada sampel. Prasad et al

dan D110a (1,98 cm).

(2014) menemukan sampel tanah dapat

medium

selektif

terbentuknya dengan

diameter

yang


97

digunakan sebagai sumber strain bakteri

mengemukakan

selulolitik.

sebagai substrat akan menghasilkan

Hatami

et

al

(2008)

yang

pemilihan

tinggi

karena

CMC

keberadaan bakteri selulolitik di tanah

enzim

CMC

pertanian lebih berpotensi dibandingkan

kompleksitasnya kurang sehingga akan

di tanah hutan ditentukan oleh tipe

mudah diasimilasi oleh bakteri.

bahan organik yang terkandung. Ivanen

Sadhu, S & T.K. Maiti (2013)

et al (2009) meneliti sampel freshwater

menyatakan penentuan aktivitas enzim

dan tanah merupakan sumber bagus

selulase menggunakan metode agar

untuk

bakteri

plate yang digunakan dalam penelitian

pendegradasi selulosa setelah melalui

ini bukan merupakan metode kuantitatif

tahap enrichment. Kazue et al (2006)

yang menggambarkan korelasi antara

dalam Ibrahim & El-Diwany (2007)

aktivitas enzim dan ukuran diameter

isolat bakteri dari sumber air panas

zona jernih. Koloni bakteri selulolitik

yang mampu memproduksi selulase

Cytophaga sp tidak menunjukkan zona

jumlahnya sedikit. Hal ini berkaitan

jernih sehingga diameter zona jernih

dengan kandungan bahan organik dalam

mungkin tidak akurat merefleksikan

sampel

tahap

aktivitas selulase yang sebenarnya.

enzim

Penelitian Siti U. dkk (2011) juga

mendapatkan

dan

enrichment

pentingnya

untuk

isolasi

penghidrolisis polisakarida.

menunjukkan tidak terbentuknya zona

Isolat bakteri walaupun dapat tumbuh,

tetapi

tidak

jernih sekitar koloni dari isolat bakteri

menunjukkan

yang diisolasi dari rayap lokal Indonesia.

adanya zona jernih di sekeliling koloni

Hal ini disebabkan bakteri biasanya

bakteri pada medium Mandels CMC

tidak langsung mengeluarkan enzim

setelah ditetesi iod. Apabila zona jernih

selulase ke luar sel tetapi masih

terbentuk

adanya

terperangkap di sel. Ramasamy &

carboxymethylcellulose

Verachtert (1980) dalam Purwadaria

(CMC) menjadi glukosa. Otajevwu &

dkk (2003) menyatakan β-glukosidase

Aluyi

Pseudomonas

menunjukkan

degradasi

(2011)

menggunakan

media

sp

dihasilkan

pada

CMC untuk menumbuhkan bakteri yang

periplasma tidak disekresikan. Apabila

bersifat strict aerob, fakultatif aerob,

enzim akan diekstrak hanya berasal dari

dan anaerob. Wood & Bhat (1988)

fraksi

dalam

enzim ini merugikan karena sangat

Shaikh

et

al

(2013)

ekstraseluler,

ketidakberadaan

98


berperan dalam aktivitas sinergistik

terjadi penurunan kandungan nutrien di

sakarifikasi selulosa bahan alami.

bawah

Berdasarkan maka

hasil

pemilihan

penelitian

isolat

koloni

dan

akhirnya

pertumbuhan terhenti.

terpilih

Salah

berdasarkan diameter koloni. Koloni

berpengaruh

bakteri

produksi enzim selulase. Setiap bakteri

menunjukkan

pertumbuhan bakteri

adanya

pada medium

selulolitik

satu adalah

faktor

kompleksitas

menghasilkan

enzim

(2004) mengemukakan apabila sel-sel

tergantung dari gen yang dimiliki dan

bakteri mengalami pembelahan biner

sumber karbon yang digunakan. Pada

secara setara maka koloni akan tumbuh

penelitian ini semua isolat tumbuh pada

seperti disc (cakram) dengan berat dan

media padat

radius

kasus

mengandung Carboxy Methyl Cellulose

menunjukkan radius koloni naik secara

0,5% sebagai komponen indusernya

eksponensial seiring berjalannya waktu.

