PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

UJI TOKSISITAS SUBAKUT SUBA INFUSA BIJI Persea americana Mill. PADA TIKUS GALUR SPRAGUE DAWLEY TERHADAP KADAR BLOOD UREA NITROGEN DAN KREATININ

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh : Christina Desi Kurnia Wati NIM : 118114106

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Kupersembahkan karya sederhana ku ini untuk Tuhan Yesus untuk Bapak, Ibu dan Kakak tercinta untuk sahabat – sahabat ku serta untuk Almamater kebanggaan ku... ku.

iv


PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat, karunia dan bimbingan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skirpsi yang berjudul Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Persea americana Mill. Pada Tikus Galur Sprague Dawley Terhadap Kadar Blood Urea Nitrogen dan Kreatinin, sebagai syarat dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Proses penulisan dan penyusunan naskah skripsi yang dilakukan oleh penulis, tidak lepas dari bantuan dan dukungan dari banyak pihak yang membantu dan melancarkan dalam menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada: 1. Ibu drh. Sitarina Widyarini, MP., Ph.D dan Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt selaku dosen pembimbing dan penguji skripsi, yang telah sabar dalam membimbing, memberi masukkan dan memotivasi penulis selama proses penyusunan skripsi ini. 2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt dan Prof.Dr.C.J. Soegihardjo, Apt selaku dosen penguji skripsi yang telah memberi masukkan untuk kemajuan skripsi ini. 3. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 4. Bapak Suparjiman, Bapak Heru Purwanto, Bapak Kayatno, Bapak Wagiran, Bapak Kunto dan Bapak Suparlan selaku Laboran Laboratorium Fakultas

v


Farmasi serta Bapak Otok selaku pengelolah gudang kefarmasian yang telah banyak membantu selama peneliti melakukan penelitian ini. 5. Seluruh Dosen Pengajar dan staf atas pembelajaran, motivasi dan bantuan selama penulis menjalani perkuliahan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 6. Ibu Veronika Sularsih dan Bapak Pius Sarjono selaku orang tua yang selalu mendoakan, memberi motivasi kepada penulis, serta kakak tercinta Anna Novilia Wati atas nasehat dan dukungannya selama penulis menyusun skripsi ini. 7. Teman – teman satu penelitian yang telah berjuang bersama, yang telah memberikan motivasi, dan membantu penulis dalam proses penyusunan skripsi ini, Agustina Iswara, Rosita Olimpia, Trifonia Ingrid, Betzylia Wahyuningsih, Levina Apriyani, dan Marselina Tisera. 8. Teman – teman seperjuangan FKK B yang telah memberi semangat dalam proses penyusunan skripsi, keceriaan dan kebahagian kepada penulis. 9. Seluruh pihak yang telah membantu dalam proses penulisan skripsi ini yang tidak bisa disebutkan satu persatu. Penulisan skripsi ini jauh dari kata sempurna, yang tentu terdapat kekurangan, untuk itu penulis berharap adanya kritik dan saran yang dapat menjadikan skripsi ini lebih baik dan semoga skripsi ini dapat memberikan informasi yang bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan, khususnya dibidang Farmasi. Penulis

vi


vii


viii


DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL .............................................................................

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ....................................

ii

HALAMAN PENGESAHAN ...............................................................

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................

iv

PRAKATA ...........................................................................................

v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .............................................

vii

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ……………………...

viii

DAFTAR ISI .........................................................................................

ix

DAFTAR TABEL ..................................................................................

xiii

DAFTAR GAMBAR .............................................................................

xv

DAFTAR LAMPIRAN .........................................................................

xvii

INTISARI ..............................................................................................

xix

ABSTRACT ............................................................................................

xx

BAB I PENGANTAR ............................................................................

1

A. Latar Belakang ..................................................................................

1

1. Perumusan masalah ......................................................................

4

ix


2. Keaslian penelitian .......................................................................

4

3. Manfaat penelitian ........................................................................

5

B. Tujuan Penelitian ...............................................................................

6

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA ....................................................

7

A. Persea americana Mill. ....................................................................

7

B. Ginjal .................................................................................................

12

C. Blood Urea Nitrogen (BUN) .............................................................

16

D. Kreatinin ............................................................................................

19

E. Sediaan Infusa ...................................................................................

21

F. Uji Toksisitas Subakut .......................................................................

21

G. Keterangan Empiris .................................................................... .......

24

BAB III METODE PENELITIAN .........................................................

25

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................. .......

25

B. Variabel dan Definisi Operasional ............................................. .......

25

1. Variabel utama .............................................................................

25

2. Variable pengacau ........................................................................

25

3. Definisi operasional .....................................................................

26

C. Bahan Peneltian .................................................................................

27

D. Alat atau Instrumen Penelitian ..........................................................

28

1. Alat pembuatan serbuk biji P.americana .....................................

28

2. Alat penetapan kadar air ...............................................................

28

3. Alat pembuatan infusa biji P.americana......................................

28

x

x


4. Alat uji toksisitas biji P.americana..............................................

28

E. Tata Cara Penelitian ...........................................................................

28

1.

Determinasi tanaman P.americana ............................................

28

2.

Pengumpulan bahan ...................................................................

29

3.

Pembuatan serbuk ......................................................................

29

4.

Penetapan kadar air serbuk biji P.americana .............................

29

5.

Penetapan dosis infusa biji P.americana ....................................

30

6.

Penetapan dosis aquadest sebagai kontrol negatif ......................

31

7.

Pembuatan infusa biji P.americana ............................................

31

8.

Persiapan hewan uji ....................................................................

32

9.

Pengelompokan hewan uji ..........................................................

32

10. Prosedur pelaksanaan toksisitas .................................................

33

11. Pengamatan ................................................................................

33

F. Tata Cara Analisis Hasil ....................................................................

34

G. Skema Alur Penelitian .......................................................................

36

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................

37

A. Determinasi Tanaman .......................................................................

37

B. Penetapan Kadar Air Serbuk Biji P. americana ...............................

38

C. Pemeriksaan Kadar Kreatinin Darah Tikus .......................................

38

D. Pemeriksaan Kadar Blood Ureum Nitrogen Darah Tikus .................

46

E. Perubahan Berat Badan .....................................................................

55

F. Asupan Pakan Tikus ..........................................................................

60

G. Asupan Minum Tikus ........................................................................

62

xi

xi


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................

64

A. Kesimpulan ........................................................................................

64

B. Saran ..................................................................................................

64

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................

65

LAMPIRAN ...........................................................................................

70

BIOGRAFI .............................................................................................

109

xii


DAFTAR TABEL TABEL I.

Perbedaan Hazzard dengan Wurtz...................................

9

TABEL II.

Kandungan fitokimia pada biji alpukat ............................

11

TABEL III.

Perbedaan BUN dan kreatinin ..........................................

20

TABEL IV.

Rerata kadar kreatinin pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan selama 28 hari..........

TABEL V.

40

Uji statistika kadar kreatinin darah pada tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ...............................................................................

TABEL VI.

42

Rerata kadar kreatinin pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina selama 28 hari..........

43

TABEL VII. Uji statistika kadar kreatinin darah pada tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ...............................................................................

46

TABEL VIII. Rerata kadar ureum pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan selama 28 hari.......... TABEL IX.

47

Uji statistika kadar ureum darah pada tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ...............................................................................

TABEL X.

Rerata kadar ureum pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina selama 28 hari..........

TABEL XI.

49

Uji statistika kadar ureum darah pada tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama

xiii

50


28 hari................................................................................

52

TABEL XII. Rerata berat badan ± SE tikus jantan akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ....................

56

TABEL XIII. Rerata berat badan ± SE tikus betina akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ...................

xiv

58

xiv


DAFTAR GAMBAR GAMBAR 1.

Biji Persea americana Mill. .................................

11

GAMBAR 2.

Anatomi ginjal ......................................................

12

GAMBAR 3.

Tahapan pembentukan urea ...............................

17

GAMBAR 4.

Proses pembentukan kreatinin ..............................

19

GAMBAR 5.

Rerata kadar kreatinin darah tikus jantan pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari ....................................................................

GAMBAR 6.

40

Rerata kadar kreatinin darah tikus betina pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari ...................................................................

GAMBAR 7.

Rerata kadar ureum darah tikus jantan pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari...

GAMBAR 8.

48

Rerata kadar ureum darah tikus betina pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari...

GAMBAR 9.

44

51

Rerata perubahan berat badan tikus jantan setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari...................................................................

GAMBAR 10.

57

Rerata perubahan berat badan tikus betina setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ...................................................................

59

GAMBAR 11.

Asupan pakan tikus jantan selama 28 hari ............

60

GAMBAR 12.

Asupan pakan tikus betina selama 28 hari.............

61

xv

xv


GAMBAR 13.

Asupan minum tikus jantan selama 28 hari...........

62

GAMBAR 14.

Asupan minum tikus betina selama 28 hari...........

63

xvi

xvi


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.

Foto biji alpukat .............................................................

70

Lampiran 2.

Foto serbuk biji alpukat .................................................

70

Lampiran 3.

Foto infusa biji alpukat ..................................................

70

Lampiran 4.

Surat pengesahan determinasi ........................................

71

Lampiran 5.

Surat Ethics Committee Approval .................................

72

Lampiran 6.

Perhitungan kadar air serbuk biji alpukat .......................

73

Lampiran 7.

Perhitungan dosis infusa biji alpukat ..............................

73

Lampiran 8.

Analisis statistik Paired T-test kadar kreatinin tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat ............................................................................

Lampiran 9.

75

Analisis statistik kadar kreatinin tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat ........................................

76

Lampiran 10. Analisis statistik Paired T-test kadar kreatinin tikus betina sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat ............................................................................

80

Lampiran 11. Analisis statistik kadar kreatinin tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat .........................................

81

Lampiran 12. Analisis statistik Paired T-test kadar ureum tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat .......

85

Lampiran 13. Analisis statistik kadar ureum tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat ......................................... Lampiran 14. Analisis statistik Paired T-test kadar ureum tikus betina

xvii

86


sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat .....

90

Lampiran 15. Analisis statistik kadar ureum tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat .........................................

91

Lampiran 16. Analisis statistik perubahan berat badan tikus jantan dan betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari ................................................................

xviii

95

xviii


INTISARI Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin darah tikus akibat pemberian infusa biji Persea americana Mill. dan mengetahui hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji Persea americana Mill. dengan perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni acak lengkap pola searah. Hewan uji yang digunakan sebanyak 50 tikus galur Sprague Dawley (25 ekor jantan dan 25 ekor betina) yang dibagi secara acak kedalam 5 kelompok, yaitu satu kelompok kontrol dan empat kelompok perlakuan. Masing-masing kelompok uji terdiri dari 10 ekor tikus (5 tikus jantan dan 5 tikus betina). Kelompok I (kontrol) diberi aquadest dengan dosis 14285,7 mg/kgBB, kelompok II-V diberi perlakuan infusa biji alpukat dengan peringkat dosis berturut-turut 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB. Sediaan infusa biji alpukat diberikan secara peroral pada hewan uji satu kali sehari selama 28 hari dengan tetap diberikan makan dan minum. Pada hari ke-0 dan hari ke-29 darah tikus diambil melalui sinus orbital mata, kemudian dilakukan pengukuran kadar BUN dan kreatinin dan dilakukan analisis secara statistik. Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian infusa biji Persea americana Mill. selama 28 hari tidak memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar BUN dan kreatinin serta tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji Persea americana Mill. dengan peningkatan kadar BUN dan kreatinin darah tikus jantan dan betina. Kata kunci : BUN, kreatinin, Persea americana Mill., toksisitas, subakut

xix


ABSTRACT The aim of this study was to determine unspecific biochemical changes of BUN and creatinine serum levels after given Persea americana Mill. seeds infusion and to determine relations between Persea americana Mill. seeds infusion dose with BUN and creatinine serum levels changes. This study using pure randomized experimental design, complete with its unidirectional pattern. The subjects for this studies are fifty Sprague Dawley rats (25 male and 25 female). Fifty rats were randomly devided into 5 groups (1 control group and 4 treatment groups). Each group consisted of 10 rats (5 male and 5 female). Control group were treated with water dose 14285.7 mg/kgBB. Group 2-4 were treated with Persea americana Mill. seeds infusion dose 202.24; 360; 640.8 and 1140.62 mg/kgBB. A single dose of Persea americana Mill. seeds infusion given orally for 28 days. At day 0 and 29, blood samples were collected and used for determination of BUN and creatinine serum levels. The data of BUN and creatinine serum levels were statistic analyzed. The result of this study showed that administration of Persea americana Mill. seed infusion for 28 days does not give effect of BUN and creatinine serum levels changes and there are no relations between Persea americana Mill. seeds infusion dose with BUN and creatinine serum levels changes in blood male and female rats. Keywords : BUN, creatinine, Persea americana Mill., subacute, toxicity

xx


BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Obat tradisional sudah sejak dahulu digunakan dan dimanfaatkan untuk mengobati penyakit. Di Indonesia, banyak masyarakat yang menggunakan obat tradisional dengan memanfaatkan tanaman obat. Obat tradisional lebih disukai oleh masyarakat karena memberikan efek samping yang lebih kecil dibandingkan dengan obat modern. Keanekaragaman hayati yang terdapat di Indonesia lebih dari 25.000-30.000 spesies tanaman dan sekitar 6.000 diantara jenis tanaman tersebut memiliki potensi untuk dijadikan tanaman obat (Kardono, Artanti, Dewiyanti, Basuki, 2003). Salah satunya adalah alpukat. Alpukat (Persea americana Mill.) merupakan buah yang mudah dijumpai. Buah ini awalnya berasal dari Amerika Tengah, namun seiring dengan berjalannya waktu kini alpukat telah menyebar diseluruh dunia dan salah satunya adalah Indonesia. Alpukat merupakan tanaman yang tingginya mencapai 20 meter, memiliki daging yang tebal dan terdapat biji di dalamnya yang biasanya berwarna kekuning-kuningan (Sunarjono, 2008). Biji alpukat hanya mewakili sekitar 13-18% dari buah dan biji ini merupakan produk sampingan yang pada umumnya tidak dimanfaatkan. Padahal biji ini dapat dimanfaatkan sebagai obat tradisional karena kandungan metabolit dalam biji seperti saponin, flavonoid, alkaloid, steroid dan fenol (Arukwe, Amadi, Duru, Agomuno, Adindu, Odika, et al., 2012). Adanya kandungan metabolit inilah yang membuat biji alpukat memiliki efek biologis. Berdasarkan beberapa penelitian yang telah dilakukan, biji

1


2

alpukat memiliki efek biologis seperti antioksidan dan fungisida (Padilla, Martinez, Flores, Villanueva, 2013). Selain itu, Anaka, Ozolua and Okpo (2009) telah melakukan penelitian yang membuktikan bahwa biji alpukat memiliki efek sebagai antihipertensi dan penelitian Zuhrotun (2007) membuktikan bahwa ekstrak etanol biji alpukat memiliki efek antidiabetik. Saponin yang terkandung dalam biji alpukat memiliki efek diuretik yang dapat mempercepat pembuangan batu ginjal sehingga dapat digunakan untuk mengobati penyakit batu ginjal (Nwaoguikpe dan Braide, 2011). Adanya penelitian - penelitian mengenai efek biologis biji alpukat yang telah dipublikasikan maka tidak menutup kemungkinan penggunaan akan biji alpukat sebagai obat tradisional akan meningkat. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian toksisitas untuk mengetahui ada tidaknya efek toksik yang ditimbulkan dalam penggunaan biji alpukat sebagai obat tradisional dikalangan masyarakat. Berkaitan dengan ketoksikan, lama pemejanan suatu senyawa merupakan salah satu faktor penentu timbulnya efek toksik akibat dari adanya akumulasi senyawa toksik. Oleh karena itu, untuk mengantisipasi penggunaan biji alpukat jangka panjang oleh masyarakat maka peneliti melakukan uji toksisitas subakut infusa biji alpukat. Uji toksisitas subakut ini memiliki spektrum yang luas, untuk itu perlu dilakukan penelitian toksisitas subakut dengan mengamati perubahan biokimia (SGPT, SGOT, BUN dan kreatinin serta glukosa) dan perubahan struktural pada organ hati, ginjal, pankreas, testis dan uterus. Penelitian ini merupakan penelitian yang tak khas serta dilakukan secara paralel dan seiring


3

dilakukannya penelitian toksisitas subakut ini, juga dilakukan penelitian toksisitas akut oleh Wahyuningsih (2015). Penelitian Yoseph (2013), yaitu mengenai efek nefroprotektif dari penggunaan biji alpukat pada ginjal tikus yang diinduksi CCl4. Hasil penelitiannya menunjukkan bahwa biji alpukat dapat menurunkan kadar kreatinin dalam darah. Adanya efek nefroprotektif tersebut, maka penelitian toksisitas subakut ini lebih berfokus untuk mengetahui adakah efek toksik akibat penggunaan biji alpukat terhadap fungsi ginjal. Ginjal memainkan peranan penting dalam fungsi tubuh, tidak hanya menyaring darah dan mengeluarkan produk-produk sisa, namun juga menyeimbangkan tingkat elektrolit dalam tubuh, menyeimbangkan asam basa dan menstimulus produksi dari sel-sel darah merah. Ginjal menyaring produk-produk sisa dari metabolisme tubuh, seperti urea dari metabolisme protein dan asam urat dari uraian DNA. Dua produk sisa dalam darah yang dapat diukur adalah Blood Urea Nitrogen (BUN) dan kreatinin. BUN dan kreatinin ini dapat digunakan untuk mengetahui fungsi ginjal sebab urea dan kreatinin difiltrasi oleh glomerulus ginjal. Pada keadaan ginjal sehat dan laju GFR normal, maka kadar kreatinin dan urea dalam darah akan berada dalam range normal. Namun ketika terjadi penurunan fungsi ginjal dan laju GRF menurun, maka kreatinin dan urea yang difiltrasi diglomerulus akan menurun, sehingga kadarnya di dalam darah akan meningkat. Kadar BUN dan kreatinin yang meningkat dalam darah dapat digunakan sebagai penanda adanya penurunan fungsi ginjal (Guyton dan Hall,


4

2008). Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efek dari penggunaan infusa biji alpukat terhadap perubahan kadar BUN dan kreatinin. Pada umumnya masyarakat mengolah biji alpukat sebagai obat tradisional dalam bentuk rebusan sedangkan infusa merupakan sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 900 C selam 15 menit (Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010). Oleh karena itu, menggunakan sediaan infusa pada penelitian ini karena mirip dengan rebusan yang biasa dilakukan oleh masyarakat. 1.

Perumusan masalah a.

Apakah pemberian infusa biji Persea americana Mill. secara subakut memberikan perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin pada tikus?

b.

Adakah hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji Persea americana Mill. dengan perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin?

2.

Keaslian penelitian Terdapat beberapa penelitian yang sebelumnya telah dilakukan terhadap

biji Persea americana Mill. diantaranya, Anggraeni (2006) menguji aktivitas infusa biji Persea americana Mill. dengan dosis 0,315 g/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus Wistar yang diberi beban glukosa. Penelitian yang serupa juga dilakukan oleh Zuhrotun (2007), aktivitas antidiabetes ekstrak etanol


5

biji buah alpukat Persea americana Mill. bentuk bulat. Pramadyasiwi (2010), melakukan penelitian bahwa pemberian jus buah alpukat dapat mencegah peningkatan kadar BUN pada dosis 1,5 g/kgBB/hari dan serum kreatinin pada dosis 0,5 g/kgBB/hari pada tikus Wistar yang diberi parasetamol dosis toksik. Sementara itu Ozolua, Anaka, Okpo, Idogun, (2009) menguji toksisitas akut dan subakut dari ekstrak biji Persea americana Mill. pada tikus. Marlinda, Sangi dan Wuntu (2012), melakukan analisis senyawa metabolit sekunder dan uji toksisitas ekstrak etanol biji buah alpukat (Persea americana Mill.). Efek biji Persea americana Mill. pada tekanan darah dan profil lemak tikus hipertensi telah dilakukan oleh Imafidon dan Amaechina (2010). Selain itu, Setiawan (2013) melakuan penelitian tentang pengaruh waktu protektif pemberian infusa biji Persea americana Mill. secara akut terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida. Pada tahun yang sama Yoseph melakukan penelitian mengenai efek nefroprotektif infusa biji Persea americana Mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus yang terinduksi CCl4. Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan oleh peneliti, belum pernah dilakukan uji toksisitas subakut biji Persea americana Mill. pada tikus Sprague Dawley terhadap peningkatan kadar BUN dan kreatinin. 3.

