ISSN: 2252-3979 http://ejournal.unesa.ac.id/index.php/lenterabio
Penggunaan Ekstrak Daun Srikaya (Annona squamosa) sebagai Pengendali Jamur Fusarium oxysporum secara In Vitro Ayu Anggun Purwita, Novita Kartika Indah, Guntur Trimulyono Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Surabaya
ABSTRAK Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui profil fitokimia ekstrak daun srikaya secara kualitatif dan mengetahui aktivitas antifungi ekstrak daun srikaya dalam menghambat pertumbuhan Fusarium oxysporum dan mengetahui konsentrasi ekstrak daun srikaya yang optimal dalam menghambat pertumbuhan F. oxysporum. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap satu arah dengan 5 konsentrasi. Konsentrasinya meliputi 0% (kontrol), 5%, 5,5%, 6%, dan 6,5%. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak empat kali. Pengamatan dilakukan setelah masa inkubasi selama 7 hari pada suhu ruang. Paramater yang diamati yaitu hambatan pertumbuhan F. oxysporum yang ditunjukkan dari ukuran diamater koloni miselia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun srikaya berpengaruh terhadap pertumbuhan diameter koloni miselium jamur F. oxysporum. Konsentrasi yang optimal dalam penelitian ini ialah konsentrasi 6,5% karena dapat menghambat pertumbuhan F. oxysporum dengan rata-rata dimater koloni sebesar 2,84±0,30 cm dan persentase penghambatannya sebesar 60%. Kata kunci: ekstrak daun srikaya; Annona squamosai; pengendali jamur Fusarium oxysporum
ABSTRACT This study aimed to determine the phytochemical profile of srikaya extract qualitatively and the antifungal activities srikaya leaves extract to inhibition on the growth of Fusarium oxysporum and find out the optimal concentration of srikaya leaves extract on inhibiting the F. oxysporum growth. The study were designed by randomized completely design with one factor treatments with 5 concentration.Antifungal activity test to be used solid dilution method. Concentration include 0% (control), 5%, 5.5%, 6%, and 6.5%. Each treatment was repeated with four replications. Observation was conducted after incubation for 7 days at room temperature. The parameters observed was inhibition F. oxysporum growth with indicated size of the diameter mycelial colony. The results showed that the srikaya leaves extract had an inhibitory effect on mycelial colony A. flavus growth. Optimum concentration in this study was 6.5% concentration because it can inhibit the growth of F. oxysporum with an average of 2,84cm ± 0,30 dimater colonies and the percentage inhibition is 60%. Key words: Srikaya leaves extract; Annona squamosa; controlling the fungus Fusarium oxysporum .
PENDAHULUAN Jamur Fusarium merupakan jamur yang tersebar luas baik pada tanaman maupun dalam tanah. Jamur Fusarium ini juga dapat menyebabkan penyakit pada tanaman, yang disebut sebagai penyakit layu Fusarium (Juanda, 2009). Jamur Fusarium oxysporum menyerang berbagai kelompok tanaman seperti tomat, kubis, pisang, kacang, ubi jalar, tembakau, semangka, dan kapas. Selain itu, tanaman hias seperti anyelir, krisan, tulip, bakung, dan pohon seperti mimosa mudah terkena serangan F. oxysporum (Beckman, 1981). Sebagian besar petani Indonesia menggunakan pestisida kimiawi. Upaya tersebut memberikan hasil yang cepat dan efektif.