(Meryandini et al, 2009). Isolat bakteri

Namun pada umumnya koloni bakteri

selulolitik Bacillus licheniformis WBS1

dengan

dan

ukuran

Beberapa

pertumbuhan

yang

yang

kompleks

selektif Mandels-CMC. Melzoch et al

konstan.

selulase

yang

Mandels

Bacillus

sp

berbeda-beda,

CMC

WBS3

yang

tidak

terlihat di permukaan media padat tidak

menunjukkan aktivitas CMCase ketika

menyebar keluar pada laju eksponensial

ditumbuhkan pada CMC sebagai satu-

dan

menggambarkan

satunya sumber karbon dan sumber N

ekenaikan jumlah sel atau massa serta

inorganik. Hal ini menunjukkan sumber

tidak

karbon

diobservasi

dapat

dibandingkan

ketika

organik

dan

nitrogen

(N)

ditumbuhkan pada medium cair. Setelah

esensial untuk isolat bakteri. Efektifitas

inokulasi di agar plate maka sel bakteri

sumber N dari yang terbaik yaitu yeast

akan

ekstrak>beef

menerima

konsentrasi

diatas

nutrien

ekstrak>(NH4)2SO4

limit

(Achrya & Chaudhary, 2011). Kashem

pertumbuhan. Konsekuensinya koloni

et al (2004) juga meneliti efek sumber

akan tumbuh eksponensial. Pada fase

karbon dan nitrogen terhadap produksi

eksponensial maka pertumbuhan akan

enzim selulase. Induksi maupun represi

terjadi setara ke semua arah permukaan

enzim selulase disebabkan penambahan

dan

koloni

sumber karbon dan nitrogen berbeda.

hemispherical. Selama fase ini akan

Hasil penelitian menunjukkan sumber

menyebabkan

nilai

dengan

bentuk


99

karbon paling potensial yaitu laktosa

reduksi

atau

untuk

glukosa

atau

avicelase

sedangkan

dan

NH4Cl

β-glucosidase potensi

untuk

aktivitas CMCase

mengemukakan mikroorganisme mem-

β-glucosidase

allodekstrin

ke

luar

sel

maupun

dan

dapat

terlarut

menghidrolisis dan

selobiosa

menjadi glukosa

produksi selulase ekstraseluler baik dilepaskan

selobiosa

menjadi

beraksi juga pada selulosa mikrokristal. 3)

Sadhu, S & T.K. Maiti (2013)

nonreduksi

Deacon (1997) mengemukakan bahwa

enzim

selulase

diregulasi

berasosiasi dalam sel untuk selulosa

sehingga hanya akan disekresi ketika

tidak

dan

diperlukan. Regulasi dilakukan melalui

dimetabolisme. Enzim selulase me-

sistem feedback (represi katabolit) yaitu

rupakan suatu sistem enzim yang

gen

diklasifikasikan

aksi

direpresi ketika substrat yang dapat

katalitiknya yaitu endoglukanase (Endo-

digunakan (glukosa atau selobiosa)

1,4

tersedia. Keberadaan selulosa akan

larut

dihidrolisis

berdasarkan

β-D-Glucan

aktif

Glucanohydrolase)

mendegradasi

selulosa

amorf

yang

mengkode

enzim

akan

menginduksi sintesis enzim selulase,

seperti CMC dan selooligosakarida; 1,4 – β-D-Glucan

eksoglukanase (

selobiohydrolase) aktif mendegradasi selulosa kristalin seperti avicel tetapi inaktif terhadap selulosa amorf; βglucosidase;

selobiose;

cellodextrin

fosforylase;

cellobiose

epimerase.

Gambar 4 menunjukkan mekanisme degradasi selulosa. Menurut Lynd et al. (2002)

dan

Kodri

dkk

(2013)

mekanisme selulolitik melibatkan 3 reaksi: 1) Endoglukanase memotong secara random sisi amorf internal rantai polisakarida dengan

menjadi

panjang

oligosakarida

bervariasi.

2).