Manfaat penelitian a.

Manfaat teoritis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat bagi ilmu kefarmasian, khususnya ilmu pengembangan obat tradisional biji Persea americana Mill.


b.

6

Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat mengenai pengaruh penggunaan infusa biji Persea americana Mill. selama 28 hari terhadap perubahan kadar BUN dan kreatinin.

B. Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya

perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin dari pemberian infusa biji Persea americana Mill. secara subakut. 2.

Tujuan khusus Secara khusus penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan

kekerabatan antara dosis infusa biji Persea americana Mill. dengan perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar BUN dan kreatinin.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Persea americana Mill. 1.

Taksonomi Persea americana Mill. Berdasarkan penggolongan dan tata nama tumbuhan, Persea americana

Mill. termasuk ke dalam klasifikasi sebagai berikut. Kingdom

: Plantae

Sub kingdom : Tracheobionta Divisi

: Magnoliophyta

Subdivisi

: Spermatophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Sub kelas

: Magnoliidae

Ordo

: Laurales

Famili

: Lauraceae

Genus

: Persea

Spesies

:Persea americana Mill. (Plantamor, 2012).

7


2.

8

Morfologi Persea americana Mill. Persea americana Mill. merupakan tanaman yang tingginya mencapai 20

meter. Memiliki daun yang panjang (lonjong) tersusun seperti pilin terpusat pada ujung ranting. Pada umumnya percabangannya jarang dengan arah horizontal. Bunganya sempurna, terdapat putik dan benang sari dalam satu bunga, tetapi tidak serempak dan bunganya berwarna putih. Persea americana Mill. memiliki buah yang berbentuk bulat hingga lonjong dengan berat antara 300-800 g per buah. Daging buah hanya dibatasi oleh selaput kulit biji yang tebal dan umumnya biji berwarna kekuning-kuningan. Biji bulat seperti bola dengan diameter 2,5-5 cm dan keping biji putih kemerahan. Warna buah ada yang hijau, ungu hingga merah kehitaman. Tanaman ini memiliki akar tunggang dan akar samping yang kuat serta dalam (Sunarjono, 2008). 3.

Tipe Persea americana Mill. Asal usul tanaman Persea americana Mill. adalah dari Amerika Tengah,

yaitu Meksiko, Peru hingga Venezuela. Namun kini Persea americana Mill. telah menyebar keseluruh dunia termasuk Indonesia. Persea americana Mill. memiliki beberapa tipe, yaitu tipe Meksiko (Persea drymifolia), tipe Guatemala (Persea guatemalensis) dan tipe Indian Barat (Persea americana). Tipe Meksiko dan Indian Barat termasuk ke dalam spesies Persea americana sedangkan tipe Guatemala termasuk spesies Persea mubigena (Sunarjono, 2008).


9

Spesies Persea mubigena terdapat beberapa tipe diantaranya adalah Hazzard dan Wurtz. Perbedaan antara Hazzard dan Wurtz dapat dilihat pada tabel I. Tabel I. Perbedaan Hazzard dengan Wurtz

Tinggi pohon Bentuk daun Berbuah

Berat buah Bentuk buah Rasa buah Diameter buah Panjang buah Hasil

Hazzard

Wurtz

5-8 m Bulat panjang dengan tepi rata Terus-menerus tergantung pada lokasi dan kesuburan lahan 0,3-0,5 kg Bentuk pear (piriform) Enak, gurih, agak lunak 6,5-10 cm (rata-rata 8 cm) 11,5-18 cm (rata-rata 14 cm) 40-80 kg/pohon/tahun (rata-rata 50 kg)

6-8 m Bulat panjang dengan tepi berombak Terus-menerus tergantung pada lokasi dan kesuburan lahan 0,3-0,4 kg Lonjong (oblong) Enak, gurih, agak kering 7,5 cm 9 cm 20-60 kg/pohon/tahun (rata-rata 30 kg) (Prihatman, 2000).

Tanaman alpukat memiliki berbagai macam nama yang berbeda-beda ditiap daerah, yaitu alpuket (Jawa Barat), alpokat (Jawa Timur atau Jawa Tengah), buah pokat, jambu pokat (Batak), jambo mentega, jamboo pooan, pokat (Lampung) dan lain sebagainya (BAPPENAS,2000). 4.

Manfaat Persea americana Mill. Tiap bagian dari tanaman alpukat ini memiliki manfaat yang berbeda-

beda, seperti daging buahnya bisa untuk dikonsumsi, daunnya bisa sebagai antibakteri sedangkan bijinya (gambar 1) dapat digunakan untuk mengobati sakit gigi dan diabetes (Maryati, 2007). Selain itu, ekstrak air biji alpukat dapat


10

digunakan untuk mengobati hipertensi (Imafidon, Amaechina, 2010). Berdasarkan penelitian biji alpukat memiliki aktivitas farmakologi, yaitu antioksidan dan fungisida (Padilla, et.al., 2013). Tanaman alpukat memiliki buah yang mengandung lemak sekitar 20-30 kali lebih banyak dibandingkan dengan buah lainnya. Kandungan lemak ini dapat memberikan energi yang cukup bagi tubuh. Jenis lemak ini termasuk asam oleat dan asam linoleat yang mudah dicerna di dalam tubuh. Dalam penelitian yang dilakukan di Amerika sampel yang diteliti mengalami penurunan serum kolesterol jenuh sebanyak 8,7-42,8%. Alpukat mengandung mineral yang berguna untuk mengatur fungsi tubuh dan menstimulus pertumbuhan. Mineral yang paling menonjol adalah besi dan tembaga yang berfungsi dalam membantu proses regenerasi sel darah merah dan mencegah anemia (Mahendra, Rachmawati dan Evi, 2005). Kandungan lutein dan zeaxantin dapat melindungi kulit dari kerusakan kulit akibat radiasi sinar UV (Roberts, Green, Lewis, 2009). Sementara itu kandungan karotenoid, terpenoid, fenol dan glutation dapat memberikan efek antikarsinogenik (Ding, Han, Guo, Chin, Ding, Kinghorn, et.al., 2009). Menurut Yong, Petersen, Siguardson, Sampson, Ward (2009) xantophylls yang terkandung dalam alpukat dapat memberikan efek antioksidan dan melindungi kerusakan DNA. Selain itu, kandungan karotenoid dalam alpukat dapat menurunkan kerusakan kartilago sehingga dapat mengurangi resiko terkena osteoarthritis (Wang, Connor, Johnson, Klein, Hughes, 2007).


11

Gambar 1. Biji Persea americana Mill. (Agrilink, 2001)

5.

Kandungan senyawa fitokimia Persea americana Mill. Senyawa-senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada biji buah

alpukat adalah alkaloid, triterpenoid, tanin, flavonoid dan saponin (Marlinda, et al., 2012). Flavonoid adalah antioksidan yang larut dalam air dan dapat membersihkan radikal bebas. Flavonoid mencegah kerusakan sel, memiliki aktivitas antikanker dan melindungi terjadinya karsinogenesis. Dalam penelitian yang dilakukan oleh Arukwe, et.al., (2012) menunjukkan kandungan fitokimia (tabel II) yang terdapat pada biji alpukat, salah satu kandungannya adalah alkaloid yang dapat digunakan untuk analgesik dan efek bakterisida. Tabel II. Kandungan fitokimia pada biji alpukat Kandungan Saponin Tanin Flavonoid Alkaloid Fenol Steroid

Berat (mg) ± SD 19,21 ± 2,81 0,24 ± 0,12 1,90 ± 0,07 0,72 ± 0,12 6,14 ± 28 0,09 ± 0,00 (Arukwe, et .al., 2012)


12

B. Ginjal 1.

Anatomi ginjal Ginjal merupakan organ retroperitoneal yang berperan dalam proses

ekskresi didalam tubuh dan menempel pada dinding posterior abdomen, dibelakang peritonium dan dibawah diafragma (Nurachmah, Angriani, 2011). Ginjal berbentuk seperti kacang dengan warna merah kecoklatan dan dikelilingi oleh jaringan adiposa (Standring, 2005). Berat ginjal tikus jantan umur 3 bulan sekitar 2,5 g sedangkan berat ginjal pada tikus betina umur 3 bulan sekitar 1,7 g (Harlan, 1999). Ginjal melekat pada posisinya karena berikatan dengan suatu massa lemak. Selubung fasia renal fibroelastik membungkus ginjal dan lemak ginjal (Nurachmah, Angriani, 2011). Terdapat sepasang ginjal, yaitu kanan dan kiri, bagian kanan jauh lebih pendek dan tebal daripada bagian kiri. Posisi ginjal bagian kanan terletak lebih rendah daripada ginjal bagian kiri karena adanya organ hati yang terdapat pada bagian kanan (Gartner dan Hiatt, 2007).

Gambar 2. Anatomi ginjal (Bioclasses, 2013)


13

Secara anatomi (gambar 2), bagian terluar dari ginjal disebut korteks dengan ketebalan sekitar 1,2 sampai 1,6 cm. Bagian lebih dalam lagi disebut dengan medula. Pada bagian medula ini terdapat piramida yang merupakan bukaan saluran pengumpul kemudian bagian paling dalam disebut pelvis (Robbins dan Cotran, 2009). Ginjal bagian kiri maupun kanan masing-masing terdiri dari kurang lebih satu juta nefron. Di dalam nefron terdapat glomerulus yang terletak di korteks ginjal dan hasil penyaringannya akan menuju tubulus ginjal. Tubulus ginjal terdiri dari tubulus proksimal, tubulus distal dan lengkung Henle yang merupakan tempat terjadinya proses reabsorpsi air, elektrolit dan zat-zat penting lainnya. Urin yang dihasilkan akan dialirkan ke dalam duktus koligentes, air dalam urin tersebut akan diabsorpsi lebih lanjut sebelum dialirkan ke piramid ginjal. Bagian tebal dari lengkung Henle asendens memiliki sel yang melekat dengan mesangium ekstra glomerular dan arteriol aferen, ketiganya membentuk aparatus jukstaglomerular. Aparatus ini akan mensekresi renin yang berperan dalam pengaturan aliran darah ke glomerulus serta laju filtrasinya (Davey, 2006). 2.

Fisiologi ginjal Proses filtrasi akan memindahkan produk sisa dari darah menuju ke

dalam lumen tubulus yang selanjutnya dikeluarkan bersama dengan urin. Air yang menembus dinding duktus koligens akan membantu memekatkan urin yang pada umumnya hipertonik terhadap plasma darah (Junqueira, Carneiro, dan Kelley,


14

2007). Ginjal merupakan salah satu organ vital yang memiliki beberapa fungsi, yaitu sebagai berikut. a.

Pembentukan urin. Ginjal membentuk urin yang mengalir melalui ureter ke kandung kemih untuk disimpan sebelum diekskresi.

b.

Filtrasi. Terjadi di dinding semipermeabel glomerulus dan kapsul Bowman. Air dan molekul kecil lainnya dapat melewati dinding semipermeabel ini. Namun sel darah merah, protein plasma dan molekul besar lainnya terlalu besar untuk difiltrasi sehingga tetap berada di kapiler.

c.

Mengatur keseimbangan asam-basa. Bersama dengan paru-paru dan sistem dapar cairan tubuh, ginjal turut mengatur asam-basa dengan cara mengekskresikan asam, seperti asam sulfur dan asam fosfat yang dihasilkan oleh metabolisme protein.

d.

Mengatur produksi eritrosit. Eritropoetin disekresikan oleh ginjal yang kemudian akan merangsang pembentukan sel darah merah. Salah satu rangsangan yang penting untuk sekresi eritropoetin adalah hipoksia. Pada kondisi normal, ginjal akan mensekresikan seluruh eritropoetin kedalam sirkulasi, namun pada orang dengan penyakit ginjal berat atau ginjalnya sudah diangkat, maka akan timbul anemia berat karena menurunnya produksi eritropoetin.

e.

Sintesis glukosa. Glukosa disintesis oleh ginjal dari asam amino dan prekursor lainnya selama puasa, yang biasa disebut dengan proses glukoneogenesis. Pada kondisi gagal ginjal akut fungsi


15

homeostatik ini akan terganggu sehingga terjadi abnormalitas komposisi dan volume cairan tubuh yang berat dan cepat. Dalam beberapa hari akan terjadi akumulasi kalium, asam, cairan dan zatzat lainnya dalam tubuh yang pada akhirnya akan menyebabkan kematian. f.

Mengatur keseimbangan keluaran air dan urin. Keluaran urin minimum merupakan volume terkecil yang diperlukan untuk mengekskresikan produk sisa tubuh, yaitu sekitar 500 ml per hari. Volume urin diatur oleh hormon antidiuretik yng dilepaskan didalam darah oleh lobus posterior kelenjar hipofisis. Hipofisis posterior ini berkaitan dengan hipotalamus di otak (Guyton dan Hall, 2008).

g.

Keseimbangan elektrolit. Adanya perubahan konsentrasi elektrolit didalam cairan tubuh dapat menyebabkan perubahan isi cairan tubuh atau kadar elektrolit. Terdapat beberapa mekanisme untuk mempertahankan keseimbangan elektrolit diantaranya adalah mengatur keseimbangan natrium dan kalium, keseimbangan kalsium dan keseimbangan pH normal darah (Nurachmah, Angriani, 2011).

Fungsi ginjal dapat menurun bisa disebabkan karena salah satu faktor, yaitu adanya penyakit pada organ ini. Pada berbagai keadaan yang menghalangi fungsi ginjal dengan serius dapat menimbulkan gagal ginjal akut maupun kronik. Gagal ginjal akut bisa disebabkan oleh oligouria atau berkurangnya urin, disertai


16

azotemia yang baru timbul. Azotemia adalah suatu kelainan biokimia yang ditandai dengan adanya peningkatan kadar blood urea nitrogen (BUN) dan kreatinin yang pada umumnya berkaitan dengan menurunnya laju filtrasi glomerulus sedangkan gagal ginjal kronis ditandai dengan gejala dan tanda uremia yang berkepanjangan yang merupakan hasil akhir dari semua penyakit parenkim ginjal kronik (Robbins dan Cotran, 2009). Salah satu penyakit mengenai tubulus, yaitu nekrosis. Nekrosis merupakan suatu pembekakan sel yang kemudian mengalami lisis. Sel yang nefrotik terlihat membesar dan lebih merah dibanding dengan sel normal. Nekrosis ini menyebabkan kematian sel dan memperlihatkan respon peradangan (Kumar, Abbas dan Fausto, 2010). Homeostatis konsentrasi air dan elektrolit diatur oleh sistem perkemihan. Ginjal menghasilkan urin yang mengandung produk sisa metabolisme nitrogen, yang meliputi urea, asam urat, kelebihan ion serta beberapa obat. Urin terdiri dari air (96%), urea (2%), dan 2% terdiri atas asam urat, kreatinin, amonium, natrium, kalium, klorida, fosfat, sulfat dan oksalat (Nurachmah, Angriani, 2011). C. Blood Urea Nitrogen (BUN) Salah satu indeks fungsi ginjal yang paling penting adalah laju filtrasi glomerulus atau Glomerular Filtration Rate (GFR) yang dapat memberikan informasi mengenai jumlah jaringan ginjal yang masih berfungsi. Secara sederhana GFR dapat diukur menggunakan BUN dan kadar kreatinin (Noer, 2006; Price dan Wilson, 2006).


17

BUN adalah produk akhir dari metabolisme protein yang diekskresikan melalui urin. Penurunan kadar BUN dapat disebabkan oleh hipervolemia (overhidrasi), kerusakan hati yang berat, diet rendah protein, malnutrisi dan kehamilan, sedangkan peningkatan kadar BUN dapat disebabkan oleh dehidrasi, konsumsi protein yang tinggi, suplai darah ke ginjal menurun, gagal ginjal, glomerulonefritis dan sepsis (Sutedjo, 2009). Pembentukan ureum sebagai hasil metabolisme protein normal diawali dengan derivatisasi asam amino, yaitu ornitina (gambar 3) yang akan bergabung bersama carbamoyl phosphate untuk membentuk sitrulin. Sitrulin bersama molekul aspartat akan membentuk argininosuccinate yang selanjutnya berubah menjadi arginina. Arginina kemudian akan dipecah menjadi ornitina dan urea. Urea ini akan berdifusi dari sel hati ke cairan tubuh dan kemudian akan diekskresi melalui ginjal sedangkan ornitina kembali digunakan untuk siklus berulang (Miles, 2003).

Gambar 3. Tahapan pembentukan urea (Miles, 2003)


18

Kecepatan aliran urin menyebabkan reabsorpsi BUN menurun, begitu pula sebaliknya apabila alir urin menurun maka reabsorpsi BUN meningkat. Kadar ureum dalam darah hewan dapat dipengaruhi oleh kondisi patologis, seperti adanya penurunan fungsi ginjal dan kekurangan cairan tubuh. Selain itu, juga dapat dipengaruhi oleh asupan pakan tinggi protein. Protein yangdimakan akan meningkatkan pelepasan asam amino yang kemudian akan menghasilkan amonia yang selanjutnya dirubah menjadi urea (Guyton dan Hall, 2007). Asupan protein yang tinggi akan meningkatkan aliran darah pada ginjal dan laju filtrasi glomerulus sampai sekitar 20-30 sesaat setelah subjek uji diberi pakan (Meyer, 2004). Kadar ureum normal pada tikus, yaitu 15-21 mg/dl (Malole & Pramono, 1989). Pemeriksaan BUN dapat dilakukan menggunakan metode Diasetil Monoksim atau Tiosemikarbazid. Prinsip dari metode ini adalah urea dalam filtrat akan bereaksi dengan diasetil monoksim dalam suasana basa, mengoksidasi reagen dan tiosemikarbazid, kemudian akan menghasilkan warna merah dan diukur menggunakan colorimeter (Biomed dan Lestari, 2011). Selain itu, pengukuran BUN juga dapat dilakukan dengan menggunakan metode Enzymatic UV test, Urease - GLDH. Nitrogen urea dioksidasi menggunakan enzim urease danenzim GLDH, perubahan absorbansi diukur menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 340 nm pada suhu 37°C (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2014).


19

D. Kreatinin Kreatinin merupakan produk akhir dari metabolisme kreatinin otot dan kreatinin fosfat (protein), yang disintesis didalam hati dari metionina, glisina, dan arginina, ditemukan dalam otot rangka dan darah serta diekskresikan dalam urin. Terbentuknya kreatinin (gambar 4) ini diawali dengan sintesis ATP. ATP yang dihasilkan dari proses glikolisis dan fosforilasi oksidatif ini akan bereaksi dengan kreatin kemudian akan membentuk ADP dan fosfokreatin yang mengandung ikatan fosfat energi tinggi (lebih tinggi dari ATP). Fosfokreatin dengan ATP memiliki hubungan yang reversibel karena apabila banyak terdapat ATP dalam sel, maka sebagian akan dirubah menjadi fosfokreatin sehingga membentuk cadangan energi. Sebaliknya, bila ATP mulai habis, maka energi dalam fosfokreatin akan ditransfer kembali dalam bentuk ATP. Kreatinin fosfat yang dihasilkan akan membentuk kreatinin yang selanjutnya akan difiltrasi oleh glomerulus, sebagian kecil difiltrasi oleh tubulus proksimal dan diekskresikan oleh ginjal (Sacher and Richard, 2004).

Gambar 4. Proses pembentukan kreatinin (Kramer, 2004)


20

Kreatinin yang dihasilkan didalam tubuh dapat digunakan untuk mengevaluasi fungsi glomerulus dengan cara melakukan pemeriksaan serum kreatinin. Pemeriksaan serum kreatinin sebagai indeks laju filtrasi glomerulus lebih baik dibanding dengan pemeriksaan ureumkarena kecepatan produksi kreatinin pada massa otot hanya sedikit mengalami perubahan karena pada umumnya kreatinin tidak begitu terpengaruh oleh protein. Meningkatnya kreatinin dalam darah dan urin merupakan tanda adanya kerusakan fungsi ginjal (Laboratorium Amerind Bio-Clinic, 2010). Peningkatan kreatinin terjadi pada gagal ginjal akut dan kronis, nefropati diabetik dan gagal jantung kongesti (Sutedjo, 2009).Menurut Malole dan Pramono (1989), kadar normal kreatinin pada tikus adalah 0,2-0,8 mg/dl. Kadar BUN dan kreatinin dalam darah dapat digunakan untuk mengukur laju filtrasi glomerulus, meskipun pemeriksaan kreatinin lebih direkomendasikan. Pada dasarnya BUN dan kreatinin memiliki beberapa perbedaan yang disajikan pada tabel III. Tabel III. Perbedaan BUN dan kreatinin BUN Serum Kreatinin Protein eksogen dan Hidrolisis nonenzimatik Sumber endogen dari kreatin Keteraturan produksi Bervariasi Lebih stabil Filtrasilengkap, reabsorpsi Penanganan oleh ginjal Filtrasi lengkap tubular Nilai sebagai marker Kurang akurat karena Akurat GFR dipengaruhi oleh protein

(Dwinnell dan Anderson, 1999).