Kenyataan ini menyebabkan tingkat kepercayaan petani terhadap keampuhan pestisida kimiawi sangat tinggi. Penggunaan pestisida kimiawi yang berlebihan memberi dampak negatif terhadap lingkungan dan manusia. Salah satu penyebab terjadinya dampak negatif pestisida terhadap lingkungan ialah adanya residu pestisida di dalam tanah sehingga dapat meracuni organisme nontarget, terbawa sampai ke sumber-sumber air dan meracuni lingkungan sekitar. Residu pestisida pada tanaman dapat terbawa sampai pada mata rantai makanan sehingga dapat meracuni konsumen, baik hewan maupun manusia (Djunaedy, 2009). Penggunaan pestisida kimiawi dapat memberikan dampak negatif sehingga perlu
180
LenteraBio Vol. 2 No. 2, Mei 2013:179–183
upaya untuk mengurangi penggunaannya dan beralih menggunakan biopestisida yang aman bagi lingkungan. Biopestisida yang terbuat dari bahan-bahan alam tidak meracuni tanaman dan mencemari lingkungan. Pemakaian ekstrak bahan alami secara terus-menerus juga diyakini tidak menimbulkan resisten pada hama, seperti yang biasa terjadi pada pestisida kimiawi (Djunaedy, 2009). Daun srikaya dapat digunakan sebagai antioksidan, antidiabetik, hepatoprotektif, aktivitas antitumor, dan lain sebagainya. Kandungan senyawa metabolit sekunder pada srikaya ialah glikosida, alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, karbohidrat, protein, senyawa fenolik, pitosterol, dan asam amino. Pada daun srikaya memiliki kandungan senyawa seperti saponin, flavonoid dan tannin, tetapi tidak mengandung senyawa alkaloid (Barve, 2011). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui profil fitokimia dari ekstrak daun srikaya (Annona squamosa), pengaruh pemberian ekstrak daun srikaya terhadap pertumbuhan miselium jamur Fusarium oxysporium dan konsentrasi ekstrak daun srikaya yang optimal dalam menghambat pertumbuhan jamur F. oxysporum secara in vitro.
BAHAN DAN METODE Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikroteknik Universitas Negeri Surabaya sebagai tempat pembuatan ekstrak daun srikaya dan Laboratorium Mikrobiologi Universitas Negeri Surabaya sebagai tempat pengujian ekstrak daun srikaya terhadap jamur F. oxysporum. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari sampai April 2013. Prosedur kerja meliputi pembuatan media PSA, pembuatan ekstrak daun srikaya (Annona squamosa L.), uji profil fitokimia (tanin, saponin, dan flavonoid), membuat konsentrasi ekstrak daun srikaya, sterilisasi ekstrak dan pengujian ekstrak daun srikaya dengan variasi konsentrasi terhadap F. oxysporum pada media PSA. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan satu faktor perlakuan, yakni konsentrasi ekstrak daun srikaya. Ekstrak daun srikaya yang digunakan terdiri dari 5 variasi konsentrasi, yakni 5%, 5,5%, 6%, 6,5%, dan 0% sebagai kontrol. Berdasarkan hasil perhitungan, maka setiap perlakuan diulang 4 kali sehingga diperoleh 20 unit eksperimen. Data yang diperoleh dari penelitian ini selanjutnya di uji
dengan uji normalitas dan dianalisis dengan analisis varian satu arah (ANAVA), kemudian dilanjutkan dengan uji beda nyata terkecil (BNT), bila terdapat perbedaan yang signifikan).
HASIL Hasil uji profil fitokimia dari kandungan ekstrak daun srikaya secara kualitatif, maka diperoleh hasil sebagaimana tercantum di Tabel 1. Tabel 1. Profil fitokimia Ekstrak Daun Srikaya secara kualitatif Kandungan Kimia Ciri-ciri yang Hasil Ekstrak Daun Srikaya Teramati Terbentuk buih Positif Saponin pada bagian atas Berwarna merah Positif Flavonoid di semua bagian Sedikit Positif berwarna biru Tannin pada semua bagian
Pengujian profil fitokimia menunjukkan adanya kandungan flavonoid, saponin, dan tannin di dalam ekstrak daun srikaya. Adanya kandungan flavonoid ditandai dengan perubahan warna merah pada pada ekstrak uji. Munculnya buih yang stabil selama 10 menit pada ekstrak uji menunjukkan bahwa ekstrak positif mengandung saponin, sedangkan adanya kandungan tanin ditandai dengan muncul warna hijau kebiruan pada ekstrak uji. Senyawa metabolit sekunder ini diduga berpengaruh dalam menghambat pertumbuhan miselium jamur F. oxysporum. Hambatan pertumbuhan: hasil penelitian yang telah dilakukan, diperoleh data berupa penghambatan diameter koloni miselium jamur f. oxysporum oleh ekstrak daun srikaya yang diukur dengan satuan (cm). hasil pengukuran diameter koloni miselium jamur f. oxysporum disajikan berupa data dalam bentuk Tabel 2. Hasil uji normalitas menunjukkan bahwa data berdistribusi normal, kemudian dilanjutkan dengan hasil ANAVA pada Tabel 3. yang menunjukkan bahwa pemberian konsentrasi ekstrak daun srikaya dengan konsentrasi 0%, 5%, 5,5%, 6%, dan 6,5% memiliki pengaruh yang signifikan terhadap penghambatan pertumbuhan jamur F. oxysporum. Hal itu diketahui dari nilai FHitung yang lebih besar dari Ftabel yakni 371,371 > 3,06.