Eksoglukanase beraksi pada rantai akhir

Gambar 4. Mekanisme degradasi selulosa (Moat et al, 2004 dalam Qozi et al, 2011)

tetapi merupakan senyawa yang tidak dapat

larut

sehingga

tidak

dapat

menginduksinya. Bakteri memproduksi

100


enzim selulase dalam level kecil ketika

jam adalah D13a, E135, dan

tidak ada glukosa. Produk degradasi

D110a.

tersebut

(seperti

sophorosa/turunan

selobiosa,

selobiosa)

dapat

sebagai sinyal untuk induksi. Oleh karena itu, mekanisme pelepasan enzim selulase merupakan kombinasi represi gen (glukosa, selobiosa dalam level tinggi);

penghambatan

kompetitif

(selobiosa); dan induksi gen (glukosa tidak ada, selobiosa atau turunan dalam

SARAN 1. Perlu

dilakukan

karakterisasi

dan identifikasi isolat bakteri termofilik

selulolitik

sampai

tingkat spesies dengan karakter molekuler. 2. Perlu

dilakukan

karakterisasi

isolasi

enzim

dan

selulase

yang dihasilkan isolat bakteri

level rendah).

termofilik terpilih. 3. Perlu variasi suhu, pH, substrat,

KESIMPULAN 1. Bakteri termofilik pasca erupsi Merapi

yang

mampu

menghasilkan

enzim

selulase

sebanyak 255 isolat pada media Mandels-CMC

0,5%

suhu

inkubasi 55 °C selama 24 jam. 2. Isolat

bakteri

yang

mampu

enzim

selulase

pada suhu inkubasi

55 °C

menghasilkan

dan

waktu

inkubasi

mengetahui aktivitas

untuk selulase

paling optimal. 4. Penelitian lebih lanjut mengenai produk-produk

bernilai

ekonomis yang dapat dihasilkan dari proses degradasi selulosa oleh bakteri termofilik. DAFTAR PUSTAKA

selama 24 jam lebih banyak diperoleh

dengan

enrichment

metode

dibandingkan

dilution. 3. Bakteri termofilik pasca erupsi Merapi yang memiliki diameter koloni

besar

pada

media

Mandels-CMC

0,5%

dengan

suhu inkubasi 55 °C selama 24

Acharya, S. and A., Chaudhary. 2011. Effect of Nutritional and environmental Factors on Cellulases activity by Thermophilic Bacteria Isolated From Hot Spring. Journal of Scientific & Industrial Research. 70: 142-148 Acharya, A., D.R. Joshi., K. Shrestha, and D.R. Bhatta. 2012. Isolation and Screening of Thermophilic Cellulolytic Bacteria from Compost Piles. Scientific World 10 (10): 43-46 Anna Rakhmawati dan Evy Yulianti. 2012. Eksplorasi bakteri termofilik pasca erupsi Merapi sebagai penghasil enzim ekstraseluler. Jurnal Saintek 17 (1):


Basuki, I. Anas, R.S. Hadioetomo, dan T. Purwadaria. 1995. Isolasi dan seleksi kapang termotoleran penghasil selulase untuk pengomposan tandan kosong kelapa sawit. Jurnal Mikrobiologi Indonesia. 3(1): 15-19 Bragger, J.M., Daniel, R.M., Coolbear, T., Morgan, H.W. 1989. Very stable enzymes from extremely thermophilic archaebacteria and eubacteria,. Applied Microbiology and Biotechnology 31,556-561. Deacon, J.W. 1997. Modern Mycology. 3rd ed. Blackwell Science. Berlin Hatami, S., H.A. Alikhani., H. Besharati., N. Salehrastin., M. Afrousheh, and Z.Y. Jahromi. 2008. Investigation on Aerobic Cellulolytic Bacteria in Some of North Forest and Farming Soils. American-Eurasian J. Agritec. & Environ. Sci. 3 (5): 713-716 Ibrahim A.S.S and Al Dewany. 2007. Isolation and Identification of New Cellulases Producing Thermophilic Bacteria from an Egyptian Hot Spring and Some Properties of the Crude Enzyme. Australian Journal of Basic and Applied Sciences, 1(4): 473-478 Ivanen, D.R., N.L. Rongjina, S.M. Shishlyannikov, G.I. Litviakova, L.S. Isaeva-Ivanova, K.A shabalin, and Kulmiskaya, A.a. 2009. Novel Presicipitated fluorescent substrates for the screeningo of cellulolytic microorganisms. J Microbiol. Methods 76 (3): 295-300 Jaradat, Z., Dawagreh A., Ababneh, Q., and Saadoun, I. 2008. Influence of culture Conditions on Cellulase production by Streptomyces sp (Strain J2). Jordan J Biol Sci, 1: 141-146 Kashem, M.A., M.A., Manchur, M.S. Rahman, and M.N. Anwar. 2004. Effect of Carbon and Nitrogen Sources on the Production of Reducing Sugars, Extracellular Protein and Cellulolytic Enzymes by Two Cellulolytic Bacterial Isolates. Pakistan Journal of Biological Sciences 7 (10): 1660-1663 Kodri, B.D. Argo, dan R. Yulianingsih. 2013. Pemanfaatan enzim Selulase dari Trichoderma reseei dan aspergillus niger sebagai Katalisator Hidrolisis Enzimztik Jerami Padi dengan Pretreatment Microwave. Jurnal Bioproses Komoditas Tropis. 1 (1): 3645