21

Terdapat beberapa jenis metode dalam pemeriksaan kreatinin seperti metode Jaffe Reaction, yaitu pemeriksaan dalam suasana alkalis, kreatinin dengan asam pikrat akan membentuk senyawa berwarna kuning jingga menggunakan alat photometer. Selain itu, dapat pula menggunakan metode Kinetik yang pada dasarnya hampir sama dengan Jaffe Reaction, hanya saja dibutuhkan pembacaan dalam metode ini. Alat yang digunakan adalah autoanalyzer. Metode Enzimatik, dalammetode ini sampel yang diperiksa terdapat substrat yang nantinya akan bereaksi dengan suatu enzim membentuk senyawa enzim substrat. Alat yang digunakan adalah photometer (Sacher dan Richard, 2004).

E. Sediaan Infusa Infusa merupakan salah satu dari metode ekstraksi. Ekstraksi adalah proses penarikan suatu senyawa kimia dari bahan alam dengan menggunakan pelarut tertentu. Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 900C selama 15 menit. Infusa dapat dibuat dari bahan lunak seperti daun dan bunga serta dapat diminum panas atau dingin. Serkai selagi panas menggunakan kain flanel kemudian menambahkan air panas secukupnya diatas ampas sampai mencapai volume yang diinginkan (BPOM RI, 2010). F. Uji Toksisitas Subakut Secara umum uji toksikologi dibedakan menjadi dua, yaitu uji ketoksikan khas dan tak khas. Uji ketoksikan tak khas merupakan uji yang yang digunakan untuk mengevaluasi secara keseluruhan atau spektrum efek toksik suatu senyawa,


22

yang termasuk kedalam uji ini adalah uji toksisitas akut, sub kronis dan kronis. Uji ketoksikan khas merupakan uji yang mengevaluasi secara rinci efek yang ditimbulkan oleh suatu seenyawa pada aneka ragam hewan uji. Uji ketoksikan jenis ini meliputi potensiasi, kemutagenikan, teratogenik dan reproduksi (Donatus, 2001). Uji toksisitas subakut adalah suatu pengujian yang bertujuan untuk mengetahui efek toksik yang muncul setelah sediaan uji diberikan dengan dosis berulang secara oral pada hewan uji. Penelitian toksisitas subakut pada prinsipnya sediaan uji dalam beberapa tingkatan dosis diberikan pada hewan uji dengan satu dosis per kelompok setiap hari selama 28 atau 90 hari, dan bila diperlukan ditambahkan suatu kelompok satelit untuk melihat adanya efek tertunda atau efek yang bersifat reversibel. Hewan uji selama perlakuan diamati setiap hari untuk menentukan adanya toksisitas. Dosis uji yang digunakan harus setara dengan penggunaan dalam masyarakat. Dalam uji toksisitas subakut oral minimal menggunakan tiga peringkat dosis perlakuan dan satu kelompok kontrol serta dua kelompok satelit (jika diperlukan) (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2014). Hewan uji yang digunakan dalam uji toksisitas adalah hewan yang memiliki metabolisme yang serupa dengan manusia dan memiliki kemudahan penanganan pada saat dilakukan percobaan. Hewan yang digunakan harus sehat, jelas asal, galur, jenis kelamin, umur dan berat badannya. Biasanya digunakan rodensia tikus putih. Masing-masing kelompok dosis menggunakan hewan minimal 10 ekor yang terdiri dari 5 ekor jantan dan 5 ekor betina. Pada uji


23

toksisitas dilakukan pengamatan berat badan, asupan pakan, minum hewan uji (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2014). Pada dasarnya efek toksik yang ditimbulkan suatu senyawa bergantung pada kondisi pemejanan, kondisi makluk hidup, mekanisme antaraksi, dan wujud serta jenis efek toksik. Kondisi pemejanan ini meliputi jenis pemejanan, jalur pemejanan, saat dan takaran pemejanan serta lama dan kekerapan pemejanan (Donatus, 2001). Berkaitan dengan ketoksikan racun, kekerapan dan lama pemejanan racun merupakan faktor yang dapat mempengaruhi ketoksikan suatu racun. Lama pemejanan racun adalah batas kurun waktu pemejanan sesuatu terhadap makluk hidup tertentu sedangkan kekerapan pemejanan adalah batas pemejanan racun terhadap makluk hidup setiap satuan waktu dengan takaran atau dosis serta melalui jalur pemejanan tertentu. Suatu senyawa yang dipejankan hanya sekali (jenis pemejanan akut) selama kurun waktu tertentu mungkin akan memberikan efek toksik yang berbeda dengan yang ditimbulkan oleh pemejanan berulang (jenis pemejanan kronis). Selain itu faktor fisiologis dan patologis subjek juga dapat mempengaruhi ketoksikan suatu senyawa. Faktor fisiologis meliputi berat badan, jenis kelamin, kehamilan dan kecepatan aliran darah sedangkan faktor patologis meliputi aneka ragam penyakit, diantaranya adalah penyakit saluran cerna, kardiovaskuler, hati dan ginjal. Dalam metode pengujian toksikologi, kondisi ini juga sangat diperhatikan, misalnya dalam pemilihan jenis hewan uji (Donatus, 2001).


24

G. Keterangan Empiris Penelitian ini merupakan penelitian eksplorasi untuk mendapatkan bukti adanya efek toksisitas subakut dari infusa biji Persea americana Mill. terhadap perubahan

kadar

BUN

dan

kreatinin

pada

darah

tikus.


BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Uji toksisitas subakut infusa biji Persea americana Mill. terhadap perubahan biokimia kadar BUN dan kreatinin tikus putih jantan dan betina galur Sprague Dawley termasuk penelitian eksperimental murni rancangan acak lengkap pola searah. B. Variabel dan Definisi Operasional 1.

Variabel utama a.

Variabel bebas . Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi peringkat dosis pemberian infusa biji Persea americana Mill.

b.

Variabel tergantung. Variabel tergantung pada penelitian adalah perubahan kadar BUN dan serum kreatinin tikus Sprague Dawley.

2.

Variabel pengacau a.

Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali pada penelitian ini antara lain, kondisi hewan dan bahan uji yang digunakan 1) Hewan uji yang digunakan adalah tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley dengan berat badan 150-250 g dan umur 2-3 bulan yang diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

25


26

2) Bahan uji yang digunakan yaitu biji Persea americana Mill. meliputi waktu panen, tempat tumbuh dan suhu. 3) Frekuensi pemberian infusa biji alpukat satu kali sehari berturutturut dengan waktu yang sama secara peroral. b.

Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali pada penelitian ini adalah kondisi patologis hewan uji yang digunakan, yaitu tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley.

3.

Definisi operasional a.

Dosis infusa biji Persea americana Mill. Dosis infusa dalah sejumlah 8 g serbukbiji Persea americana M. yang dibuat dalam bentuk infusa dengan peringkat dosis sebesar 202,24; 360; 640,8dan 1140,62 mg/kgBB.

b.

Biji Persea americana Mill. Biji Persea americana Mill. yang digunakan merupakan biji alpukat segar yang tidak busuk.

c.

Perubahan

kadar

BUN

dan

kreatinin.Ditunjukkan

dengan

peningkatan atau penurunan yang berbeda bermakna dibandingkan kontrol negatif setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari. d.

Pemberian infusa. Pemberian infusa biji alpukat satu kali sehari selama 28 hari berturut-turut pada waktu yang sama secara oral.


27

C. Bahan Penelitian

1. Hewan uji Menggunakan tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley dengan umur 2-3 bulan dan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. 2. Biji Persea americana Mill. Biji Persea americana Mill. diperoleh dari Depot es Teller 77 yang berada di Galeria Mall, Yogyakarta pada bulan Juni2014. Berdasarkan keterangan pemilik Depot es Teller 77, buah alpukat berasal dari distributor Klaten dan biji Persea americana Mill. yang digunakan berasal dari buah alpukat yang tidak busuk. 3. Pelarut Pelarut yang digunakan untuk pembuatan infusabiji alpukat, yaitu aquadest yang diperoleh dari Laboratorium Farmakognosi – Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta. 4. Pakan dan minum Tikus diberi pakan pelet AD-2 yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta dan diberi minum air reverse-osmosis (RO) yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma,Yogyakarta.


28

D. Alat atau Instrumen Penelitian 1. Alat pembuatan serbuk biji Persea americana Mill. Alat-alat yang digunakan untuk pembuatan serbuk, yaitu timbangan digital, oven, blender, ayakan no 40 dan wadah untuk menyimpan serbuk biji alpukat.

2. Alat penetapan kadar air Alat-alat yang digunakan untuk penetapan kadar air, yaitu Moisture Balance, stopwatch, sendok dan gelas piala.

3. Alat pembuatan infusa biji Persea americana Mill. Alat pembuatan infusa biji alpukat yang digunakan, yaitu timbangan, panci enamel, termometer, stopwatch, heater, gelas piala, batang pengaduk, kain flanel dan gelas ukur.

4. Alat uji toksisitas biji Persea americana Mill. Alat uji toksisitas yang digunakan, yaitu timbangan, Bekker glass, jarum suntik peroral, spuit injeksi, eppendorf, pipa kapiler (haemotokrit), dan metabolic cage.

E. Tata Cara Penelitian 1.

Determinasi tanaman Persea americana Mill. Determinasi tanaman Persea americana Mill. dilakukan dengan

mencocokkan ciri-ciri morfologi biji Persea americana Mill. yang diperoleh dari Depot es Teller 77 dengan biji yang telah diketahui pasti merupakan biji Persea


29

americana Mill. Determinasi ini dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

2.

Pengumpulan bahan Bahan uji yang digunakan adalah biji Persea americana Mill. yang

diperoleh dari Depot es Teller 77 di Galeria Mall, Yogyakarta pada bulan Juni 2014. Berdasarkan keterangan pemilik Depot es Teller 77, buah alpukat berasal dari distributor Klaten.

3.

Pembuatan serbuk Biji Persea americana Mill. dibersihkan dari kulit luarnya, dipotong

kecil-kecil dengan tebal sekitar satu cm lalu dicuci sampai bersih dibawah air mengalir kemudian dikering anginkan hingga biji terlihat tidak basah lagi. Biji tersebut selanjutnya dimasukkan ke dalam oven pada suhu 500 C selama 72 jam untuk proses pengeringan. Biji yang telah kering kemudian diserbuk dan diayak menggunakan ayakan nomor 40. Pengayakkan yang dilakukan pada serbuk biji Persea americana Mill. bertujuan untuk memperkecil ukuran partikel sehingga semakin besar luas permukaan yang akan kontak dengan pelarut yang digunakan dalam pembuatan infusa, yaitu aquadest. 4.

Penetapan kadar air serbuk bijiPersea americana Mill. Sebanyak ±5 g serbuk biji Persea americana Mill. yang sudah diayak

kemudian dimasukkan kedalam alat Moisture Balance. Selanjutnya dipanaskan


30

pada suhu 1050C selama 15 menit kemudian akan muncul % kadar air serbuk tersebut.

5.

Penetapan dosis infusa biji Persea americana Mill. Peringkat dosis infusa biji alpukat didasarkan pada pengobatan yang biasa

digunakan oleh masyarakat, yaitu ± 2 sendok makan (4 g) serbuk yang direbus dengan 250ml air. Maka dosis perlakuan yang digunakan adalah 4 g/70kgBB manusia. Berdasarkan data diatas maka konversi dosis manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018. Dosis untuk tikus: 200 g = 0,018 x 4 g = 0,072 g/200gBB = 360 mg/kgBB. Berdasarkan hasil orientasi infusa biji alpukat pada penelitian nefroprotektif yang dilakukan oleh Yoseph (2013), konsentrasi maksimal infusa biji alpukat yang dapat dibuat adalah 8g/100ml dengan asumsi berat badan hewan uji maksimal adalah 350 g dan volume maksimal pemberian infusa untuk tikus secara p.o adalah 5 ml. Maka dilakukan perhitungan dosis tinggi perlakuan: D x BB = C x V D x 350 g = 8 g/ 100ml x 5 ml D = 1142,8 mg/kgBB Perhitungan faktor kelipatan dari dosis rendah dan dosis tinggi sebagai berikut. dosis tinggi = dosis rendah

1142,8 360

= 1,78 (Faktor kelipatan)


31

Berdasarkan faktor kelipatan yang maka diperoleh 4 peringkat dosis, yaitu: Dosis I

: 360 mg/kgBB : 1,78 =202,24 mg/kgBB

Dosis II

: 360 mg/kgBB

Dosis III

: 360 mg/kgBB x 1,78 = 640,8 mg/kgBB

Dosis IV

: 640,8 mg/kgBB x 1,78 = 1140,6mg/kgBB

6.

Penetapan dosis aquadest sebagai kontrol negatif Untuk menentukan dosis aquadest digunakan berat badan tertinggi untuk

mengetahui jumlah dosis maksimum yang harus diberikan kepada hewan uji. Berdasarkan rumus didapatkan dosis maksimum, yaitu: D x BB

= CxV

D x 350 g

= 1000 mg/ml x 5ml

D

= 1000 mg x 5 / 350 gBB = 5000 mg / 0,35 kgBB =14285,7 mg/kgBB

7.

Pembuatan infusa biji Persea americana Mill. Menimbang sebanyak 8 g serbuk kering lalu dimasukkan ke dalam panci

enamel, dibasahi dengan aquadest sebanyak dua kali dari bobot yang ditimbang, yaitu 16 ml. Ditambahkan lagi dengan aquadest 100 ml. Selanjutnya panci enamel dipanaskan diatas penangas air pada suhu 900 C dan dijaga suhunya selama 15 menit. Lima belas menit dihitung ketika suhu mencapai 900 C. Setelah 15 menit larutan diambil dan diperas menggunakan kain flannel hingga mencapai volume perasan 100 ml infusa biji Persea americana Mill. Pemanasan pada suhu 900C


32

selama 15 menit bertujuan untuk mencegah agar senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam serbuk biji alpukat tidak rusak. Sementara itu bentuk sediaan infusa memiliki kelebihan dan kekurangan. Kelebihannya, yaitu pembuatan sediaan infusa dapat dilakukan dengan mudah karena sediaan infusa sama seperti rebusan yang biasa dilakukan oleh masyarakat. Namun sediaan infusa ini tidak bertahan lama. Apabila sudah lebih dari 24 jam maka sediaan infusa sebaiknya tidak boleh digunakan karena ditakutkan sediaan tersebut sudah terkontaminasi oleh mikroorganisme sehingga harus membuat ulang sediaan yang baru. Hal tersebut merupakan kekurangan dari sediaan infusa.

8.

Persiapan hewan uji Hewan uji yang digunakan sebanyak 50 ekor (25 ekor jantan dan 25 ekor

betina) yang ditempatkan di dalam metabolic cage. Sebelum dilakukan penelitian, seluruh tikus diadaptasikan terlebih dahulu selama 7 hari di Laboratorium Imono Fakultas Sanata Dharma, Yogyakarta. Tikus diberi makan seperti biasa, yaitu pelet AD-2 dan diberi minum Reverse-Osmosis (RO). Penelitian dengan hewan coba ini telah mendapat Ethical Clearance dari komisi etik Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta (Lampiran 5).

9.

Pengelompokan hewan uji Lima puluh ekor tikus dibagi menjadi 5 kelompok secara acak, yaitu satu

kelompok kontrol dan empat kelompok perlakuan. Masing-masing kelompok uji terdiri dari 10 ekor tikus (5 tikus jantan dan 5 tikus betina). Kelompok satu


33

(kontrol) diberi aquadest dengan dosis 14285,7 mg/kgBB, kelompok dua sampai lima diberi perlakuan infusa biji alpukat dengan peringkat dosis berturut-turut 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB selama 28 hari.

10. Prosedur pelaksanaan toksisitas subakut Sediaan infusa biji alpukat yang diberikan kepada hewan uji sesuai dengan peringkat dosis dengan kekerapan pemberian satu kali sehari selama 28 hari pada tikus jantan dan betina dengan tetap diberikan makan dan minum. Pada hari ke-0 sebelum diberi perlakuan dan hari ke-29, semua tikus diambil darahnya melalui sinus orbital mata menggunakan pipa kapiler dan ditampung pada eppendorf kemudian dilakukan pengukuran kadar BUN dan kreatinin yang dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

11. Pengamatan a.

Pengamatan berat badan hewan uji. Dilakukan dengan cara menimbang hewan uji dengan timbangan yang dilakukan setiap hari. Purata berat badan hewan uji dilakukan dengan menambahkan berat badan hewan uji dan membagi dengan jumlah hewan uji tiap kelompok perlakuan pada hari ke 0, 7, 14, 21 dan 28. Setelah itu, data berat badan hewan uji tersebut dilakukan analisis dengan General Linear Model (Multivariate).


b.

34

Pengukuran asupan pakan hewan uji. Hewan uji diberi asupan pakan sebanyak 30 g setiap hari. Banyaknya asupan pakan dihitung dengan cara menghitung sisa makanan yang tertinggal diwadah pada hari kedua setelah diberi pakan pada hari pertama. Selisih dari penimbangan tersebut dihitung sebagai asupan makanan yang dihabiskan oleh hewan uji pada hari pertama kemudian dihitung ratarata jumlah pakan yang dihabiskan oleh tikus tiap kelompok perlakuan sampai pada hari ke 28.

c.

Pengukuran asupan minum hewan uji. Setiap hari hewan uji diberi minum air Reverse Osmose (RO) sebanyak 100 ml yang diberikan dalam wadah botol lalu dimasukan dalam kandang. Pengukuran banyaknya jumlah air minum yang dihabiskan dilakukan dengan cara mengurangkan jumlah air minum yang diberikan pada hari pertama dengan jumlah air minum sisa pada hari kedua. Selisih dari pengurangan tersebut merupakan jumlah air minum yang dihabiskan hewan uji pada hari pertama.

F. Tata Cara Analisis Hasil Analisis data hasil pengukuran kadar BUN (ureum) dan kreatinin tikus jantan dan betina diuji menggunakan uji paired T-test untuk kelompok kontrol aquadest maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang bermakna sebelum dan sesudah perlakuan infusa biji alpukat. Data BUN maupun kreatinin dianalisis


35

menggunakkan uji Kolmogorov-Smirnov yang bertujuan untuk mengetahui distribusi data tiap kelompok. Analisis akan dilanjutkan menggunakan analisis variansi pola searah (one way ANOVA) apabila distribusi data normal dan homogen. Tujuan dari analisis variansi pola searah (one way ANOVA) adalah untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok dengan taraf kepercayaan 95%. Setelah itu dilanjutkan dengan uji Scheffe jika p<0,05 untuk melihat perbedaan antar kelompok. Apabila hasil uji Kolmogorov-Smirnov menunjukkan data distribusi yang tidak normal maka dilanjutkan dengan menggunakkan analisis Kruskal Walis untuk melihat perbedaan kadar kreatinin maupun BUN antar kelompok baik kontrol maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat. Analisis kemudian dilanjutkan dengan uji Mann Whitney untuk mengetahui perbedaan uji tiap kelompok. Selain itu, selama perlakuan infusa biji alpukat 28 hari juga dilakukan pengamatan perubahan berat badan, pola makan dan minum tikus baik jantan maupun betina. Data perubahan berat badan tikus jantan dan betina yang dihitung rata-ratanya pada hari ke-0, 7, 14, 21 dan 28 dianalisis dengan menggunakan General Linear Model (Multivariate). Sementara itu untuk data pola asupan pakan dan minum tikus jantan dan betina akan disajikan dalam bentuk grafik pola makan dan minum tikus.