Purwita dkk.: Penggunaan ekstrak daun srikaya
181
Tabel 2. Pengaruh konsentrasi ekstrak daun srikaya terhadap diameter koloni miselium jamur F. oxysporum (cm) Konsentrasi ekstrak daun srikaya dalam cawan petri (%)
Diameter koloni miselium jamur F. oxysporum (cm)
Rata-rata (cm)
Persentase penghambatan (%)
I II III IV 0 7,20 6,98 7,33 7,00 7,13 4,95 4,90 4,73 5,15 5 4,93 3,48 3,68 3,65 3,83 5,5 3,66 3,28 3,05 3,10 3,18 6 3,15 3,05 2,98 2,28 3,03 6,5 2,84 Keterangan : Pengamatan koloni jamur F. oxysporum pada akhir masa inkubasi selama 7 hari
0 30 49 56 60
Tabel 3. Hasil statistik analisis varian (ANAVA) satu arah terhadap jamur F. oxysporium F Sumber Db JK KT Hitung Tabel α=0,05 Keragaman 4 54,113 13,528 Perlakuan 371,371 3,06 Error 15 0,639 0,043 Total 19 54,753 -
dengan konsentrasi ekstrak 0% (kontrol) yakni sebesar 7,13 cm (Gambar 1).
Hasil uji ANAVA pada Tabel 2. data berupa hambatan pertumbuhan F. oxysporum yang ditunjukkan dengan ukuran diameter koloni miselia jamur F. oxysporum memiliki nilai signifikan 0,00 < 0,005 yang artinya data hambatan terhadap jamur F. oxysporum signifikan dan dapat dilanjutkan dengan uji lanjutan yaitu Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) dengan taraf kepercayaan 5% (0,05) untuk mengetahui pengaruh beda nyata antar perlakuan (Tabel 4.) Pada hasil uji BNT menunjukkan bahwa ada perbedaan nyata antara kontrol dengan setiap perlakuan yang ditunjukkan dengan notasi yang berbeda. Rata-rata penghambatan pertumbuhan jamur F. oxysporum paling tinggi terdapat pada perlakuan dengan konsentrasi ekstrak 6,5% yakni sebesar 2,84 cm sedangkan rata-rata penghambatan paling rendah pada perlakuan
Tabel 4. Hasil Analisis Uji Beda Nyata Terkecil pada Aktivitas Antifungi Ekstrak Daun Srikaya Terhadap Pertumbuhan Diameter Koloni F. oxysporum.
No 1 2 3 4 5
Konsentrasi (%) 0 5 5,5 6 6,5
Rata-rata diameter koloni (cm) ±SD 7,13±0.14a 4,93±0.15b 3,66±0.12c 3,15±0.09d 2,84±0.30e
Keterangan : notasi (a,b,c,d) merupakan hasil dari uji BNT dengan taraf kepercayaan 5%, apabila notasi uji BNT sama menunjukkan tidak beda nyata dan bila notasi tidak sama menunjukkan perbedaan nyata.