101

Lynd L.R., J.W. Paul, H.V.Willem, and S.P. Isak. 2002. Microbial cellulase utilization Fundamental & Biotech. Microbial and Mol. Biology. 66 (3): 506577 Meryandini, A, Wahyu W, Besty M., Titi C.S.,Nisa R, dan Hasrul S. 2009. Isolasi Bakteri Selulolitik dan Karakterisasi Enzimnya. Makara, Sains. 13 (1): 33-38 Prasad, P., Tanuja, and S., Bedi. 2014. Characterization of a Novel Thermophilic Cellulase Prducing Strain streptomyces matensis strain St5. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences. 3 (3): 74-88 Purwadaria, T., P. A. Marbun, A. P. Sinurat dan P. P. Ketaren. 2003. Perbandingan aktivitas enzim selulase dari bakteri dan kapang hasil isolasi dari rayap. JITV 8 (4): 213-219. Otajevwo, F.D. and Aluyi, H.S.A. Cultural Conditions Necessary for Optimal Cellulase Yield by Cellulolytic Bacterial Organisms as They Relate to Residual Sugars Released in Broth Medium. Modern Applied Science 5 (3): 141-151 Qazi, J.I, N Chaudhary and S S Mirza. 2011. Biofuel from cellulosic Mass with incentive for feed industry employing thermophilic microbes. www.intechopen.com/download/pdf/20 064ultural Sadhu, S and T.K. Maiti. 2013. Cellulase Production by Bacteria: A Review. British Microbiology Research Journal 3 (3): 235-258 Shaikh, N.M., Patel .A.A., Mehta, S.A. and Patel, N.D. 2013. Isolation and Screening of Cellulolytic Bacteria Inhibiting Different Environment and Optimization of Cellulase Production. Universal Journal of Environmental Research and Technology 3 (1): 39-49 Sharma, N., P. Buragohain, D. Tandon, and R. Kaushal. 2013. Comparative study of Potential cellulolytic and xylanolytic bacteria isolated from Compost and Their Optimization for Industrial Use. Journal of Agroalimentary Processes and Technologies. 19 (3): 284-297 Singh, S., V.S. Moholkar. And A. Goyal. 2013. Isolation, Identification, and Characterization of a Cellulolytic Bacillus amyloliquefaciens Strain SS35

102

from Rhinoceros Dung ISRN Microbiology, Article ID 728134 Siti, U., Anna R, dan Evy Y. 2011. Identifikasi Bakteri Selulolitik Dari Saluran Pencernaan Rayap Lokal. Laporan penelitian belum dipublikasikan Vieille, C and G.J. Zeikus. 2001. Hyperthermophilic Enzymes: Sources, Uses, and Molecular Mechanisms for Thermostability. Microbiology and Molecular Biology Reviews 65 (1): 143


SELEKSI BAKTERI TERMOFILIK SELULOLITIK PASCA ERUPSI MERAPI

Recommend Documents