36

G. Skema Alur Penelitian 50 tikus (25 jantan dan 25 betina) dibagi secara acak kedalam 5 kelompok

Hewan uji ditempatkan dalam metabolic cagedan diadaptasikan selama 7 hari

Pada hari ke-0, tikus dipuasakan selama 5 jam sebelum pengambilan darah

Hewan uji ditimbang sebelumdilakukan pengambilan darah Dilakukan pengambilan darah

Hewan uji dikembalikan dalam metabolic cage

4 jam setelah pengambilan darah hewan uji diberi infusa biji alpukat secara peroral dan diberi asupan pakan pada :

Kel. Kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB

Kel.I Infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB

Kel.II Infusa biji alpukat dosis 360 mg/kgBB

Kel.III Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB

Kel.IV Infusa biji alpukat dosis 1140,6 mg/kgBB

Dilakukan pengukuran asupan pakan, minum dan pengamatan berat badan selama 28 hari setiap pagi

Selama 28 hari injeksi infusa biji alpukat secara peroral pada hewan uji dilakukan pada jam yang sama dengan hari pertama Pada hari ke-29 hewan uji dipuasakan lalu dilakukan pengambilan darah dan dianalisis dengan statistika


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian toksisitas subakut ini bertujuan untuk mengetahui apakah pemberian infusa biji Persea americana Mill. secara subakut memberikan perubahan biokimia yang tak khas terhadap kadar

BUN dan kreatinin. Pada

penelitian toksisitas subakut biji alpukat ini dilakukan determinasi biji alpukat, pembuatan serbuk biji alpukat, penetapan kadar air serbuk biji alpukat, pengukuran kadar BUN dan kreatinin darah tikus baik jantan maupun betina, pengamatan perubahan berat badan, pengukuran asupan makan dan asupan minum selama 28 hari. A. Determinasi Tanaman Tujuan dari dilakukannya determinasi ini adalah untuk menghindari terjadinya kesalahan serta untuk memastikan bahwa biji yang digunakan dalam penelitian memang benar biji dari tanaman Persea americana Mill. Determinasi dilakukan dengan cara mencocokkan ciri-ciri morfologi dari biji Persea americana Mill. dengan biji yang telah diketahui pasti merupakan biji tanaman Persea americana Mill. Determinasi ini dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Hasil determinasi telah membuktikan bahwa biji yang digunakan memang benar berasal dari biji tanaman Persea americana Mill. (Lampiran 4).

37


38

B. Penetapan Kadar Air Serbuk Biji Persea americana Mill.

Serbuk biji Persea americana Mill. sebelum digunakan untuk penelitian, terlebih dahulu dilakukan penetapan kadar air yang bertujuan untuk mengetahui kandungan air dalam serbuk biji tersebut memenuhi persyaratan kadar air serbuk simplisia yang baik atau tidak. Berdasarkan Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI (1995), syarat kadar air serbuk simplisia yang baik adalah kurang dari 10%. Alasan perlu dilakukan penetapan kadar air karena apabila serbuk mengandung air lebih dari 10%, maka memungkinkan tumbuhnya mikroorganisme yang nantinya dapat mencemari serbuk karena air merupakan media yang disukai oleh mikroorganisme. Penetapan kadar air ini dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat Moisture Balance. Prinsip dari metode ini adalah penetapan jumlah sampel berdasarkan pengukuran berat zat konstan (Sudjadi, 2010). Sebanyak 5 g serbuk biji Persea americana Mill. dipanaskan didalam alat Moisture Balance pada suhu 1050 C selama 15 menit. Hasil yang diperoleh, yaitu 5,63% (lampiran 6) sehingga dapat disimpulkan bahwa serbuk biji Persea americana Mill. yang digunakan telah memenuhi syarat kadar air simplisia yang baik karena tidak lebih dari 10%. C. Pemeriksaan Kadar Kreatinin Darah Tikus

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya efek toksik yang ditimbulkan oleh infusa biji Persea americana Mill. terhadap fungsi ginjal dengan melihat perubahan biokimia terhadap kadar kreatinin darah tikus. Pemeriksaan


39

kadar kreatinin darah tikus jantan maupun betina ini dilakukan dua kali, yaitu sebelum (pre) dan sesudah (post) tikus diberi infusa biji alpukat selama 28 hari. Pengambilan darah pre dilakukan pada hari ke-0 dan post dilakukan pada hari ke29. Pemeriksaan kadar kreatinin pre dilakukan untuk mengetahui kadar kreatinin awal sebelum tikus diberi perlakuan dan untuk mengetahui kemungkinan adanya kondisi patologis terkait dengan fungsi ginjal. Kadar kreatinin yang telah didapat, baik sebelum maupun sesudah perlakuan kemudian dilakukan analisis menggunakan Paired T-test. Menggunakan uji Paired T-test, karena hewan uji yang digunakan sama namun mendapat perlakuan yang berbeda. Selain itu, uji ini dapat melihat apakah terdapat pengaruh yang bermakna pada pemeriksaan kadar sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat. 1. Pemeriksaan kadar kreatinin darah tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji Persea americana Mill. Pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan menggunakan lima kelompok perlakuan, yaitu empat kelompok perlakuan dengan peringkat dosis 202,24; 360; 640,8; 1140,62 mg/kgBB dan satu kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7mg/kgBB.

Penggunaan

kelompok

kontrol

bertujuan

untuk

membandingkan kadar kreatinin darah tikus antara kelompok kontrol (normal) dengan kelompok perlakuan infusa biji alpukat. Aquadest digunakan dalam kelompok kontrol bertujuan untuk mengetahui apakah penggunaan aquadest sebagai pelarut memberikan pengaruh terhadap kadar kreatinin atau tidak.


40

Tabel I. Rerata kadar kreatinin pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan selama 28 hari Perlakuan (mg/kgBB)

Kelompok

N

Kadar Kreatinin (mg/dL) Pre (Mean Post (Mean ± SE) ± SE)

Kontrol aquadest 5 0,34 ± 0,02 0,38 ± 0,03 14285,7 II IBA 202,24 5 0,36 ± 0,02 0,40 ± 0,03 III IBA 360 5 0,38 ± 0,03 0,44 ± 0,02 IV IBA 640,8 5 0,42 ± 0,03 0,44 ± 0,02 V IBA 1140,62 5 0,40 ± 0,03 0,42 ± 0,03 Keterangan = TB : berbeda tidak bermakna (p>0,05) IBA : infusa biji alpukat Pre : sebelum pemberian infusa biji alpukat Post : sesudah pemberian infusa biji alpukat SE : Standard Error of Mean

0,178 TB 0,374 TB 0,208 TB 0,621 TB 0,374 TB

(mg/dl)

I

Nilai p

Gambar 1. Rerata kadar kreatinin darah tikus jantan pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari

Data yang tersaji dalam tabel I, memperlihatkan adanya peningkatan rerata kadar kreatinin darah tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari. Dilihat dari nilai p, peningkatan kadar kreatinin pada


41

kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna (p>0,05), hal ini membuktikan bahwa aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap perubahan kadar kreatinin. Pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB juga menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna (p>0,05) terhadap perubahan kadar kreatinin antara sebelum perlakuan dengan sesudah perlakuan yang artinya tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat terhadap perubahan kadar kreatinin tikus jantan. Kadar kreatinin pre dan post tersebut masih dalam range normal, menurut Malole dan Pramono (1989), kadar normal kreatinin pada tikus adalah 0,2-0,8 mg/dl. Kadar kreatinin tikus jantan yang masih masuk dalam range tersebut menunjukkan bahwa tidak terjadi penurun fungsi ginjal serta laju GFR pun juga normal. Terjadinya peningkatan kadar kreatinin tikus pada kelompok kontrol aquadest maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang berbeda tidak bermakna ini dapat dipengaruhi oleh massa otot karena tikus berada pada masa pertumbuhan sehingga massa otot pun akan sedikit meningkat. Semakin besar massa otot, maka kadar kreatinin juga akan sedikit meningkat (Marshall, 2012), karena kreatinin merupakan produk dari metabolisme kreatin otot (Sacher and Richard, 2004). Oleh karena itu, adanya peningkatan kadar kreatinin tikus yang berbeda tidak bermakna ini bukan disebabkan oleh pengaruh dari senyawa aktif seperti saponin, flavonoid, alkaloid, tanin dan fenol (Arukwe, et.al., 2012) yang terkandung dalam biji alpukat dengan kata lain senyawa aktif dalam biji alpukat tidak menyebabkan kerusakan pada organ ginjal.


42

Kadar kreatinin darah tikus jantan setelah perlakuan ini diuji normalitasnya menggunakan uji statistik Kolmogorov-Sminorv. Hasil yang diperoleh distribusi dari kelima kelompok perlakuan adalah normal, dilihat dari nilai p, yaitu 0,950 (p>0,05) (lampiran 9). Data selanjutnya dianalisis dengan uji One – Way Anova untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil yang didapatkan, yaitu 0,614 (p>0,05) (lampiran 9) hal ini menunjukkan terdapat perbedaan tidak bermakna terhadap perubahan kadar kreatinin antar kelompok kontrol aquadest dengan kelompok perlakuan infusa biji alpukat. Selanjutnya, hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar kreatinin tikus jantan dapat dilihat pada tabel II. Tabel II. Uji statistika kadar kreatinin darah pada tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Dosis

Kontrol

I

II

III

IV

Kontrol

-

TB

TB

TB

TB

I

TB

-

TB

TB

TB

II

TB

TB

-

TB

TB

III

TB

TB

TB

-

TB

IV

TB

TB

TB

TB

-

Keterangan = TB Kontrol I II III IV

: berbeda tidak bermakna (p>0,05) : aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB : infusa biji alpukat 360 mg/kgBB : infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB : infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB

Pada tabel II yang membandingkan antar kelompok perlakuan infusa biji alpukat dengan empat peringkat dosis dan kontrol negatif yang diberi aquadest terdapat perbedaan yang tidak bermakna sehingga dapat dikatakan tidak terdapat


43

hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar kreatinin. Hal ini berarti pemberian peningkatan dosis infusa biji alpukat tidak selalu meningkatkan kadar kreatinin tikus jantan (gambar 1). Oleh karena itu, dapat dikatakan bahwa tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari terhadap peningkatan kadar kreatinin darah tikus jantan.

2. Pemeriksaan kadar kreatinin darah tikus betina sebelum dan sesudah pemberian infusa biji Persea americana Mill. Kadar kreatinin yang telah didapat kemudian dianalisis menggunakan Paired T-test. Hasil yang didapatkan berupa rerata dari kadar kreatinin baik sebelum maupun sesudah pemberian infusa biji alpukat. Rerata kadar kreatinin pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina dapat dilihat pada tabel III. Tabel III. Rerata kadar kreatinin pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina selama 28 hari

Kelompok

Perlakuan (mg/kgBB)

N

Kadar Kreatinin (mg/dL) Pre (Mean ± Post (Mean ± SE) SE)

Nilai p

I

Kontrol aquadest 14285,7

5

0,36 ± 0,04

0,40 ± 0,03

0,178 TB

II

IBA 202,24

5

0,42 ± 0,03

0,44 ± 0,05

0,621 TB

III

IBA 360

5

0,36 ± 0,04

0,38 ± 0,03

0,374 TB

IV

IBA 640,8

5

0,40± 0,03

0,48± 0,03

0,099TB

V IBA 1140,62 5 0,34± 0,02 0,42± 0,05 Keterangan= TB : berbeda tidak bermakna (p>0,05) IBA : infusa biji alpukat Pre : sebelum pemberian infusa biji alpukat Post : sesudah pemberian infusa biji alpukat SE : Standard Error of Mean

0,178TB

44

(mg/dl)


Gambar 2. Rerata kadar kreatinin darah tikus betina pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari Pada tabel III, menunjukkan rerata kadar kreatinin darah tikus betina mengalami peningkatan dari sebelum perlakuan dengan sesudah perlakuan. Dilihat dari nilai p, peningkatan kadar kreatinin darah tikus betina kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB adalah berbeda tidak bermakna (p>0,05) artinya bahwa aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap perubahan kadar kreatinin tikus betina. Pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB terjadi peningkatan kadar kreatinin yang berbeda tidak bermakna (p>0,05), artinya tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari terhadap perubahan kadar kreatinin tikus betina. Kadar kreatinin pre dan post tersebut masih dalam range normal, menurut Malole dan Pramono (1989), kadar normal kreatinin pada tikus adalah 0,2-0,8 mg/dl. Kadar kreatinin tikus betina yang masih masuk dalam range tersebut


45

menunjukkan bahwa tidak terjadi penurun fungsi ginjal serta laju GFR pun juga normal. Terjadinya peningkatan kadar kreatinin tikus pada kelompok kontrol aquadest maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang berbeda tidak bermakna tersebut dapat dipengaruhi oleh massa otot karena tikus berada pada masa pertumbuhan sehingga massa otot pun akan sedikit meningkat. Semakin besar massa otot, maka kadar kreatinin juga akan meningkat (Marshall, 2012), karena kreatinin merupakan produk dari metabolisme kreatin otot (Sacher and Richard, 2004). Oleh karena itu, peningkatan kadar kreatinin tikus yang berbeda tidak bermakna ini bukan disebabkan karena adanya senyawa aktif seperti saponin, flavonoid, alkaloid, tanin dan fenol (Arukwe, et.al., 2012) yang terkandung dalam biji alpukat dengan kata lain senyawa aktif dalam biji alpukat tidak menyebabkan kerusakan pada organ ginjal. Kadar kreatinin darah tikus betina setelah perlakuan kemudian diuji normalitasnya menggunakan uji statistik Kolmogorov-Sminorv. Hasil yang didapatkan bahwa distribusi kelima kelompok perlakuan adalah normal, dilihat dari nilai p, yaitu 0,933 (p>0,05) (lampiran 11). Analisis statistika untuk mengetahui perbedaan kadar kreatinin antar masing-masing kelompok dengan taraf kepercayaan 95% dengan menggunakan uji One – Way Anova. Hasil yang diperoleh berbeda tidak bermakna, yaitu 0,566 (p>0,05) (lampiran 11). Selanjutnya hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar kreatinin dapat dilhat pada tabel IV.


46

Tabel IV. Uji statistika kadar kreatinin darah pada tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Dosis Kontrol I II III IV Kontrol

-

TB

TB

TB

TB

I

TB

-

TB

TB

TB

II

TB

TB

-

TB

TB

III

TB

TB

TB

-

TB

IV TB Keterangan = TB Kontrol I II III IV

TB TB TB : berbeda tidak bermakna (p>0,05) : aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB : infusa biji alpukat 360 mg/kgBB : infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB : infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB

Pada tabel IV yang membandingkan antar kelompok perlakuan infusa biji alpukat dengan empat peringkat dosis dan kontrol negatif yang diberi aquadest terdapat perbedaan yang tidak bermakna sehingga dapat dikatakan tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan perubahan kadar kreatinin. Hal ini berarti pemberian peningkatan dosis infusa biji alpukat tidak selalu meningkatkan kadar kreatinin tikus betina (gambar 2). Oleh karena itu, dapat dikatakan bahwa tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari terhadap peningkatan kadar kreatinin darah tikus betina.

D. Pemeriksaan Kadar Blood Ureum Nitrogen Darah Tikus Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya perubahan kadar BUN darah tikus setelah pemberian infusa biji Persea americana Mill. selama 28 hari. Darah tikus yang diambil pada hari ke-0 (sebelum perlakuan) dan hari ke-29 setelah perlakuan infusa biji alpukat kemudian dilakukan pengukuran kadar BUN.


47

Pemeriksaan kadar ureum pre dilakukan untuk mengetahui kadar ureum awal sebelum tikus diberi perlakuan dan untuk mengetahui kemungkinan adanya kondisi patologis terkait dengan fungsi ginjal. Tikus jantan maupun betina diberi perlakuan infusa biji alpukat. Kelompok perlakuan dan peringkat dosis infusa biji alpukat yang digunakan, yaitu empat kelompok perlakuan dengan peringkat dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB dan satu kelompok kontrol aquadest 14285,7 mg/kgBB. 1. Pemeriksaan kadar ureum darah tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji Persea americana Mill. Kadar ureum yang telah didapat kemudian dianalisis menggunakan Paired T-test. Hasil yang didapatkan berupa rerata kadar ureum baik sebelum maupun setelah pemberian infusa biji alpukat yang dapat dilihat pada tabel V. Tabel V. Rerata kadar ureum pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan selama 28 hari

Kelompok

Perlakuan (mg/kgBB)

N

Kadar Ureum (mg/dL) Pre (Mean ± Post (Mean ± SE) SE)

Nilai p

5

28,12 ± 0,98

31,10±2,01

0,086TB

5

28,60±1,54

31,46±1,02

0,059TB

II

Kontrol aquadest 14285,7 IBA 202,24

III

IBA 360

5

27,58±2,03

31,08±1,77

0,069TB

IV

IBA 640,8

5

29,18±1,35

32,18±2,25

0,069TB

V

IBA 1140,62

5

25,86 ± 0,66

30,60 ± 1,87

0,080 TB

I

Keterangan = TB IBA Pre Post SE

: berbeda tidak bermakna (p>0,05) : infusa biji alpukat : sebelum pemberian infusa biji alpukat : sesudah pemberian infusa biji alpukat : Standard Error of Mean

48

(mg/dl)


Gambar 3. Rerata kadar ureum darah tikus jantan pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari Pada tabel V, tersaji data rerata kadar ureum darah tikus jantan sebelum dan sesudah perlakuan. Dilihat dari nilai p, peningkatan kadar ureum pada kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna (p>0,05), hal ini membuktikan bahwa aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar ureum. Pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB juga terjadi peningkatan yang berbeda tidak bermakna (p>0,05) artinya tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat terhadap kadar ureum darah tikus jantan. Adanya peningkatan kadar ureum tikus jantan dari sebelum perlakuan dengan sesudah perlakuan infusa biji alpukat yang berbeda tidak bermakna ini berarti menunjukkan bahwa tidak terjadi penurun fungsi ginjal dan laju GFR pun juga normal. Terlihat kadar ureum pre dan post kelompok perlakuan masih masuk dalam range normal (kontrol), yaitu 26-35 mg/dl. Oleh karena itu, peningkatan


49

kadar ureum tikus jantan yang berbeda tidak bermakna ini menunjukkan bahwa senyawa aktif, yaitu saponin, flavonoid, alkaloid, tanin dan fenol (Arukwe, et.al., 2012) yang terkandung dalam biji alpukat tidak menyebabkan kerusakan pada organ ginjal dan tidak memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar ureum tikus jantan. Kadar ureum darah tikus jantan setelah perlakuan kemudian diuji normalitasnya menggunakan uji statistik Kolmogorov-Sminorv. Hasil yang didapatkan, yaitu bahwa distribusi kelima kelompok perlakuan adalah normal, dilihat dari nilai p, yaitu 0,602 (p>0,05) (lampiran 13). Analisis statistika untuk melihat perbedaan kadar ureum antar kelompok perlakuan maka dilakukan uji One – Way Anova dengan hasil yang berbeda tidak bermakna, yaitu 0,980 (p>0,05) (lampiran 13). Selanjutnya, hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar ureum yang dapat dilihat pada tabel VI. Tabel VI. Uji statistika kadar ureum darah pada tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Dosis Kontrol I II III IV

Kontrol TB TB TB TB


I TB TB TB TB

II TB TB TB TB

III TB TB TB TB

IV TB TB TB TB -

: berbeda tidak bermakna (p>0,05) : aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 360 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB


50

Pada tabel VI membandingkan antar kelompok perlakuan infusa biji alpukat dengan empat peringkat dosis dan kontrol negatif yang diberi aquadest terdapat perbedaan yang tidak bermakna sehingga dapat dikatakan tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan perubahan kadar ureum. Hal ini berarti pemberian peningkatan dosis infusa biji alpukat tidak selalu meningkatkan kadar kreatinin tikus jantan (gambar 3). Oleh karena itu, dapat dikatakan bahwa tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari terhadap peningkatan kadar ureum darah tikus jantan.