Gambar 1. Diagram batang pengaruh konsentrasi ekstrak daun srikaya terhadap penghambatan diameter koloni miselium jamur F. oxysporum
182
LenteraBio Vol. 2 No. 2, Mei 2013:179–183
PEMBAHASAN Berdasarkan hasil penelitian di atas dapat diketahui bahwa uji profil fitokimia ekstrak herba daun srikaya mampu menghambat pertumbuhan hifa jamur yang dilihat dari diameter koloni miselium jamur F. oxysporum. Hal ini terkait dengan adanya senyawa metabolit sekunder dalam ekstrak daun srikaya seperti saponin, flavonoid, dan tanin. Ketiga senyawa metabolit sekunder tersebut diduga mampu menghambat pertumbuhan diameter koloni miselium jamur jamur F. oxysporum. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun srikaya maka semakin tinggi penghambatan diameter koloni jamur F. oxysporum. Artinya, pada konsentrasi yang tertinggi maka pertumbuhan koloni jamur semakin terhambat. Pada konsentrasi tertinggi yakni 6,5 % dapat menghambat pertumbuhan koloni jamur dengan rata-rata diameter sebesar 2,84 cm dengan persentase penghambatan sebesar 60% sedangkan pada konsentrasi terendah yakni 5% mampu menghambat pertumbuhan koloni jamur dengan rata-rata diameter koloni sebesar 4,93 cm dan persentase penghambatannya 30%. Senyawa metabolit sekunder berupa saponin yang terkandung dalam ekstrak daun srikaya dapat berfungsi sebagai antijamur dengan mekanisme menurunkan tegangan permukaan membran sterol dari dinding sel F. oxysporum. Tegangan permukaan membran yang turun akan mempengaruhi permeabilitas membran dan akan mengakibatkan kestabilan membran terganggu sehingga berdampak pada proses pengangkutan dan biosintesis dinding sel yang akhirnya akan menyebabkan terhambatnya pertumbuhan sel jamur atau bahkan menyebabkan kematian sel (Schweizer dan Oliver, 1999 dalam Susanto, 2007). Senyawa flavonoid yang terkandung dalam ekstrak daun srikaya termasuk golongan fenol yang dapat berfungsi sebagai antifungi. Senyawa fenol bekerja dalam sel terutama mendenaturasi protein sel dan merusak dinding sel jamur (Volk dan Whileer, 1993). Dinding sel yang rusak menyebabkan tidak adanya cadangan energi sehingga menghambat pertumbuhan hifa jamur. Senyawa tanin yang terkandung dalam ekstrak daun srikaya merupakan senyawa turunan fenol yang bersifat lipofilik sehingga mudah terikat pada dinding sel dan mengakibatkan kerusakan dinding sel. Selain itu tanin dapat menghambat sintesis kitin yang merupakan komponen penting dinding sel jamur. Terhambatnya sintesis kitin menyebabkan
pertumbuhan hifa jamur juga akan terhambat (Susanto, 2007). Penelitian yang dilakukan oleh Susanto (2007), memberikan hasil bahwa ekstrak biji srikaya yang juga mengandung senyawa saponin, flavonoid, dan tanin dapat menghambat pertumbuhan koloni jamur Beauveria bassiana. Pada penelitian tersebut, ekstrak biji srikaya dapat menghambat pertumbuhan koloni dengan ratarata diameter koloni paling kecil yakni sebesar 6,33 mm pada konsentrasi 10%, sedangakan ekstrak daun srikaya dapat menghambat pertumbuhan koloni F. oxysporum dengan ratarata diameter koloni paling kecil yakni 2,84 cm pada konsentrasi 6,5%. Berdasarkan penelitian Wati (2012) juga memberikan hasil bahwa flavonoid yang merupakan salah satu senyawa yang terkandung dalam filtrat daun alang-alang mampu menghambat pertumbuhan jamur Trichoderma sp. sebesar 1,585 cm2 pada konsentrasi 40%. Penelitian lain yang dilakukan oleh Siahaan (2012) juga menunjukkan bahwa senyawa tanin yang terkandung dalam ekstrak urang aring dapat menghambat pertumbuhan jamur F. oxysporum f. Licopersici sebesar 0,81mm pada konsentrasi 2,5%. Menurut penelitian yang dilakukan oleh Zulaicha (2011), senyawa tanin, flavonoid, dan fenol dari ekstrak daun sirsak dapat menghambat pertumbuhan jamur F. oxysporum sebesar 32,5 mm pada konsentrasi 5%. Pada penelitian ini dengan menggunakan ekstrak daun srikaya yang juga mengandung senyawa tanin, flavonoid, dan saponin yang dapat menghambat pertumbuhan jamur yakni F. oxysporum secara optimal pada konsentrasi 6,5% sebesar 2,84 cm. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penggunaan ekstrak daun srikaya dapat menghambat pertumbuhan F. oxysporum secara optimal pada konsentrasi ekstrak daun srikaya sebesar 6,5% dengan rata-rata pertumbuhan diameter koloni sebesar 2,84 cm dan persentase penghambatannya sebesar 60%. SIMPULAN Berdasarkan penelitian ekstrak daun srikaya terhadap pertumbuhan jamur F. oxysporum, dapat disimpulkan bahwa berdasarkan hasil profil fitokimia ekstrak daun srikaya menunjukkan bahwa senyawa saponin, flavonoid, dan tanin terkandung di dalam ekstrak. Ekstrak daun srikaya dapat menghambat pertumbuhan diameter miselium jamur F. oxysporum. Ekstrak
Purwita dkk.: Penggunaan ekstrak daun srikaya
183
daun srikaya dapat menghambat pertumbuhan diameter miselium jamur F. oxysporum secara optimal pada konsentrasi 6,5%.