2. Pemeriksaan kadar ureum darah tikus betina sebelum dan sesudah pemberian infusa biji Persea americana Mill. Kadar ureum tikus betina yang telah didapat kemudian dianalisis menggunakan Paired T-test.Hasil yang didapatkan berupa rerata kadar ureum pre dan post pemberian infusa biji alpukatyang dapat dilihat pada tabel VII. Tabel VII. Rerata kadar ureum pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina selama 28 hari Kadar Ureum (mg/dL) Kelompok I II III IV V

Perlakuan (mg/kgBB) Kontrol aquadest 14285,7 IBA 202,24 IBA 360 IBA 640,8 IBA 1140,62

Keterangan = TB IBA Pre Post SE

N

Nilai p

5

Pre (Mean ± SE 28,80 ± 1,32

Post (Mean ± SE 32,20± 0,94

0,061TB

5 5 5 5

30,28± 1,74 29,80± 1,23 30,10± 2,13 27,06± 3,11

34,30± 1,84 34,92± 1,45 35,44± 1,38 34,34± 2,73

0,147TB 0,092TB 0,076TB 0,172TB

: berbeda tidak bermakna (p>0,05) : infusa biji alpukat : sebelum pemberian infusa biji alpukat : sesudah pemberian infusa biji alpukat : Standard Error of Mean

51

(mg/dl)


Gambar 4. Rerata kadar ureum darah tikus betina pre dan post perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari Pada tabel VII, tersaji data rerata kadar ureum darah tikus betina sebelum dan sesudah perlakuan. Dilihat dari nilai p, pada kelompok kontrol aquadest terjadi peningkatan yang berbeda tidak bermakna (p>0,05), hal ini menunjukkan bahwa aquadest tidak mempengaruhi perubahan kadar ureum darah tikus betina. Pada kelompok perlakuan infusa dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,62 mg/kgBB juga terjadi peningkatan kadar ureum dari sebelum dengan sesudah perlakuan. Namun berdasarkan nilai p, perbedaan tersebut tidak bermakna (p>0.05) yang artinya tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar ureum tikus betina selama 28 hari. Adanya peningkatan kadar ureum tikus betina dari sebelum perlakuan dengan sesudah perlakuan infusa biji alpukat yang berbeda tidak bermakna ini berarti menunjukkan bahwa tidak terjadi penurun fungsi ginjal dan laju GFR pun juga normal. Terlihat kadar ureum pre dan post kelompok perlakuan masih masuk


52

dalam range normal (kontrol), yaitu 26-35 mg/dl. Oleh karena itu, peningkatan kadar ureum tikus betina yang berbeda tidak bermakna ini menunjukkan bahwa senyawa aktif, yaitu saponin, flavonoid, alkaloid, tanin dan fenol (Arukwe, et.al., 2012) yang terkandung dalam biji alpukat tidak menyebabkan kerusakan pada organ ginjal dan tidak memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar ureum tikus betina. Kadar ureum darah tikus betina setelah perlakuan kemudian diuji normalitasnya menggunakan uji statistik Kolmogorov-Sminorv. Hasil yang didapatkan, yaitu bahwa distribusi kelima kelompok perlakuan adalah normal, dilihat dari nilai p, yaitu 0,943 (p>0,05) (lampiran 15). Analisis statistika untuk melihat perbedaan kadar ureum antar kelompok perlakuan dilakukan uji One – Way Anova dengan hasil yang berbeda tidak bermakna, yaitu 0,751 (p>0,05) (lampiran 15). Selanjutnya, hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan perubahan kadar ureum dapat dilihat pada tabel VIII. Tabel VIII. Uji statistika kadar ureum darah pada tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Dosis Kontrol I II III IV

Kontrol TB TB TB TB


I TB TB TB TB

II TB TB TB TB

III TB TB TB TB

IV TB TB TB TB -

: berbeda tidak bermakna (p>0,05) : aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB : infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB : infusa biji alpukat 360 mg/kgBB : infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB : infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB


53

Hasil uji statistika (tabel VIII) yang membandingkan antar kelompok perlakuan infusa biji alpukat dengan empat peringkat dosis dan kontrol negatif yang diberi aquadest terdapat perbedaan yang tidak bermakna sehingga dapat dikatakan tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar ureum. Hal ini berarti pemberian peningkatan dosis infusa biji alpukat tidak selalu meningkatkan kadar ureum tikus betina (gambar 4). Hasil analisis data dalam penelitian ini juga didukung oleh gambaran histologis ginjal pada penelitian paralel yang dilakukan oleh Apriyani (2015), yaitu hanya terlihat adanya degenerasi hidropik pada ginjal tikus jantan dan betina baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat. Degenerasi hidropik ini pada dasarnya merupakan perubahan yang sifatnya reversibel. Degenerasi hidropik merupakan terjadinya pembengkakan sitoplasma karena adanya timbunan cairan (Gopinath and Mowat, 2014). Hasil uji reversibilitas juga menunjukkan hilangnya degenerasi hidropik pada gambaran histologis ginjal pada semua kelompok perlakuan dan kontrol aquadest. Degenerasi hidropik merupakan perubahan yang ringan karena sifatnya yang reversibel sehingga belum menyebabkan peningkatan kadar ureum dan kreatinin dalam darah tikus (Nurliana, Estuningsih, Sugito, Masyitha, 2014). Kadar kreatinin dan ureum meningkat apabila sudah terjadi nekrosis pada sel tubulus ginjal (Jaipaul, 2013). Sel tubulus sangat rentan terhadap toksin, karena dalam sel tubulus ini lah terjadi proses reabsorpsi dan transport aktif ion. Adanya pembengkakkan sel-sel tubulus proksimal merupakan pertanda terjadinya nefritis intersitial yang pada akhirnya menyebabkan kerusakan tubulus (Robbins dan


54

Cotran, 2009). Kerusakan tubulus akan menyebabkan kegagalan mengekskresikan urea dan kreatinin sehingga menyebabkan kadar BUN dan kreatinin meningkat dalam darah. Selain itu peningkatan kadar BUN dan kreatinin dalam darah dapat disebabkan oleh adanya penyakit hati yang sekaligus dapat menyebabkan penurunan fungsi ginjal. Adanya penyakit hati yang parah seperti sirosis, dapat menyebabkan vasokontriksi ginjal, sehingga menurunkan GFR. Menurunnya laju GFR menyebabkan kadar urea dan kreatinin yang difiltrasi hanya sedikit, sedangkan yang diekskresi juga sedikit sehingga kadar urea dan kreatinin dalam darah meningkat. Kondisi ini biasa disebut sebagai sindrom hepatorenal (Kopacova,2012). Namun hasil penelitian paralel histologis hati yang dilakukan oleh Oktavia (2015) hanya menunjukkan perubahan berupa degenerasi hidropik dan degenerasi melemak saja. Kedua perubahan tersebut merupakan perubahan yang masih tergolong ringan dan sifatnya reversibel, sehingga belum menyebabkan peningkatan kadar BUN dan kreatinin dalam darah. Peningkatan dua kali lipat dari kadar normal kreatinin mengindikasikan terjadinya kerusakan ginjal sebesar 50% sedangkan peningkatan tiga kali lipat dari kadar normal kreatinin mengindikasikan terjadinya kerusakan ginjal sebesar 75%. Pada penelitian ini perubahan histologis pada organ ginjal dan hati belum mencapai dua kali lipat dari kadar normal. Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa terjadinya peningkatan kadar kreatinin dan BUN yang berbeda tidak bermakna ini bukan disebabkan oleh adanya perubahan histologis pada organ ginjal dan hati.


55

Pemberian infusa biji alpukat juga tidak mempengaruhi berat badan tikus. Berdasarkan hasil pengamatan berat badan selama perlakuan, yaitu terjadi perubahan berat badan pada tikus jantan dan betina pada semua kelompok. Namun perubahan ini lebih disebabkan oleh jumlah asupan pakan dan proses pertumbuhan tikus sehingga menyebabkan bertambahnya berat badan. Pola makan dan minum tikus jantan maupun betina juga terlihat normal. Tidak adanya pengaruh pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari terhadap perubahan kadar kreatinin maupun BUN, maka perlu dilakukan penelitian serupa namun dengan waktu yang lebih lama, yaitu 90 hari untuk melihat efek toksik yang dapat menyebabkan kerusakan pada organ ginjal.

E. Perubahan Berat Badan Perubahan berat badan yang dialami oleh hewan uji selama penelitian perlu dilakukan pengukuran. Selain untuk menentukan volume infusa biji Persea americana Mill. yang akan diberikan pada hewan uji juga untuk mengetahui apakah pemberian infusa biji Persea americana Mill. mempengaruhi perubahan berat badan hewan uji. Pertumbuhan hewan uji mencangkup pertumbuhan bentuk bobot, jaringan dan organ tubuh. Laju pertumbuhan dapat dipengaruhi oleh umur, pakan, lingkungan pemeliharaan dan hormon. Hormon tiroid akan meningkatkan aktivitas metabolisme dan pertumbuhan hampir diseluruh jaringan tubuh sehingga akan mempengaruhi pertumbuhan massa tubuh, termasuk pertumbuhan tulang. Seiring dengan bertambahnya umur tikus, maka ukuran tubuh juga akan bertambah besar akibat berkembangnya sel. Selain itu, perubahan berat badan


56

juga dipengaruhi oleh jumlah asupan pakan tikus. Semakin banyak pakan yang dikonsumsi maka berat badan pun akan meningkat (Santika, 2014). Perubahan berat badan hewan uji dalam penelitian ini dianalisis menggunakan uji Multivariate untuk melihat perbedaan perubahan berat badan dari hari ke-0, 7, 14, 21 dan 28. Analisis kemudian dilanjutkan untuk mengetahui perbedaan antar kelompok perlakuan dan kelompok kontrol aquadest. Berat badan tikus jantan yang dihitung berat badannya pada hari ke-0 sampai hari ke-28 dapat dilihat pada tabel IX. Tabel IX. Rerata berat badan ± SE tikus jantan akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari

Kelompok

Perlakuan (mg/kgBB)

Hari ke -0

Rerata berat badan (g) ± SE Hari ke Hari ke Hari ke -7 -14 -21

Hari ke -28

I


192,80 ± 13,89

192,20 ± 8,20

193,20 ± 6,61

216,60 ± 6,17

221,60 ± 20,22

II

IBA 202,24

178,80 ± 7,64

185,00 ± 12,07

193,40 ± 16,91

220,20 ± 11,15

239,00 ± 9,38

III

IBA 360

199,80 ± 9,62

202,80 ± 12,11

210,80 ± 14,61

238,40 ± 12,11

262,20 ± 12,19

IV

IBA 640,8

154,80 ± 1,85

195,00 ± 7,15

228,80 ± 5,13

255,00 ± 11,66

271,40 ± 9,06

V

IBA 1140,62

198,60 ± 12,20

214,20 ± 8,83

220,60 ± 10,56

242,40 ± 9,03

259,00 ± 10,39

Keterangan = SE : Standar Error of Mean, IBA : Infusa Biji Alpukat


57

300

Berat Badan (g)

250 200

Kontrol Dosis I

150

Dosis II Dosis III

100

Dosis IV 50 0 Hari 0

Hari 7

Hari 14

Hari 21

Hari 28

Gambar 5. Rerata perubahan berat badan tikus jantan setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Rerata data berat badan tikus jantan (tabel IX) menunjukkan adanya peningkatan berat badan tikus jantan pada semua kelompok. Data berat badan selanjutnya dilakukan analisis menggunakan uji General Linear Model (Multivariate) terhadap perubahan berat badan tikus jantan yang dibandingkan mulai hari ke-0, hari ke-7, hari ke-14, hari ke 21 dan hari ke-28 menunjukkan hasil yang berbeda bermakna antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol (p<0,05). Analisis dilanjutkan untuk mengetahui perbedaan berat badan tikus jantan antar kelompok perlakuan dan kontrol. Hasilnya menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna kecuali pada hari ke-0 yang membandingkan berat badan antara dosis dua dengan dosis tiga dan dosis empat dengan dosis tiga terjadi perbedaan yang bermakna (lampiran 16).


58

Berdasarkan gambar 5, berat badan tikus jantanpada semua kelompok perlakuan terlihat adanya peningkatan berat badan hewan uji. Namun peningkatan berat badan tersebut lebih dipengaruhi oleh masa pertumbuhan karena seiring dengan bertambahnya umur maka tikus akan mengalami masa pertumbuhan yang disertai dengan adanya peningkatan berat badan dari hari ke hari (Santika, 2014). Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat terhadap perubahan berat badan tikus jantan. Rerata berat badan tikus betina dari hari ke-0, ke-7, ke-14, ke-21, dan ke-28 dapat dilihat pada tabel X.

Tabel X. Rerata berat badan ± SE tikus betina akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari

Hari ke -0

Rerata berat badan (g) ± SE Hari ke Hari ke Hari ke -7 -14 -21

Hari ke -28

I


150,80 ± 4,35

151,80 ± 7,51

154,40 ± 11,37

157,80 ± 9,80

170,00 ± 7,54

II

IBA 202,24

173,20 ± 6,80

186,40 ± 15,64

173,00 ± 7,72

184,40 ± 8,11

199,00 ± 7,58

III

IBA 360

153,40 ± 11,19

156,40 ± 5,06

148,00 ± 6,33

159,40 ± 5,58

173,60 ± 5,95

IV

IBA 640,8 mg/kgBB

171,20 ± 8,85

157,40 ± 11,44

161,20 ± 12,20

174,80 ± 11,05

188,20 ± 11,35

V

IBA 1140,62

157,20 ± 5,99

158,80 ± 3,21

169,80 ± 6,39

162,60 ± 3,10

167,80 ± 5,03

Kelompok

Perlakuan (mg/kgBB)

Keterangan = SE : Standar Error of Mean, IBA : Infusa Biji Alpukat


59

250

Berat Badan (g)

200 Kontrol

150

Dosis I Dosis II

100

Dosis III Dosis IV

50 0 Hari 0

Hari 7

Hari 14

Hari 21

Hari 28

Gambar 6. Rerata perubahan berat badan tikus betina setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Rerata data berat badan tikus betina (tabel X) menunjukkan adanya peningkatan berat badan tikus baik pada kelompok kontrol aquadest maupun kelompok perlakuan infusa biji alpukat. Data berat badan selanjutnya dilakukan analisis menggunakan uji Multivariate terhadap perubahan berat badan tikus betina yang dibandingkan mulai hari ke-0, hari ke-7, hari ke-14, hari ke 21 sampai hari ke-28 menunjukkan hasil yang berbeda bermakna antara kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat dan kelompok kontrol aquadest (p<0,05). Analisis dilanjutkan untuk mengetahui perbedaan berat badan tikus betina antar kelompok perlakuan dan kontrol. Hasilnya menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna (lampiran 16). Berdasarkan gambar 6, berat badan tikus betinapada semua kelompok perlakuan terlihat adanya kenaikan berat badan hewan uji. Namun peningkatan berat badan tersebut lebih dipengaruhi oleh masa pertumbuhan karena seiring


60

dengan bertambahnya umur maka tikus akan mengalami masa pertumbuhan yang disertai dengan adanya peningkatan berat badan dari hari ke hari (Santika, 2014). Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa tidak terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat terhadap perubahan berat badan tikus betina.

F. Asupan Pakan Tikus Dalam uji toksisitas asupan pakan hewan uji merupakan salah satu data pendukung yang cukup penting. Salah satu faktor yang mempengaruhi perubahan berat badan tikus adalah asupan pakan (Santika, 2014). Hewan uji diberi asupan pakan AD II sebanyak 30 g setiap hari. Asupan pakan tikus jantan maupun tikus betina dihitung setiap hari sampai pada hari ke 28.

30,00

Makan (g)

25,00 20,00 Kontrol 15,00

Dosis 1

10,00

Dosis 2 Dosis 3

5,00

Dosis 4

0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Hari

Gambar 7. Asupan pakan tikus jantan selama 28 hari Keterangan : Kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB Dosis 1 = perlakuan infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = perlakuan infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = perlakuan infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = perlakuan infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB


61

30,00 25,00

Makan (g)

20,00 Kontrol 15,00

Dosis 1 Dosis 2

10,00

Dosis 3 5,00

Dosis 4

0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141516171819202122232425262728 Hari

Gambar 8. Asupan pakan tikus betina selama 28 hari Keterangan : Kontrol aquadest dosis 14285,7mg/kgBB Dosis 1 = perlakuan infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = perlakuan infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = perlakuan infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = perlakuan infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB Berdasarkan gambar 7 dan 8 dapat disimpulkan bahwa pola makan tikus jantan dan betina pada semua kelompok terlihat normal karena kelompok perlakuan infusa biji alpukat dibandingkan dengan kontrol aquadest, jumlah asupan pakan tikus tidak jauh berbeda dan tidak terjadi penurunan dan peningkatan asupan pakan yang berarti. Hal ini dapat dikatakan bahwa peningkatan berat badan tikus disebabkan oleh proses pertumbuhan tikus itu sendiri dan jumlah asupan pakan (Santika, 2014). Data asupan pakan ini tidak perlu dilakukan analisis statistik karena hanya untuk melihat pola makan tikus jantan dan betina.


62

G. Asupan Minum Tikus Pengukuran juga dilakukan pada pola asupan minum hewan uji baik tikus jantan maupun tikus betina. Pengukuran ini dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya perubahan yang berarti setelah diberi perlakuan infusa biji alpukat selama 28 hari. Setiap hari hewan uji diberi minum air Reverse Osmose (RO) sebanyak 100 ml yang diberikan dalam wadah botol lalu dimasukkan dalam metabolic cage. Jumlah asupan minum yang telah dihabiskan oleh tikus kemudian dihitung rata-ratanya tiap kelompok perlakuan dan kelompok kontrol aquadest sampai pada hari ke 28. Asupan minum tikus baik jantan dan betina dapat dilihat pada gambar 5 dan 6.

35,00

Minum (ml)

30,00 25,00 Kontrol

20,00

Dosis 1

15,00

Dosis 2

10,00

Dosis 3

5,00

Dosis 4

0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 910111213141516171819202122232425262728 Hari

Gambar 9. Asupan minum tikus jantan selama 28 hari Keterangan : Kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB Dosis 1 = perlakuan infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = perlakuan infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = perlakuan infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = perlakuan infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB


63

35,00 Minum (ml)

30,00 25,00

Kontrol

20,00 15,00

Dosis 1

10,00

Dosis 2

5,00

Dosis 3

0,00

Dosis 4 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141516171819202122232425262728 Hari

Gambar 10. Asupan minum tikus betina selama 28 hari Keterangan : Kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB Dosis 1 = perlakuan infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = perlakuan infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = perlakuan infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = perlakuan infusa biji alpukat 1140,62 mg/kgBB Asupan minum tikus baik jantan maupun betina pada kelompok kontrol dan kelompok perlakuan infusa biji alpukat terlihat normal karena jumlah asupan minum pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat tidak jauh berbeda dibandingkan dengan kontrol. Terlihat pada gambar 9 dan 10 tidak ada peningkatan ataupun penurunan volume minum yang berarti maka dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak memberikan pengaruh terhadap asupan minum tikus jantan maupun betina. Data asupan minum ini tidak perlu dilakukan analisis statistik karena hanya untuk melihat pola minum tikus.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1.

Pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari tidak memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar BUN dan kreatinin darah tikus

2.

Tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan peningkatan kadar BUN dan kreatinin darah tikus.

B. Saran Perlu dilakukan penelitian toksisitas subakut biji alpukat dengan waktu yang lebih lama, yaitu 90 hari untuk melihat efek toksik yang dapat menyebabkan kerusakan pada organ ginjal.

64


65

DAFTAR PUSTAKA Agrilink, 2001, Suplement to Avocado Information Kit, Queensland Horticulture Institute, Departement of Primary Industry, Queensland. Anaka, O.N., Ozolua, R.I. and Okpo, S.O., 2009, Effect Of The Aqueous Seed Extract Of Persea Americana Mill. (Lauraceae) On The Blood Pressure Of Sprague-Dawley Rats, African Journal of Pharmacyand Pharmacology, 485–490. Anggraeni, A.D., 2006, Pengaruh Pemberian Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar yang Diberikan Beban Glukosa, Karya Ilmiah, Universitas Diponegoro, Semarang. Apriyani, L., 2015, Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Gambaran Histologis Ginjal Tikus Sprague Dawley, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M.K.C., Agomuno, E.N., Adindu, E.A., Odika, P.C., et al., 2012, Chemical Composition of Persea americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS, 346-349. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2010, Pembuatan Sediaan Herbal, Direktorat Obat Asli Indonesia, Jakarta. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2014, Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo, Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, pp.103-105. BAPPENAS., 2000, Alpukat/Avocado, http://www.warintek.ristek.go.id/pertanian/alpukat.pdf, diakses tanggal 3 Oktober 2014. Bioclasses., 2013, The Kidney, http://bio.classes.ucsc.edu/bio131/Thometz%20Website/17%20Osmoregulat ion%20II%20PPT.pdf, diakses tanggal 23 Januari 2015. Biomed, C., Lestari, E., 2011, Pedoman Teknik Dasar Untuk Laboratorium Kesehatan, Edisi 2, EGC, Jakarta, pp. 325. Davey, P., 2006, At a Glance Medicine, Erlangga, Jakarta, pp.234. Ding, H., Han, C., Guo, D., Chin, Y.W., Ding, Y., Kinghorn, A.D. and D’Ambrosio, S.M., 2009, Selective Induction of Apoptosis of Human Oral


66

Cancer Cell Lines by Avocado Extracts Via a ROS-Mediated Mechanism, Nutr.Cancer,61:348–356. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, Jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010, Acuan Sediaan Herbal, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 3. Donatus, I.A., 2001, Toksikologi Dasar, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, pp.106-121, 200. Dwinnell, B.G., Anderson, R.J., 1999, Diagnostic Evaluation of The Patient With Acute Renal Failure, Volume 1, Philadelphia, Current Medicine. Fuadi, A., 2009, Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Gambaran Ureum dan Kreatinin Pada Tikus Putih Jantan yang Diinduksi Etilen Glikol, Skripsi, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Gartner, J.P. dan Hiatt, J.L., 2007, Color Text Book of Histology, Edisi 3, Elsevier Saunders, Philadelphia, pp. 437-450. Gopinath, C., Mowat, V., 2014, Atlas of Toxicological Pathology, Springer, New York, pp. 48. Guyton, A.C.dan Hall, J.E., 2007, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, 11th ed, diterjemahkan oleh Irawati dkk., Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 326. Guyton, A.C. dan Hall, J.E., 2008, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 11, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Harlan, 1999, Sprague Dawley, http://www.harlaneurope.com, diakses tanggal 15 Januari 2015. Imafidon, K.E. and Amaechina, F.C., 2010, Effects of Aqueous Seed Extract of Persea americana Mill. (Avocado) on Blood Pressure and Lipid Profile in Hypertensive Rats, Advances in Biological Research, 4 (2): 116-121. Jaipaul, N., 2013, Acute Tubular Necrosis (ATN), http://www.merckmanuals.com/professional/genitourinary_disorders/tubulo interstitial_diseases/acute_tubular_necrosis_atn.html, diakses tanggal 20 Februari 2015. Junqueira, L.E., Carneiro, J. and Kelley, R.O., 2007, Basic Histology, 11th ed., Mc Graw-Hill, Boston, pp. 383.


67

Kardono, L.B.S., Artanti, N., Dewiyanti, I.D., Basuki, T.P., 2003, Selected Indonesian Medical Plant Monograph and Description, PT Gramedia Widiasarana Indonesia, Jakarta. Kopacova, M., 2012, Hepatorenal syndrome, World Journal of Gastroenterology, 18(36): 4978-498. Kramer, J.A.,2004, Overview of the Application of Transcription Profiling Using Selected Nephrotoxicants for Toxicology Assessment, Environmental Health Perspectives,112 (4) : 460-464. Kumar, V., Abbas, A.K. and Fausto, N., 2010, Robbins and Cotran Pathologic Basic of Disease, 7th ed., Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 976. Laboratorium Amerind Bio-Clinic, 2010, Uji Fungsi http://www.abclab.co.id/?p=944, diakses tanggal 15 Januari 2015.

Ginjal,

Mahendra, B., Rachmawati, N.H., Evi., 2005, Atasi Stroke Dengan Tanaman Obat, Jakarta, pp.63-64. Malole, M.B.M., Pramono, C.S.U.,1989, Penggunaan Hewan-Hewan Percobaan di Laboratorium, Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB, Bogor. Marlinda, M., Sangi, M.S. dan Wuntu, A.D., 2012, Analisi Senyawa Metabolisme Sekunder dan Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.), Jurnal MIPA UNSRAT Online 1 (1) 24-28. Marshall,

W.,

2012,

Creatinine

(Serum,

http://www.acb.org.uk/Nat%20Lab%20Med%20Hbk/Creatinine.pdf,

Plasma), diakses

tanggal 10 Februari 2015. Maryati, S., 2007, Telaah Kandungan Kimia Daun Alpukat (Perseam Americana Mill), http://digilib.itb.ac.id/gdl.php?mod= browse&op=read &id=jbpti tbpp- gdl- srimaryati- 26858&q=Chemical, diakses tanggal 3 Oktober 2014. Meyer, D.J., Harvey, J.W., 2004, Veterinary Laboratory Medicine: Interpretation and Diagnosis, Philadelphia, Saunders. Miles, B., 2003, The Urea Cycle, https://www.tamu.edu/faculty/bmiles/lectures/urea.pdf, diakses tanggal 15 Januari 2015. Noer, M.S., 2006, Evaluasi Fungsi Ginjal Secara Laboratorik (Laboratoric Evaluation on Renal Function), Laporan Penelitian, Universitas Airlangga, Surabaya.


68

Nurachmah, E., Angriani, R., 2011, Dasar-Dasar Anatomi dan Fisiologi, Penerbit Salemba Medika, Jakarta, pp. 225-241. Nurliana., Estuningsih, S., Sugito., Masyitha, D., 2014, Stabilitas Mikrob Usus, Histologi Hati dan Ginjal Mencit Setelah Pemberian Ekstrak Plieku Bumbu Masak Tradisional Aceh, Jurnal Veteriner, 370-37. Nwaoguikpe and Braide., 2011, The Effect of Aqueous Seed Extract of Persea americana (Avocado Pear) on Serum Lipid and Cholesterol Levels in Rabbits, African Journal of Pharmacy and Pharmacology Research, pp. 023-029. Oktavia, T.I., 2015, Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Gambaran Histologis Hati Tikus Sprague Dawley, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Ozulua, R.I., Anaka, O.N., Okpo, S.O., Idogun, S.E., 2009, Acute and Sub-Acute Toxicological Assessment of The Aqueous Seed Extract of Persea Americana Mill. (Lauraceae) in Rats, J. Trad. CAM, 573 – 578. Padilla, C.M., Martinez, V.M., Flores, F.J., Villanueva, R.S., 2013,Acute Toxicity and Genotoxic Activity of Avocado Seed Extract (Persea americana Mill., c.v. Hass), The ScientificWorld Journal., (5) 10.1155. Plantamor., 2012, Persea americana ,http://www.plantamor.com/index.php?plant=970, diakses tanggal 8 april 2014. Pramadyasiwi, A., 2010, Pengaruh Jus Buah Alpukat (Persea americana M.) Dalam Mencegah Peningkatan Kadar BUN dan Serum Kreatinin Tikus Wistar yang Diberi Parasetamol Dosis Toksik, Skripsi, Universitas Jember, Jember. Price, S.A., Wilson, M.L., 2006, Patofisiologi: Konsep Klinis Prose-Proses Penyakit, Edisi 6, Volume 2, EGC, Jakarta. Prihatman, K., 2000, Sistim Informasi Manajemen Pembangunan di Perdesaan, BAPPENAS, Jakarta. Robbins dan Cotran, 2009, Pathologic Basic of Disease, 7th ed., EGC, Jakarta, Elsevier Inc., New York, USA, pp. 977-981. Roberts, R.L., Green, J. and Lewis, B., 2009, Lutein and Zeaxanthin in Eye and Skin Health,Clin. Dermatol, 27:195–201.


69

Sacher, R.A. and Richard, A., 2004, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, EGC, Jakarta, pp.291-293. Santika, A.S., 2014, Perbandingan Laju Pertambahan Berat Badan Tikus Jantan dan Betina Serta Kadar Hormon Triiodotironin dan Tiroksin Dalam Darah, Skripsi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Setiawan, L., 2013, Pengaruh Waktu Protektif Pemberian Infusa Biji Persea Americana Mill. Secara Akut Terhadap Kadar Kreatinin dan Gambaran Histologis Ginjal Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Standring, S., 2005, Gray’s Anatomy The Anatomical Basic of Clinical Practice, 39th ed., Elsevier Churchill Livingstone, Spanyol. Sudjadi, 2010, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, p.91 Sunarjono, H., 2008, Berkebun 21 Jenis Tanaman Buah, Penebar Swadaya, Jakarta, pp.131. Sutedjo, S.K.M., 2009, Buku Saku Mengenal Penyakit Melalui Hasil Pemeriksaan Laboratorium, Cetakan kelima, Amara Books, Yogyakarta, pp.79-80. Wahyuningsih, B., 2015, Uji Toksisitas Biji Alpukat (Persea americana Mill.) pada Mencit Galur Swiss, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Wang, W., Connor, S.L., Johnson, E.J., Klein, M.L., Hughes, S., 2007, Effect of Dietary Lutein and Zeaxanthin on Plasma Carotenoids and Their Transport in Lipoproteins in Age-Related Macular Degeneration, Am.J.Clin.Nutr,85:762–769. Yong, L.C., Petersen, M.R., Sigurdson, A.J., Sampson, L.A.,Ward, E.M., 2009, High Density Antioxidant Intakes Are Associated With Decreased Chromosome Translocation Frequency in Airline Pilots, Am.J.Clin.Nutr, 90:1402–1410. Yoseph, G.K., 2013, Efek Nefroprotektif Pemberian Jangka Panjang Infusa Biji P. ameicana Mill. Terhadap Kadar Kreatinin dan Gambaran Histologis Ginjal Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 26-28, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Zuhrotun, A., 2007, Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.) Bentuk Bulat, Karya Ilmiah, Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran, Jatinangor.


Lampiran 1. Foto biji alpukat

Lampiran 2. Foto serbuk biji alpukat

Lampiran 3. Foto infusa biji alpukat

z

70


Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi

71


Lampiran 5. Surat Ethics Committee Approval

72


73

Lampiran 6. Perhitungan kadar air serbuk biji alpukat Bobot serbuk biji alpukat 5g

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

Rata-rata

5,88 %

5,51 %

5,51 %

5,63 %

Lampiran 7. Perhitungan dosis infusa biji alpukat Dosis yang digunakan berdasarkan pada pengobatan yang biasa digunakan oleh masyarakat, yaitu4 g/70kgBB. Konversi manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018. Dosis untuk tikus 200 g

= 0,018 x 4 g = 0,072 g / 200 gBB = 360 mg/kgBB.

Konsentrasi maksimal infusa biji alpukat yang dapat dibuat adalah 8g/100ml dengan asumsi berat badan hewan uji maksimal adalah 350 g. Perhitungan dosis tinggi perlakuan: D x BB = C x V D x 350 g = 8 g/ 100ml x 5 ml D = 1142,8 mg/kgBB Perhitungan faktor kelipatan dari dosis rendah dan dosis tinggi sebagai berikut.

=

,

= 1,78 (

)

Berdasarkan faktor kelipatan, dalam penelitian ini dibuat 4 peringkat dosis, yaitu: Dosis I

: 360 mg/kgBB : 1,78 =202,24 mg/kgBB

Dosis II

: 360 mg/kgBB

Dosis III

: 360 mg/kgBB x 1,78 = 640,8 mg/kgBB

Dosis IV

: 640,8 mg/kgBB x 1,78 = 1140,6 mg/kgBB


74

Untuk menetukan dosis aquadest digunakan berat badan tertinggi untuk mengetahui dosis maksimum yang diberikan kepada hewan uji. Berdasarkan rumus didapatkan dosis maksimum, yaitu: D x BB = C x V D x 350 g = 1000 mg/ml x 5ml D = 1000 mg x 5 / 350 gBB = 5000 mg / 0,35 kgBB =14285,7 mg/kgBB

Perhitungan konversi dosis untuk manusia Konversi tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56,0 Maka , Dosis I 202,24 mg/kgBB = 0,0002024 g/gBB tikus 0,0002024 g/g x 200 g = 0,04048/200g 0,04048/200g x 56,0 = 2,267g / 70 kgBB Dosis II 360 mg/kgBB = 0,000360 g/gBB tikus 0,000360 g/gx 200 g = 0,072/200g 0,072/200g x 56,0 = 4,032g / 70 kgBB Dosis III 640,8 mg/kgBB

= 0,0006408 g/gBB tikus

0,0006408 g/gx 200 g = 0,128/200g 0,128/200g x 56,0

= 7,168g / 70 kgBB


Dosis IV 1140,6 mg/kgBB

= 0,001140 g/gBB tikus

0,0001140g/gx 200 g = 0,228/200g 0,0228/200g x 56,0

= 12,77g / 70 kgBB

Lampiran 8. Analisis statistik Paired T-test kadar kreatinin tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat

Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

Kontrolpre

,3400

5

,05477

,02449

Kontrolpost

,3800

5

,08367

,03742

Dosis1pre

,3600

5

,05477

,02449

Dosis1post

,4000

5

,07071

,03162

Dosis2pre

,3800

5

,08367

,03742

Dosis2post

,4400

5

,05477

,02449

Dosis3pre

,4200

5

,08367

,03742

Dosis3post

,4400

5

,05477

,02449

Dosis4pre

,4000

5

,07071

,03162

Dosis4post

,4200

5

,08367

,03742

Paired Samples Correlations N

Correlation

Sig.

Pair 1

Kontrolpre & Kontrolpost

5

,764

,133

Pair 2

Dosis1pre & Dosis1post

5

,000

1,000

Pair 3


5

,218

,724

Pair 4


5

,327

,591

Pair 5


5

,845

,071

75


76

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence

Mean Pair 1

Kontrolpre -

Std.

Interval of the

Std.

Error

Difference

Deviation

Mean

Lower

Sig. (2-

Upper

T

Df

tailed)

-,04000

,05477

,02449

-,10801

,02801

-1,633

4

,178

-,04000

,08944

,04000

-,15106

,07106

-1,000

4

,374

-,06000

,08944

,04000

-,17106

,05106

-1,500

4

,208

-,02000

,08367

,03742

-,12389

,08389

-,535

4

,621

-,02000

,04472

,02000

-,07553

,03553

-1,000

4

,374

Kontrolpost Pair 2

Dosis1pre Dosis1post

Pair 3


Pair 4


Pair 5


Lampiran 9. Analisis statistik kadar kreatinin tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test Unstandardized Residual N Normal Parameters

25 a,b

Mean Std. Deviation

Most Extreme Differences

,0000000 1,39688621

Absolute

,104

Positive

,104

Negative

-,101

Kolmogorov-Smirnov Z

,519

Asymp. Sig. (2-tailed)

,950

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.


77

Homogeneous Subsets Kreatinin Scheffea Kelompok

Subset for alpha = 0.05 N

Kontrol aquadest 14285 mg/kgBB

1

5

,3800

5

,4000

5

,4200

Infusa biji alpukat dosis 360 mg/kgBB

5

,4400

Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB

5

,4400

Infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB

Sig.

,771

Test of Homogeneity of Variances Kreatinin Levene Statistic

df1

,411

df2 4

Sig. 20

,798

Oneway Descriptives Kreatinin 95% Confidence Interval for Mean Std. N -

Kontrol aquadest

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Bound

Bound

Minimum

Maximum

5

,3800

,08367

,03742

,2761

,4839

,30

,50

5

,4000

,07071

,03162

,3122

,4878

,30

,50

5

,4400

,05477

,02449

,3720

,5080

,40

,50

14285 mg/kgBB -


-



-

Infusa biji alpukat

78

5

,4400

,05477

,02449

,3720

,5080

,40

,50

5

,4200

,08367

,03742

,3161

,5239

,30

,50

25

,4160

,06880

,01376

,3876

,4444

,30

,50

dosis 640,8 mg/kgBB -


Total

ANOVA Kreatinin Sum of Squares

Df

Mean Square

Between Groups

,014

4

,003

Within Groups

,100

20

,005

Total

,114

24

F

Sig. ,680

,614

Post Hoc Test

Multiple Comparisons Kreatinin Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok

95% Confidence Interval

Mean

Kontrol aquadest

Infusa biji alpukat dosis

14285,7 mg/kgBB

202,24 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis

Difference

Std.

Lower

Upper

(I-J)

Error

Sig.

Bound

Bound

-,02000

,04472

1,000

-,1610

,1210

-,06000

,04472

1,000

-,2010

,0810

-,06000

,04472

1,000

-,2010

,0810

-,04000

,04472

1,000

-,1810

,1010

,02000

,04472

1,000

-,1210

,1610

360 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis

Kontrol aquadest

202,24 mg/kgBB

14285,7 mg/kgBB



79

-,04000

,04472

1,000

-,1810

,1010

-,04000

,04472

1,000

-,1810

,1010

-,02000

,04472

1,000

-,1610

,1210

,06000

,04472

1,000

-,0810

,2010

,04000

,04472

1,000

-,1010

,1810

,00000

,04472

1,000

-,1410

,1410

,02000

,04472

1,000

-,1210

,1610

,06000

,04472

1,000

-,0810

,2010

,04000

,04472

1,000

-,1010

,1810

,00000

,04472

1,000

-,1410

,1410

,02000

,04472

1,000

-,1210

,1610

,04000

,04472

1,000

-,1010

,1810

,02000

,04472

1,000

-,1210

,1610

-,02000

,04472

1,000

-,1610

,1210

-,02000

,04472

1,000

-,1610

,1210


Kontrol aquadest

360 mg/kgBB

14285,7 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB


Kontrol aquadest

640,8 mg/kgBB

14285,7 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 202,24 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 360 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB


Kontrol aquadest

1140,62 mg/kgBB



Lampiran 10. Analisis statistik Paired T-test kadar kreatinin tikus betina sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

Kontrolpre

,3600

5

,08944

,04000

Kontrolpost

,4000

5

,07071

,03162

Dosis1pre

,4200

5

,08367

,03742

Dosis1post

,4400

5

,11402

,05099

Dosis2pre

,3600

5

,08944

,04000

Dosis2post

,3800

5

,08367

,03742

Dosis3pre

,4000

5

,07071

,03162

Dosis3post

,4800

5

,08367

,03742

Dosis4pre

,3400

5

,05477

,02449

Dosis4post

,4200

5

,13038

,05831


Correlation

Sig.

Pair 1


5

,791

,111

Pair 2


5

,681

,205

Pair 3


5

,869

,056

Pair 4


5

,423

,478

Pair 5


5

,560

,326

80


81

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Interval of the

Mean Pair 1

Kontrolpre –

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

Difference Lower

Sig. (2-

Upper

T

df

tailed)

-,04000

,05477

,02449

-,10801

,02801

-1,633

4

,178

-,02000

,08367

,03742

-,12389

,08389

-,535

4

,621

-,02000

,04472

,02000

-,07553

,03553

-1,000

4

,374

-,08000

,08367

,03742

-,18389

,02389

-2,138

4

,099

-,08000

,10954

,04899

-,21602

,05602

-1,633

4

,178

Kontrolpost Pair 2


Pair 3


Pair 4


Pair 5


Lampiran 11. Analisis statistik kadar kreatinin tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test Unstandardized Residual N Normal Parameters

25 a,b

Mean Std. Deviation


,0000000 1,43310241

Absolute

,108

Positive

,108

Negative

-,087


,540


,933



82

Homogeneous Subsets Kreatinin Scheffe

a

Kelompok


1


5

,3800

Kontrol aquadest 14285 mg/kgBB

5

,4000


5

,4200


5

,4400


5

,4800

Sig.

,642

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000. Test of Homogeneity of Variances Kreatinin Levene Statistic

df1

1,121

df2 4

Sig. 20

,375

Oneway Descriptives Kreatinin 95% Confidence Interval for Mean Std. N -

Kontrol

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Bound

Bound

Minimum

Maximum

5

,4000

,07071

,03162

,3122

,4878

,30

,50

5

,4400

,11402

,05099

,2984

,5816

,30

,60

5

,3800

,08367

,03742

,2761

,4839

,30

,50

aquadest 14285 mg/kgBB -


-



-

Infusa biji

83

5

,4800

,08367

,03742

,3761

,5839

,40

,60

5

,4200

,13038

,05831

,2581

,5819

,30

,60

25

,4240

,09695

,01939

,3840

,4640

,30

,60

alpukat dosis 640,8 mg/kgBB -


Total

ANOVA Kreatinin Sum of Squares

Df

Mean Square

Between Groups

,030

4

,007

Within Groups

,196

20

,010

Total

,226

24

F

Sig. ,755

,566

Post Hoc Test Multiple Comparisons Kreatinin Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok


Mean

Kontrol aquadest


14285,7 mg/kgBB


Difference

Std.