DAFTAR PUSTAKA Barve D & Pandey N, 2011. “Phytochemical and Pharmacological Review on Annona squamosa Linn”. International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences. Vol. 2(4). Beckman C H, Bell A A, & Mace M E, 1981. Fungal Wilt Diseases of Plants. London: Academic Press Djunaedy A, 2009. Biopestisida sebagai Pengendali Organisme Pengganggu Tanaman (OPT) yang Ramah Lingkungan. (Online). Diakses melalui http://pertanian.trunojoyo.ac.id/wpcontent/uplo ads/2012/03/9JUNED-EMBRYO-1.pdf pada 24 Maret 2012 Juanda I F, 2009. Potensi Rhozobakteria Sebagai Agen Biofungisida Untuk Pengendalian Jamur Fitopatogen Fusarium sp. (online). Diakses melalui http://www.beswandjarum.com/article_downloa d_pdf/article_pdf_21.pdf pada 26 Februari 2012 Miftakhurohmah & Rita N, 2010. “Efektivitas Ekstrak Metanol Daun Salam (Eugenia Polyantha) Dan Daun Jeruk Purut (Cytrus Histrix) Sebagai Antijamur Pada Pertumbuhan Fusarium Oxysporum”. Jurnal Littri. Vol 16(1)
Siahaan P, 2012. Pengaruh Ekstrak Urang Aring (Eclipta alba L. Hask.) terhadap Pertumbuhan Jamur Fusarium oxysporum f. lycopersici (Sacc.) Snyder & Hans. (online). Diakeses melalui http://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=ekstr ak+daun+saponin,+tanin,+flavonoid+terhadap+ja mur+fusarium&source=web&cd=1&cad=rja&ved =0CCoQFjAA&url=http://ejournal.unsrat.ac.id/i ndex.php/bioslogos/article/download/377/300& ei=rGicUfJDcTtrAfojYCYAQ&usg=AFQjCNEASG XSRk679Xcl7Nfb3s1VYyGA4w&bvm=bv.4675178 0,d.bmk pada 21 mei 2013 Susanto Heri, 2007. Pengaruh Insektisida Nabati Terhadap Viabilitas Jamur Entomopatogen Beauveria bassiana Bals. Skripsi. Malang : Universitas Islam Negeri Malang Volk dan Wheeler, 1988. Mikrobiologi Dasar Edisi Kelima. Jakarta: Erlangga. Wati D K, 2012. Pengaruh Pemberian Filtrat Daun Alang-Alang (Imperata cylindrica L.) terhadap Pertumbuhan Miselium Jamur Trichoderma Sp. yang Hidup pada Media Tanam Jamur Tiram Putih (Pleurotus ostreatus) Zulaicha Siti, 2010. Penggunaan Ekstrak Daun Sirsak (Annona Muricata Linn.) Sebagai Pengendali Jamur Fusarium oxysporum secara in vitro. Skripsi. Surabaya: Universitas Negeri Surabaya