Lower

Upper

(I-J)

Error

Sig.

Bound

Bound

-,04000

,06261

1,000

-,2374

,1574

,02000

,06261

1,000

-,1774

,2174

-,08000

,06261

1,000

-,2774

,1174

-,02000

,06261

1,000

-,2174

,1774

,04000

,06261

1,000

-,1574

,2374


Kontrol aquadest

202,24 mg/kgBB

14285,7 mg/kgBB



84

,06000

,06261

1,000

-,1374

,2574

-,04000

,06261

1,000

-,2374

,1574

,02000

,06261

1,000

-,1774

,2174

-,02000

,06261

1,000

-,2174

,1774

-,06000

,06261

1,000

-,2574

,1374

-,10000

,06261

1,000

-,2974

,0974

-,04000

,06261

1,000

-,2374

,1574

,08000

,06261

1,000

-,1174

,2774

,04000

,06261

1,000

-,1574

,2374

,10000

,06261

1,000

-,0974

,2974

,06000

,06261

1,000

-,1374

,2574

,02000

,06261

1,000

-,1774

,2174

-,02000

,06261

1,000

-,2174

,1774

,04000

,06261

1,000

-,1574

,2374

-,06000

,06261

1,000

-,2574

,1374


Kontrol aquadest

360 mg/kgBB



Kontrol aquadest

640,8 mg/kgBB



Kontrol aquadest

1140,62 mg/kgBB



Lampiran 12. Analisis statistik Paired T-test kadar ureum tikus jantan sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat

Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

Kontrolpre

28,1200

5

2,21066

,98864

Kontrolpost

31,1000

5

4,49500

2,01022

Dosis1pre

28,6000

5

3,45326

1,54434

Dosis1post

31,4600

5

2,28101

1,02010

Dosis2pre

27,5800

5

4,55763

2,03823

Dosis2post

31,0800

5

3,95942

1,77071

Dosis3pre

29,1800

5

3,03513

1,35735

Dosis3post

32,1800

5

5,04450

2,25597

Dosis4pre

25,8600

5

1,49599

,66903

Dosis4post

30,6000

5

4,18629

1,87216


Correlation

Sig.

Pair 1


5

,828

,083

Pair 2


5

,709

,180

Pair 3


5

,732

,160

Pair 4


5

,890

,043

Pair 5


5

-,076

,903

85


86

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence

Mean Pair 1 Kontrolpre –

Std.

Interval of the

Std.

Error

Difference

Deviation

Mean

-

Kontrolpost

2,98000

Pair 2 Dosis1pre -

-

Dosis1post

2,86000

Pair 3 Dosis2pre -

-

Dosis2post

3,50000

Pair 4 Dosis3pre -

-

Dosis3post

3,00000

Pair 5 Dosis4pre -

-

Dosis4post

4,74000

Lower

Sig. (2-

Upper

T

Df

tailed)

2,93888

1,31431

-6,62910

,66910

-2,267

4

,086

2,43988

1,09115

-5,88951

,16951

-2,621

4

,059

3,16860

1,41704

-7,43433

,43433

-2,470

4

,069

2,71937

1,21614

-6,37655

,37655

-2,467

4

,069

4,55170

2,03558 -10,39169

,91169

-2,329

4

,080

Lampiran 13. Analisis statistik kadar ureum tikus jantan sesudah pemberian infusa biji alpukat


25 a,b

Mean Std. Deviation


,0000000 1,44329322

Absolute

,153

Positive

,153

Negative

-,153


,765


,602



87

Homogeneous Subsets Ureum Scheffe

a

Kelompok


Infusa biji alpukat dosis 1140,62

1

5

30,6000


5

31,0800

Kontrol aquadest 14285,7 mg/kgBB

5

31,1000

Infusa biji alpukat dosis 202,24

5

31,4600

5

32,1800

mg/kgBB

mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB Sig.

,984

Test of Homogeneity of Variances Ureum Levene Statistic

df1

1,033

df2 4

Sig. 20

,415

Oneway Descriptives Ureum 95% Confidence Interval for Mean Std. N -

Kontrol

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Bound

Bound

Minimum

Maximum

5

31,1000

4,49500

2,01022

25,5187

36,6813

26,50

38,60

5

31,4600

2,28101

1,02010

28,6278

34,2922

28,80

34,80

aquadest 14285,7 mg/kgBB -



-

Infusa biji

88

5

31,0800

3,95942

1,77071

26,1637

35,9963

26,60

36,10

5

32,1800

5,04450

2,25597

25,9164

38,4436

28,10

39,40

5

30,6000

4,18629

1,87216

25,4020

35,7980

25,30

35,60

25

31,2840

3,78106

,75621

29,7233

32,8447

25,30

39,40

alpukat dosis 360 mg/kgBB -


-


Total

ANOVA Ureum Sum of Squares Between Groups

Df

Mean Square

6,886

4

1,721

Within Groups

336,228

20

16,811

Total

343,114

24

F

Sig. ,102

,980

Post Hoc Test Multiple Comparisons Ureum Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok


Mean



mg/kgBB


Difference

Std.

(I-J)

Error

Lower

Upper

Sig.

Bound

Bound

-,36000

2,59318

1,000

-8,5373

7,8173

,02000

2,59318

1,000

-8,1573

8,1973

-1,08000

2,59318

1,000

-9,2573

7,0973

,50000

2,59318

1,000

-7,6773

8,6773

360 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB



Kontrol aquadest

202,24 mg/kgBB


89

,36000

2,59318

1,000

-7,8173

8,5373

,38000

2,59318

1,000

-7,7973

8,5573

-,72000

2,59318

1,000

-8,8973

7,4573

,86000

2,59318

1,000

-7,3173

9,0373

-,02000

2,59318

1,000

-8,1973

8,1573

-,38000

2,59318

1,000

-8,5573

7,7973

-1,10000

2,59318

1,000

-9,2773

7,0773

,48000

2,59318

1,000

-7,6973

8,6573

1,08000

2,59318

1,000

-7,0973

9,2573

,72000

2,59318

1,000

-7,4573

8,8973

1,10000

2,59318

1,000

-7,0773

9,2773

1,58000

2,59318

1,000

-6,5973

9,7573

-,50000

2,59318

1,000

-8,6773

7,6773

-,86000

2,59318

1,000

-9,0373

7,3173

-,48000

2,59318

1,000

-8,6573

7,6973

-1,58000

2,59318

1,000

-9,7573

6,5973


Kontrol aquadest

360 mg/kgBB



Kontrol aquadest

640,8 mg/kgBB



Kontrol aquadest

1140,62 mg/kgBB



Lampiran 14. Analisis statistik Paired T-test kadar ureum tikus betina sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

Kontrolpre

28,8000

5

2,96057

1,32401

Kontrolpost

32,2000

5

2,11778

,94710

Dosis1pre

30,2800

5

3,89769

1,74310

Dosis1post

34,3000

5

4,14849

1,85526

Dosis2pre

29,8000

5

2,75772

1,23329

Dosis2post

34,9200

5

3,25069

1,45375

Dosis3pre

30,1000

5

4,76707

2,13190

Dosis3post

35,4400

5

3,09726

1,38514

Dosis4pre

27,0600

5

6,96585

3,11522

Dosis4post

34,3400

5

6,12152

2,73763


Correlation

Sig.

Pair 1


5

,364

,547

Pair 2


5

,225

,715

Pair 3


5

-,490

,402

Pair 4


5

,241

,696

Pair 5


5

-,116

,853

90


91

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Interval of the

Mean Pair 1

Kontrolpre –

Difference

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

Lower

Sig. (2-

Upper

T

df

tailed)

-3,40000

2,94703

1,31795

-7,05922

,25922

-2,580

4

,061

-4,02000

5,01119

2,24107 -10,24221

2,20221

-1,794

4

,147

-5,12000

5,19249

2,32215 -11,56733

1,32733

-2,205

4

,092

-5,34000

5,02076

2,24535 -11,57409

,89409

-2,378

4

,076

-7,28000

9,79117

4,37874 -19,43734

4,87734

-1,663

4

,172

Kontrolpost Pair 2


Pair 3


Pair 4


Pair 5


Lampiran 15. Analisis statistik kadar ureum tikus betina sesudah pemberian infusa biji alpukat


25 a,b

Mean Std. Deviation


,0000000 1,41255982

Absolute

,106

Positive

,092

Negative

-,106


,528


,943



92

Homogeneous Subsets Ureum Scheffe

a

Kelompok


1

Kontrol aquadest 14285,7 mg/kgBB

5

32,2000


5

34,3000


5

34,3400


5

34,9200


5

35,4400

Sig.

,797

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000. Test of Homogeneity of Variances Ureum Levene Statistic

df1

,609

df2 4

Sig. 20

,661

Oneway Descriptives Ureum 95% Confidence Interval for Mean Std. N -

Kontrol

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Bound

Bound

Minimum

Maximum

5

32,2000

2,11778

,94710

29,5704

34,8296

30,10

35,00

5

34,3000

4,14849

1,85526

29,1490

39,4510

28,80

40,20

aquadest 14285,7 mg/kgBB -



-

Infusa biji

93

5

34,9200

3,25069

1,45375

30,8837

38,9563

30,70

39,20

5

35,4400

3,09726

1,38514

31,5942

39,2858

32,90

40,80

5

34,3400

6,12152

2,73763

26,7391

41,9409

24,50

40,80

25

34,2400

3,80624

,76125

32,6689

35,8111

24,50

40,80

alpukat dosis 360 mg/kgBB -


-


Total

ANOVA Ureum Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

30,388

4

7,597

Within Groups

317,312

20

15,866

Total

347,700

24

F

Sig. ,479

,751

Post Hoc Test Multiple Comparisons Ureum Bonferroni (I) Kelompok

(J) Kelompok


Mean

Kontrol aquadest


14285,7 mg/kgBB


Difference

Std.

(I-J)

Error

Lower

Upper

Sig.

Bound

Bound

-2,10000

2,51917

1,000

-10,0440

5,8440

-2,72000

2,51917

1,000

-10,6640

5,2240

-3,24000

2,51917

1,000

-11,1840

4,7040

-2,14000

2,51917

1,000

-10,0840

5,8040

360 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 640,8 mg/kgBB Infusa biji alpukat dosis 1140,62 mg/kgBB



Kontrol aquadest

202,24 mg/kgBB


94

2,10000

2,51917

1,000

-5,8440

10,0440

-,62000

2,51917

1,000

-8,5640

7,3240

-1,14000

2,51917

1,000

-9,0840

6,8040

-,04000

2,51917

1,000

-7,9840

7,9040

2,72000

2,51917

1,000

-5,2240

10,6640

,62000

2,51917

1,000

-7,3240

8,5640

-,52000

2,51917

1,000

-8,4640

7,4240

,58000

2,51917

1,000

-7,3640

8,5240

3,24000

2,51917

1,000

-4,7040

11,1840

1,14000

2,51917

1,000

-6,8040

9,0840

,52000

2,51917

1,000

-7,4240

8,4640

1,10000

2,51917

1,000

-6,8440

9,0440

2,14000

2,51917

1,000

-5,8040

10,0840

,04000

2,51917

1,000

-7,9040

7,9840

-,58000

2,51917

1,000

-8,5240

7,3640

-1,10000

2,51917

1,000

-9,0440

6,8440


Kontrol aquadest

360 mg/kgBB



Kontrol aquadest

640,8 mg/kgBB



Kontrol aquadest

1140,62 mg/kgBB



95

Lampiran 16. Analisis statistik perubahan berat badan tikus jantan dan betina sesudah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari

Tikus Jantan Case Processing Summary Cases Included N Berat badan hari ke-0 *

Percent

Excluded N

Total

Percent

N

Percent

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-7 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-14 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-21 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-28 * Kelompok perlakuan


96

Report Kelompok perlakuan

Berat

Berat

Berat

Berat

badan hari badan hari badan hari badan hari Berat badan ke-0 Infusa biji alpukat 202,24

N

mg/kgBB

ke-7

ke-14

ke-21

hari ke-28

5

5

5

5

5

Mean

178,8000

185,0000

193,4000

220,2000

239,0000

Std. Deviation

17,09386

27,00926

37,82592

24,95396

20,97618

7,64461

12,07891

16,91626

11,15975

9,38083

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat 360

N

mg/kgBB

Mean

199,8000

202,8000

210,8000

238,4000

262,2000

Std. Deviation

21,52208

27,09613

32,69098

27,07951

27,27086

9,62497

12,11776

14,61985

12,11033

12,19590

5

5

5

5

5

154,8000

195,0000

228,8000

255,0000

271,4000

Std. Deviation

4,14729

16,00000

11,47606

26,07681

20,28053

Std. Error of Mean

1,85472

7,15542

5,13225

11,66190

9,06973

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat

N

640,8mg/kgBB

Mean

Infusa biji alpukat 1140,6

N

mg/kgBB

Mean

198,6000

214,2000

220,6000

242,4000

259,0000

Std. Deviation

27,29102

19,75348

23,61779

20,20643

23,24866

Std. Error of Mean

12,20492

8,83403

10,56220

9,03659

10,39711

5

5

5

5

5

kontrol aquadest 14285,7

N

mg/kgBB

Mean

192,8000

192,2000

193,2000

216,6000

221,6000

Std. Deviation

31,05962

18,34939

14,78851

13,81304

45,21394

Std. Error of Mean

13,89028

8,20610

6,61362

6,17738

20,22029

25

25

25

25

25

Mean

184,9600

197,8400

209,3600

234,5200

250,6400

Std. Deviation

26,61841

22,61209

27,94471

25,53938

32,13627

5,32368

4,52242

5,58894

5,10788

6,42725

Total

N

Std. Error of Mean

General Linear Model Between-Subjects Factors Value Label Kelompok perlakuan

1,00

Infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB

N 5


2,00

Infusa biji

97

5

alpukat 360 mg/kgBB 3,00

Infusa biji

5

alpukat 640,8mg/kgBB 4,00

Infusa biji

5

alpukat 1140,6 mg/kgBB 5,00

kontrol

5

aquadest 14285,7 mg/kgBB

c

Multivariate Tests Effect

Hypothesis Value

Intercept

Kelompok_perlakuan

F

df

Error df

Sig.

Pillai's Trace

,993

464,086

a

Wilks' Lambda

,007

464,086

a

5,000

16,000

,000

5,000

16,000

,000

5,000

16,000

,000

Hotelling's Trace

145,027

464,086

a

Roy's Largest Root

145,027

464,086

a

5,000

16,000

,000

1,100

1,441

20,000

76,000

,130

,169

1,915

20,000

54,016

,030

3,461

2,509

20,000

58,000

,003

3,041

b

5,000

19,000

,000

Pillai's Trace Wilks' Lambda Hotelling's Trace Roy's Largest Root

11,557

a. Exact statistic b. The statistic is an upper bound on F that yields a lower bound on the significance level. c. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan

Levene's Test of Equality of Error Variances F

df1

a

df2

Sig.

Berat badan hari ke-0

3,680

4

20

,021


,168

4

20

,952


,795

4

20

,542


,768

4

20

,559


1,474

4

20

,247


98

Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups. a. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan

Post Hoc Multiple Comparisons Tukey HSD Dependent

(I) Kelompok

(J) Kelompok

Variable


Mean Differenc e (I-J)

BB0

IBA 202,2 mg/dl

IBA 360 mg/dl

Std. Error

Sig.

Lower

Upper

Bound

Bound

-21,0000

14,09142

,580 -63,1668

21,1668

24,0000

14,09142

,454 -18,1668

66,1668

IBA 1140,62 mg/dl

-19,8000

14,09142

,632 -61,9668

22,3668

kontrol aquadest

-14,0000

14,09142

,855 -56,1668

28,1668

IBA 202,2 mg/dl

21,0000

14,09142

,580 -21,1668

63,1668

IBA 640,8 mg/dl

45,0000*

14,09142

,033

2,8332

87,1668

IBA 1140,62 mg/dl

1,2000

14,09142

1,000 -40,9668

43,3668

kontrol aquadest

7,0000

14,09142

,987 -35,1668

49,1668

IBA 202,2 mg/dl

-24,0000

14,09142

,454 -66,1668

18,1668

IBA 360 mg/dl

-45,0000*

14,09142

,033 -87,1668

-2,8332

IBA 1140,62 mg/dl

*

-43,8000

14,09142

,039 -85,9668

-1,6332

kontrol aquadest

-38,0000

14,09142

,090 -80,1668

4,1668

IBA 202,2 mg/dl

19,8000

14,09142

,632 -22,3668

61,9668

IBA 360 mg/dl

-1,2000

14,09142

1,000 -43,3668

40,9668

IBA 640,8 mg/dl

*

43,8000

14,09142

,039

1,6332

85,9668

kontrol aquadest

5,8000

14,09142

,993 -36,3668

47,9668

kontrol aquadest 14285,7 IBA 202,2 mg/dl

14,0000

14,09142

,855 -28,1668

56,1668

mg/dl

IBA 360 mg/dl

-7,0000

14,09142

,987 -49,1668

35,1668

IBA 640,8 mg/dl

38,0000

14,09142

,090

-4,1668

80,1668

IBA 1140,62 mg/dl

-5,8000

14,09142

,993 -47,9668

36,3668

-17,8000

13,99028

,710 -59,6642

24,0642

IBA 640,8 mg/dl

14285,7 mg/dl IBA 360 mg/dl

14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl

14285,7 mg/dl

BB7

IBA 202,2 mg/dl

IBA 360 mg/dl


99

IBA 640,8 mg/dl

-10,0000

13,99028

,951 -51,8642

31,8642

IBA 1140,62 mg/dl

-29,2000

13,99028

,264 -71,0642

12,6642

-7,2000

13,99028

,985 -49,0642

34,6642

IBA 202,2 mg/dl

17,8000

13,99028

,710 -24,0642

59,6642

IBA 640,8 mg/dl

7,8000

13,99028

,980 -34,0642

49,6642

-11,4000

13,99028

,923 -53,2642

30,4642

10,6000

13,99028

,940 -31,2642

52,4642

IBA 202,2 mg/dl

10,0000

13,99028

,951 -31,8642

51,8642

IBA 360 mg/dl

-7,8000

13,99028

,980 -49,6642

34,0642

-19,2000

13,99028

,651 -61,0642

22,6642

2,8000

13,99028

1,000 -39,0642

44,6642

IBA 202,2 mg/dl

29,2000

13,99028

,264 -12,6642

71,0642

IBA 360 mg/dl

11,4000

13,99028

,923 -30,4642

53,2642

IBA 640,8 mg/dl

19,2000

13,99028

,651 -22,6642

61,0642

kontrol aquadest

22,0000

13,99028

,531 -19,8642

63,8642

7,2000

13,99028

,985 -34,6642

49,0642

-10,6000

13,99028

,940 -52,4642

31,2642

-2,8000

13,99028

1,000 -44,6642

39,0642

IBA 1140,62 mg/dl

-22,0000

13,99028

,531 -63,8642

19,8642

IBA 360 mg/dl

-17,4000

16,51109

,827 -66,8074

32,0074

IBA 640,8 mg/dl

-35,4000

16,51109

,241 -84,8074

14,0074

IBA 1140,62 mg/dl

-27,2000

16,51109

,486 -76,6074

22,2074

,2000

16,51109

1,000 -49,2074

49,6074

IBA 202,2 mg/dl

17,4000

16,51109

,827 -32,0074

66,8074

IBA 640,8 mg/dl

-18,0000

16,51109

,809 -67,4074

31,4074

IBA 1140,62 mg/dl

-9,8000

16,51109

,974 -59,2074

39,6074

kontrol aquadest

17,6000

16,51109

,821 -31,8074

67,0074

IBA 202,2 mg/dl

35,4000

16,51109

,241 -14,0074

84,8074

IBA 360 mg/dl

18,0000

16,51109

,809 -31,4074

67,4074

8,2000

16,51109

,987 -41,2074

57,6074

kontrol aquadest 14285,7 mg/dl IBA 360 mg/dl

IBA 1140,62 mg/dl kontrol aquadest 14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl


14285,7 mg/dl kontrol aquadest 14285,7 IBA 202,2 mg/dl mg/dl

IBA 360 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

BB14

IBA 202,2 mg/dl


14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

IBA 1140,62 mg/dl


kontrol aquadest

100

35,6000

16,51109

,236 -13,8074

85,0074

27,2000

16,51109

,486 -22,2074

76,6074

9,8000

16,51109

,974 -39,6074

59,2074

IBA 640,8 mg/dl

-8,2000

16,51109

,987 -57,6074

41,2074

kontrol aquadest

27,4000

16,51109

,479 -22,0074

76,8074

-,2000

16,51109

1,000 -49,6074

49,2074

IBA 360 mg/dl

-17,6000

16,51109

,821 -67,0074

31,8074

IBA 640,8 mg/dl

-35,6000

16,51109

,236 -85,0074

13,8074

IBA 1140,62 mg/dl

-27,4000

16,51109

,479 -76,8074

22,0074

IBA 360 mg/dl

-18,2000

14,51923

,721 -61,6470

25,2470

IBA 640,8 mg/dl

-34,8000

14,51923

,157 -78,2470

8,6470

IBA 1140,62 mg/dl

-22,2000

14,51923

,557 -65,6470

21,2470

3,6000

14,51923

,999 -39,8470

47,0470

IBA 202,2 mg/dl

18,2000

14,51923

,721 -25,2470

61,6470

IBA 640,8 mg/dl

-16,6000

14,51923

,782 -60,0470

26,8470

IBA 1140,62 mg/dl

-4,0000

14,51923

,999 -47,4470

39,4470

kontrol aquadest

21,8000

14,51923

,573 -21,6470

65,2470

IBA 202,2 mg/dl

34,8000

14,51923

,157

-8,6470

78,2470

IBA 360 mg/dl

16,6000

14,51923

,782 -26,8470

60,0470

IBA 1140,62 mg/dl

12,6000

14,51923

,905 -30,8470

56,0470

kontrol aquadest

38,4000

14,51923

,099

-5,0470

81,8470

22,2000

14,51923

,557 -21,2470

65,6470

4,0000

14,51923

,999 -39,4470

47,4470

IBA 640,8 mg/dl

-12,6000

14,51923

,905 -56,0470

30,8470

kontrol aquadest

25,8000

14,51923

,413 -17,6470

69,2470

-3,6000

14,51923

,999 -47,0470

39,8470

IBA 360 mg/dl

-21,8000

14,51923

,573 -65,2470

21,6470

IBA 640,8 mg/dl

-38,4000

14,51923

,099 -81,8470

5,0470

IBA 1140,62 mg/dl

-25,8000

14,51923

,413 -69,2470

17,6470

IBA 360 mg/dl

-23,2000

18,28617

,712 -77,9191

31,5191

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl

IBA 202,2 mg/dl IBA 360 mg/dl


BB21

IBA 202,2 mg/dl


14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl



BB28

IBA 202,2 mg/dl


101

IBA 640,8 mg/dl

-32,4000

18,28617

,416 -87,1191

22,3191

IBA 1140,62 mg/dl

-20,0000

18,28617

,808 -74,7191

34,7191

17,4000

18,28617

,873 -37,3191

72,1191

IBA 202,2 mg/dl

23,2000

18,28617

,712 -31,5191

77,9191

IBA 640,8 mg/dl

-9,2000

18,28617

,986 -63,9191

45,5191

3,2000

18,28617

1,000 -51,5191

57,9191

40,6000

18,28617

,213 -14,1191

95,3191

32,4000

18,28617

,416 -22,3191

87,1191

9,2000

18,28617

,986 -45,5191

63,9191

IBA 1140,62 mg/dl

12,4000

18,28617

,959 -42,3191

67,1191

kontrol aquadest

49,8000

18,28617

,086

-4,9191

104,5191

IBA 202,2 mg/dl

20,0000

18,28617

,808 -34,7191

74,7191

IBA 360 mg/dl

-3,2000

18,28617

1,000 -57,9191

51,5191

IBA 640,8 mg/dl

-12,4000

18,28617

,959 -67,1191

42,3191

kontrol aquadest

37,4000

18,28617

,282 -17,3191

92,1191

kontrol aquadest 14285,7 IBA 202,2 mg/dl

-17,4000

18,28617

,873 -72,1191

37,3191

mg/dl

IBA 360 mg/dl

-40,6000

18,28617

,213 -95,3191

14,1191

IBA 640,8 mg/dl

-49,8000

18,28617

,086




14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl

14285,7 mg/dl

-

4,9191

104,519 1 IBA 1140,62 mg/dl

-37,4000

18,28617

,282 -92,1191

17,3191

Based on observed means. The error term is Mean Square(Error) = 835,960. *. The mean difference is significant at the ,05 level.

Tikus Betina Case Processing Summary Cases Included N BB0 * Kelompok

Percent 25

100,0%

Excluded N

Total

Percent 0

,0%

N

Percent 25

100,0%


102

BB7 * Kelompok

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

BB14 * Kelompok

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

BB21 * Kelompok

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

BB28 * Kelompok

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

BB14

BB21

BB28

Report Kelompok IBA 202,2 mg/dl

BB0 N

BB7 5

5

5

5

5

173,2000

186,4000

173,0000

184,4000

199,0000

6,80000

15,64800

7,72658

8,11542

7,58288

15,20526

34,99000

17,27715

18,14663

16,95582

5

5

5

5

5

Mean

153,4000

156,4000

148,0000

159,4000

173,6000

Std. Error of

11,19643

2,15870

6,33246

5,58211

5,95483

25,03597

4,82701

14,15980

12,48199

13,31540

5

5

5

5

5

171,2000

157,4000

161,2000

174,8000

188,2000

8,85099

11,44814

12,20410

11,05622

11,35077

19,79141

25,59883

27,28919

24,72246

25,38110

5

5

5

5

5

157,2000

158,8000

169,8000

162,6000

167,8000

1,39284

3,21559

6,39844

3,10805

5,03389

3,11448

7,19027

14,30734

6,94982

11,25611

5

5

5

5

5

150,8000

151,8000

154,4000

157,8000

170,0000

1,06771

7,51266

4,73920

9,80000

7,54983

2,38747

16,79881

10,59717

21,91347

16,88194

25

25

25

25

25

161,1600

162,1600

161,2800

167,8000

179,7200

3,46539

4,61110

3,74412

3,89658

4,01477

Mean Std. Error of Mean Std. Deviation IBA 360 mg/dl

N

Mean Std. Deviation IBA 640,8 mg/dl

N Mean Std. Error of Mean Std. Deviation

IBA 1140,62 mg/dl


kontrol aquadest

N

14285,7 mg/dl

Mean Std. Error of Mean Std. Deviation

Total

N Mean Std. Error of Mean


103

Report Kelompok IBA 202,2 mg/dl

BB0 N

BB7

BB14

BB21

BB28

5

5

5

5

5

173,2000

186,4000

173,0000

184,4000

199,0000

6,80000

15,64800

7,72658

8,11542

7,58288

15,20526

34,99000

17,27715

18,14663

16,95582

5

5

5

5

5

Mean

153,4000

156,4000

148,0000

159,4000

173,6000

Std. Error of

11,19643

2,15870

6,33246

5,58211

5,95483

25,03597

4,82701

14,15980

12,48199

13,31540

5

5

5

5

5

171,2000

157,4000

161,2000

174,8000

188,2000

8,85099

11,44814

12,20410

11,05622

11,35077

19,79141

25,59883

27,28919

24,72246

25,38110

5

5

5

5

5

157,2000

158,8000

169,8000

162,6000

167,8000

1,39284

3,21559

6,39844

3,10805

5,03389

3,11448

7,19027

14,30734

6,94982

11,25611

5

5

5

5

5

150,8000

151,8000

154,4000

157,8000

170,0000

1,06771

7,51266

4,73920

9,80000

7,54983

2,38747

16,79881

10,59717

21,91347

16,88194

25

25

25

25

25

161,1600

162,1600

161,2800

167,8000

179,7200

3,46539

4,61110

3,74412

3,89658

4,01477

17,32695

23,05551

18,72058

19,48290

20,07386

Mean Std. Error of Mean Std. Deviation IBA 360 mg/dl

N

Mean Std. Deviation IBA 640,8 mg/dl


IBA 1140,62 mg/dl


kontrol aquadest

N

14285,7 mg/dl

Mean Std. Error of Mean Std. Deviation

Total



104

General Linear Model

Between-Subjects Factors Value Label Kelompok

N

1,00

IBA 202,2 mg/dl

5

2,00

IBA 360 mg/dl

5

3,00

IBA 640,8 mg/dl

5

4,00

IBA 1140,62

5

mg/dl 5,00

kontrol

5

aquadest 14285,7 mg/dl

c

Multivariate Tests Effect Intercept

Value

Pillai's Trace

F

,997

Wilks' Lambda

,003

Hotelling's Trace

346,354

Hypothesis df

Error df

Sig.

1108,333

a

5,000

16,000

,000

1108,333

a

5,000

16,000

,000

1108,333

a

5,000

16,000

,000

a

5,000

16,000

,000

Roy's Largest Root

346,354

1108,333

Pillai's Trace

1,133

1,502

20,000

76,000

,106

Wilks' Lambda

,206

1,649

20,000

54,016

,074

Hotelling's Trace

2,387

1,731

20,000

58,000

,054

1,676

b

5,000

19,000

,001

Kelompok

Roy's Largest Root

6,369

a. Exact statistic b. The statistic is an upper bound on F that yields a lower bound on the significance level. c. Design: Intercept + Kelompok

Levene's Test of Equality of Error Variances F

df1

df2

a

Sig.

BB0

10,282

4

20

,000

BB7

2,865

4

20

,050

BB14

1,478

4

20

,246

BB21

1,490

4

20

,243

BB28

1,607

4

20

,211


105

Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups. a. Design: Intercept + Kelompok

Poshoc Multiple Comparisons Tukey HSD Dependent

(I) Kelompok

(J) Kelompok

Variable

Mean


Difference (I-J) BB0

IBA 202,2 mg/dl

IBA 360 mg/dl

Std. Error

Sig.

Lower Bound

Upper Bound

19,8000

10,06022

,316

-10,3039

49,9039

2,0000

10,06022

1,000

-28,1039

32,1039

IBA 1140,62 mg/dl

16,0000

10,06022

,520

-14,1039

46,1039

kontrol aquadest

22,4000

10,06022

,211

-7,7039

52,5039

IBA 202,2 mg/dl

-19,8000

10,06022

,316

-49,9039

10,3039

IBA 640,8 mg/dl

-17,8000

10,06022

,417

-47,9039

12,3039

-3,8000

10,06022

,995

-33,9039

26,3039

2,6000

10,06022

,999

-27,5039

32,7039

IBA 202,2 mg/dl

-2,0000

10,06022

1,000

-32,1039

28,1039

IBA 360 mg/dl

17,8000

10,06022

,417

-12,3039

47,9039

IBA 1140,62 mg/dl

14,0000

10,06022

,640

-16,1039

44,1039

kontrol aquadest

20,4000

10,06022

,289

-9,7039

50,5039

-16,0000

10,06022

,520

-46,1039

14,1039

3,8000

10,06022

,995

-26,3039

33,9039

IBA 640,8 mg/dl

-14,0000

10,06022

,640

-44,1039

16,1039

kontrol aquadest

6,4000

10,06022

,967

-23,7039

36,5039

-22,4000

10,06022

,211

-52,5039

7,7039

-2,6000

10,06022

,999

-32,7039

27,5039

-20,4000

10,06022

,289

-50,5039

9,7039

IBA 1140,62 mg/dl

-6,4000

10,06022

,967

-36,5039

23,7039

IBA 360 mg/dl

30,0000

13,37700

,205

-10,0290

70,0290

IBA 640,8 mg/dl



dimension1

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl


14285,7 mg/dl kontrol aquadest 14285,7

IBA 202,2 mg/dl

mg/dl


BB7

IBA 202,2 mg/dl


106

IBA 640,8 mg/dl

29,0000

13,37700

,232

-11,0290

69,0290

IBA 1140,62 mg/dl

27,6000

13,37700

,274

-12,4290

67,6290

kontrol aquadest

34,6000

13,37700

,111

-5,4290

74,6290

IBA 202,2 mg/dl

-30,0000

13,37700

,205

-70,0290

10,0290

IBA 640,8 mg/dl

-1,0000

13,37700

1,000

-41,0290

39,0290

IBA 1140,62 mg/dl

-2,4000

13,37700

1,000

-42,4290

37,6290

4,6000

13,37700

,997

-35,4290

44,6290

-29,0000

13,37700

,232

-69,0290

11,0290

1,0000

13,37700

1,000

-39,0290

41,0290

-1,4000

13,37700

1,000

-41,4290

38,6290

5,6000

13,37700

,993

-34,4290

45,6290

-27,6000

13,37700

,274

-67,6290

12,4290

IBA 360 mg/dl

2,4000

13,37700

1,000

-37,6290

42,4290

IBA 640,8 mg/dl

1,4000

13,37700

1,000

-38,6290

41,4290

kontrol aquadest

7,0000

13,37700

,984

-33,0290

47,0290

-34,6000

13,37700

,111

-74,6290

5,4290


kontrol aquadest 14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

IBA 202,2 mg/dl IBA 360 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl kontrol aquadest 14285,7 mg/dl

IBA 1140,62 mg/dl

IBA 202,2 mg/dl

14285,7 mg/dl

BB14

kontrol aquadest 14285,7

IBA 202,2 mg/dl

mg/dl

IBA 360 mg/dl

-4,6000

13,37700

,997

-44,6290

35,4290

IBA 640,8 mg/dl

-5,6000

13,37700

,993

-45,6290

34,4290

IBA 1140,62 mg/dl

-7,0000

13,37700

,984

-47,0290

33,0290

IBA 360 mg/dl

25,0000

11,17390

,207

-8,4365

58,4365

IBA 640,8 mg/dl

11,8000

11,17390

,826

-21,6365

45,2365

3,2000

11,17390

,998

-30,2365

36,6365

18,6000

11,17390

,476

-14,8365

52,0365

IBA 202,2 mg/dl

-25,0000

11,17390

,207

-58,4365

8,4365

IBA 640,8 mg/dl

-13,2000

11,17390

,762

-46,6365

20,2365

IBA 1140,62 mg/dl

-21,8000

11,17390

,324

-55,2365

11,6365

-6,4000

11,17390

,978

-39,8365

27,0365

-11,8000

11,17390

,826

-45,2365

21,6365

IBA 360 mg/dl

13,2000

11,17390

,762

-20,2365

46,6365

IBA 1140,62 mg/dl

-8,6000

11,17390

,936

-42,0365

24,8365

IBA 202,2 mg/dl

IBA 1140,62 mg/dl kontrol aquadest 14285,7 mg/dl IBA 360 mg/dl

kontrol aquadest 14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

IBA 202,2 mg/dl


kontrol aquadest

107

6,8000

11,17390

,972

-26,6365

40,2365

IBA 202,2 mg/dl

-3,2000

11,17390

,998

-36,6365

30,2365

IBA 360 mg/dl

21,8000

11,17390

,324

-11,6365

55,2365

IBA 640,8 mg/dl

8,6000

11,17390

,936

-24,8365

42,0365

kontrol aquadest

15,4000

11,17390

,648

-18,0365

48,8365

-18,6000

11,17390

,476

-52,0365

14,8365

6,4000

11,17390

,978

-27,0365

39,8365

-6,8000

11,17390

,972

-40,2365

26,6365

-15,4000

11,17390

,648

-48,8365

18,0365

25,0000

11,40105

,223

-9,1162

59,1162

9,6000

11,40105

,914

-24,5162

43,7162

IBA 1140,62 mg/dl

21,8000

11,40105

,343

-12,3162

55,9162

kontrol aquadest

26,6000

11,40105

,176

-7,5162

60,7162

IBA 202,2 mg/dl

-25,0000

11,40105

,223

-59,1162

9,1162

IBA 640,8 mg/dl

-15,4000

11,40105

,664

-49,5162

18,7162

-3,2000

11,40105

,999

-37,3162

30,9162

1,6000

11,40105

1,000

-32,5162

35,7162

IBA 202,2 mg/dl

-9,6000

11,40105

,914

-43,7162

24,5162

IBA 360 mg/dl

15,4000

11,40105

,664

-18,7162

49,5162

IBA 1140,62 mg/dl

12,2000

11,40105

,819

-21,9162

46,3162

kontrol aquadest

17,0000

11,40105

,580

-17,1162

51,1162

-21,8000

11,40105

,343

-55,9162

12,3162

3,2000

11,40105

,999

-30,9162

37,3162

IBA 640,8 mg/dl

-12,2000

11,40105

,819

-46,3162

21,9162

kontrol aquadest

4,8000

11,40105

,993

-29,3162

38,9162

-26,6000

11,40105

,176

-60,7162

7,5162

-1,6000

11,40105

1,000

-35,7162

32,5162

-17,0000

11,40105

,580

-51,1162

17,1162

IBA 1140,62 mg/dl

-4,8000

11,40105

,993

-38,9162

29,3162

IBA 360 mg/dl

25,4000

11,02978

,185

-7,6052

58,4052

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl


IBA 202,2 mg/dl

mg/dl

IBA 360 mg/dl IBA 640,8 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl

BB21

IBA 202,2 mg/dl




14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl



IBA 202,2 mg/dl

mg/dl


BB28

IBA 202,2 mg/dl


108

IBA 640,8 mg/dl

10,8000

11,02978

,861

-22,2052

43,8052

IBA 1140,62 mg/dl

31,2000

11,02978

,070

-1,8052

64,2052

kontrol aquadest

29,0000

11,02978

,102

-4,0052

62,0052

IBA 202,2 mg/dl

-25,4000

11,02978

,185

-58,4052

7,6052

IBA 640,8 mg/dl

-14,6000

11,02978

,680

-47,6052

18,4052

IBA 1140,62 mg/dl

5,8000

11,02978

,984

-27,2052

38,8052

kontrol aquadest

3,6000

11,02978

,997

-29,4052

36,6052

-10,8000

11,02978

,861

-43,8052

22,2052

IBA 360 mg/dl

14,6000

11,02978

,680

-18,4052

47,6052

IBA 1140,62 mg/dl

20,4000

11,02978

,375

-12,6052

53,4052

kontrol aquadest

18,2000

11,02978

,485

-14,8052

51,2052

-31,2000

11,02978

,070

-64,2052

1,8052

-5,8000

11,02978

,984

-38,8052

27,2052

IBA 640,8 mg/dl

-20,4000

11,02978

,375

-53,4052

12,6052

kontrol aquadest

-2,2000

11,02978

1,000

-35,2052

30,8052

-29,0000

11,02978

,102

-62,0052

4,0052

-3,6000

11,02978

,997

-36,6052

29,4052

-18,2000

11,02978

,485

-51,2052

14,8052

2,2000

11,02978

1,000

-30,8052

35,2052


14285,7 mg/dl IBA 640,8 mg/dl

IBA 202,2 mg/dl

14285,7 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl



IBA 202,2 mg/dl

mg/dl

IBA 360 mg/dl IBA 640,8 mg/dl IBA 1140,62 mg/dl

Based on observed means. The error term is Mean Square(Error) = 304,140.


109

BIOGRAFI PENULIS

Penulis memiliki nama lengkap Christina Desi Kurnia Wati dilahirkan di Argokoyo pada tanggal 1 Desember 1992. Penulis merupakan anak kedua dari dua bersaudara pasangan Bapak Pius Sarjono dan Ibu Veronika Sularsih. Penulis skripsi dengan Judul Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Persea Americana Mill. Pada Tikus Galur Sprague Dawley Terhadap Kadar Blood Urea Nitrogen dan Kreatinin mengawali pendidikan Sekolah Dasar di SD Negeri I Bangun Harjo, Oku Timur, Palembang (19992005), kemudian melanjutkan pendidikan ke Sekolah Menengah Pertama di SMP Charitas 03, Oku Timur, Palembang (2005-2008), SMA N I Belitang, Oku Timur, Palembang (2008-2011). Pada tahun 2011, penulis menempuh pendidikan S1 di Falkutas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Selama menjalani perkuliahan, penulis juga aktif terlibat diberbagai kegiatan organisasi seperti menjadi anggota UKF Dance (2013-2014), panitia Student Exchange Programme Committee (2013), panitia Action Plan Jalinan Mahasiswa Kesehatan Indonesia, yogyakarta (2013), menjadi peserta dalam Pelatihan Kepemimpinan Jalinan Mahasiswa Kesehatan Indonesia (2013), panitia Seminar Nasional Pendidikan (2013), panitia Desa Mitra 1 & 2 di Desa Sembir, Yogyakarta (2013) serta panitia Pharmacy Performance and Event Cup (PPnEC) (2012).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents