METABOLISME LEMAK AYAM BROILER YANG DIBERI PAKAN BERBASIS KARBOHIDRAT ATAU LEMAK YANG DISUPLEMENTASI VITAMIN E DAN VITAMIN C MELALUI AIR MINUM
WIRA WISNU WARDANI
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012
PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN SUMBER INFORMASI Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis Metabolisme lemak ayam broiler yang diberi pakan berbasis karbohidrat atau lemak yang disuplementasi vitamin E dan vitamin C melalui air minum adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalm teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir dari tesis ini
Bogor, Agustus 2012
Wira Wisnu Wardani NIM. D152100091
ABSTRACT WIRA WISNU WARDANI. Lipid metabolism of broiler chickens fed carbohydrate or fat based supplemented with vitamin E and vitamin C through drinking water. Under the supervision KOMANG G WIRYAWAN and SUMIATI. Indonesia as a tropical country potentially lead to a less comfortable conditions for the production of broiler chickens. Stress conditions can stimulate cell membrane and tissue damage, so it can give a negative impact on the chickens, for example the liver. It is necessary to neutralize (antioxidants) lipid peroxidation and detoxification of toxic metabolic products in an effort to maintain or increase fat metabolism in the liver. Objectives of thus research were to evaluate the vitamin E and C supplementation through drinking water to overcome the existence of free radicals and lipid metabolism in the body. Research used the 160 male Ross broiler strain with weight of 38 ± 2 g with a brand CP 707 (Ross strain). For the first week, the broiler chickens were fed a commercial starter of PT Charoen Pokphand Indonesia, then followed by two types feed namely carbohydrate-based (PC) and fat-based (PL) rations, depend of fat level content in the feed. Vitamin C was given at 60 mg/l of drinking water and vitamin E at 8 mg/l of drinking water of PT Trouw Nutrition Indonesia. Data collection were done for 21 days after the age of 8-28 days with 4 combination treatments, 4 replicates and 10 chickens per replicate. Research using factorial completely randomized design (CRD factorial). The data were analyzed using ANOVA followed by orthogonal contrast test. The data obtained were tested using the General Linear Model procedure using SAS software version 9.1. Some aspects analyzed are the malonaldehid (MDA), blood profile, blood chemistry, apparent metabolize energy, nitrogen retention, fat retention and broiler performance. The results showed that blood profile, blood chemistry, malonaldehid (MDA), relative liver weights and body weight gain were not affected (P > 0.05) due to the treatments. On the other hand total cholesterol (P < 0.01) and HDL cholesterol (P < 0.05) were significantly affected by the treatments. Feed intake and feed conversion ratio significantly different (P < 0.01) caused by interaction of vitamin supplementation through drinking water with fat based rations. In conclusion , fat based rations is more profitable (IOFC) and improve feed conversion ratio of broiler chickens during heat stress when supplemented with vitamin E and vitamin C through drinking water. Key words: broiler chicken, carbohydrates, lipid, vitamin C, vitamin E.
RINGKASAN WIRA WISNU WARDANI. Metabolisme lemak ayam broiler yang diberi pakan berbasis karbohidrat atau lemak yang disuplementasi vitamin E dan vitamin C melalui air. Dibimbing oleh KOMANG G WIRYAWAN dan SUMIATI
Indonesia sebagai salah satu negara tropis memiliki suhu rata-rata siang hari diatas 30 0C dan kelembaban berkisar diantara 60 – 90% dan berpeluang menyebabkan kondisi yang kurang nyaman untuk produksi ayam broiler. Kondisi stress dapat merangsang kerusakan membran sel dan jaringan tubuh sehingga bisa berdampak negatif pada ayam, contohnya hati. Untuk itu perlu dilakukan netralisasi (antioksidasi) peroksidasi lemak yang ada didalam tubuh dan produk metabolisme yang berasal dari proses detoksifikasi racun sebagai usaha menjaga atau meningkatkan metabolisme lemak yang terjadi di hati. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui manfaat suplementasi vitamin E dan C melalui air minum dalam mengatasi radikal bebas dan pengaruhnya terhadap metabolisme lemak di dalam tubuh pada ayam broiler yang menggunakan ransum berbasis karbohidrat atau lemak sebagai sumber energi. Penelitan menggunakan ayam broiler jantan strain Ross sebanyak 160 ekor berbobot 38 ± 2 g dengan merk CP 707 (strain Ross). Satu minggu pertama ayam diberikan ransum broiler starter komersial yang berasal PT Charoen Pokphand Indonesia, kemudian selama proses penelitian berlangsung menggunakan ransum berbasis karbohidrat (PC) dan lemak (PL) sebagai sumber energi yang dibedakan berdasarkan kandungan lemak kasar dalam ransum. Pemberian vitamin C sebesar 60 mg/l air minum dan vitamin E sebesar 8 mg/l yang didapat dari PT Trouw Nutrition Indonesia. Penelitian selama 21 hari saat ayam berumur 8 - 28 hari yang dibagi menjadi 4 perlakuan, 4 ulangan dan berjumlah 10 ekor setiap ulangan. Proses pemberian ransum dilakukan pada pagi dan sore hari. Suplementasi vitamin diberikan pada jam 09.00 – 15.00 WIB dan diganti setiap 3 jam sekali. Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap faktorial (RAL Faktorial) dengan faktor utama sumber energi ransum dan suplementasi vitamin sebagai faktor penunjang. Hasil yang didapatkan dianalisis dengan ANOVA dilanjutkan dengan uji kontras orthogonal jika ada perbedaan. Data yang didapatkan diuji menggunakan prosedur General Linier Model menggunakan software SAS versi 9.1. Parameter yang diukur meliputi nilai malonaldehid (MDA), profil darah, kimia darah, energi metabolis semu, retensi nitrogen, retensi lemak dan penampilan ayam broiler. Hasil uji statistik profil darah, kimia darah, nilai malonaldehid (MDA), bobot relatif organ hati, total konsumsi air minum, dan pertambahan bobot badan menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (P > 0.05) baik untuk perlakuan ransum atau suplementasi vitamin melalui air minum. Sedangkan uji komponen total kolesterol (P < 0.01) dan HDL kolesterol (P<0.05) berbeda disebabkan oleh perbedaan sumber energi ransum. Konsumsi pakan dan konversi ransum berbeda sangat nyata (P < 0.01) disebabkan oleh adanya interaksi suplementasi vitamin melalui air minum dengan ransum yang diberikan. Kesimpulan penelitian ini adalah ransum berbasis lemak (PL) memberikan nilai ekonomis (IOFC) yang lebih baik dan dapat memperbaiki konversi
ransum ayam broiler yang dipelihara pada lingkungan yang kurang nyaman ketika diberi suplementasi vitamin E dan C melalui air minum. Kata kunci : ayam broiler, karbohidrat, lemak, vitamin C, vitamin E
© Hak Cipta Milik IPB, tahun 2012
Hak Cipta dilindungi Undang-Undang Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB. Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh Karya tulis dalam bentuk apapun tanpa izin IPB.
METABOLISME LEMAK AYAM BROILER YANG DIBERI PAKAN BERBASIS KARBOHIDRAT ATAU LEMAK YANG DISUPLEMENTASI VITAMIN E DAN VITAMIN C MELALUI AIR MINUM
WIRA WISNU WARDANI
Tesis Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada Program Studi Ilmu Nutrisi dan Pakan
SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2012
Penguji Luar Komisi pada Ujian Tesis : Prof. Dr. Ir. Nahrowi, M.Sc
HALAMAN PENGESAHAN Judul Tesis
: Metabolisme lemak ayam broiler yang diberi pakan berbasis karbohidrat atau lemak yang disuplementasi vitamin E dan vitamin C melalui air minum.
Nama
: Wira Wisnu Wardani
NIM
: D152100091
Program Studi/Mayor : Ilmu Nutrisi dan Pakan
Disetujui Komisi Pembimbing
Prof. Dr. Ir. Komang G. Wiryawan Ketua
Dr. Ir. Sumiati, M.Sc Anggota
Diketahui Ketua Departemen Ilmu Nutrisi dan Pakan
Dekan Sekolah Pascasarjana IPB
Dr. Ir. Idat Galih Permana, M.Sc.Agr
Dr. Ir. Dahrul Syah, M.Sc.Agr
Tanggal Ujian : 27 Juli 2012
Tanggal Lulus :
PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karuniaNya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Sholawat serta salam penulis haturkan kepada Rosulullah SAW. Penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. Ir. Komang G. Wiryawan dan Dr. Ir. Sumiati, M.Sc selaku pembimbing yang telah memberikan banyak masukan selama penelitian dan penulisan tesis ini. Terima kasih kepada Prof. Dr. Ir. Nahrowi, M.Sc yang telah bersedia menjadi penguji pada ujian tesis. Terima kasih kepada civitas akademika Fakultas Peternakan IPB yang telah banyak memberikan saran dan masukan selama penulis sekolah di IPB. Di samping itu penulis ucapkan terima kasih kepada ayah, ibu, mertua, istri tercinta (Tutut), kedua buah hati tercinta (Fawwaz dan Farras) dan seluruh keluarga atas segala doa dan kasih sayangnya. Kepada Alivan, Febri dan Nikita (INMT 45) atas semangatnya selama penelitian ini berlangsung. Kepada pimpinan dan rekan-rekan PT Trouw Nutrition Indonesia yang telah banyak memberikan inspirasi kepada penulis dan rekan-rekan bisnis peternakan di Indonesia yang pantang menyerah dalam memenuhi kebutuhan protein bangsa Indonesia tercinta. Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor,
Agustus 2012
Wira Wisnu Wardani
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 26 Oktober 1982 dari pasangan Bapak Wibowo Witono dan Ibu Pawiti. Penulis merupakan anak pertama dari tiga bersaudara. Penulis menikah dengan Tutut Bina Sulistiyowati dan sudah memiliki dua orang putra. Tahun 2000 penulis lulus dari SMU Perguruan Rakyat 2 Jakarta dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur UMPTN. Penulis memilih mayor Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak, Fakultas Peternakan yang berhasil ditamatkan pada tahun 2004. Pada tahun 2010 diterima di program pascasarjana IPB dengan memilih mayor Ilmu Nutrisi dan Pakan. Penulis bekerja sebagai Technical Associate di PT Trouw Nutrition Indonesia sejak tahun 2007 sampai dengan saat ini, sebagai Formulator dan Quality Assurance PT Dipasena Feedmill pada tahun tahun 2006 - 2007, Formulator PT Sierad Feedmill pada tahun 2005 – 2006 dan Quality Control PT Metro Feedmill pada tahun 2004.
DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL ............................................................................................... xxi DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................
xxiii
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................
xxv
PENDAHULUAN....... ........................................................................................ Latar Belakang ............................................................................................. Tujuan ................ ......................................................................................... Hipotesis ......................................................................................................
1 1 3 3
TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................
5 5
Karbohidrat atau Lemak sebagai Sumber Energi ........................................ Stres pada Ayam Broiler .............................................................................. Mekanisme Stres Oksidatif .......................................................................... Lemak, Asam Lemak dan kolesterol ........................................................ Biosintesis Kolesterol .................................................................................. Lipid Peroksida ............................................................................................ Darah ............................................................................................................ SGOT dan SGPT .......................................................................................... Sistem Kekebalan (Immune) Tubuh ............................................................ Suplementasi Vitamin pada Ayam sebagai Antioksidan ............................
6 7 9 12 15 17 20 21 22 BAHAN DAN METODE .................................................................................... 27 Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................................... 27 Bahan dan Alat .............................................................................................. 27 Metode Penelitian ......................................................................................... 30 HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................... Suhu dan Kelembaban Lingkungan Pemeliharaan ………………………… Stabilitas Vitamin C dalam Air ….…………………………………………. Energi Metabolis dan Retensi Nutrisi ……………………………………… Profil Darah Ayam Broiler …………………………………………………. Profile Organ Hati dan Kualitas Karkas Ayam Broiler ……………………. Penampilan Ayam Broiler …………………………………………………. Income Over Feed and Chick Cost (IOFC) ...................................................
39 39 41 42 44 49 51 57
KESIMPULAN DAN SARAN............................................................................ Kesimpulan .................................................................................................... Saran ..............................................................................................................
56 56 56
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... LAMPIRAN ........................................................................................................
57 63
xix
DAFTAR TABEL Tabel 1
Halaman Pengelompokan jenis vitamin................................................................. 22
Tabel 2
Komposisi ransum penelitian (umur 8 – 33 hari).................................... 28
Tabel 3
Perlakuan penelitian................................................................................
Tabel 4
Nilai energi metabolis semu terkoreksi nitrogen (EMSn), retensi 43 nitrogen dan retensi lemak ayam broiler umur 33 hari ……………......
Tabel 5
Profil komponen darah ayam broiler umur 33 hari ..…………………..
45
Tabel 6
Hasil uji kimia darah ayam broiler..........................................................
46
Tabel 7
Nilai malonaldehid (MDA) dan bobot relatif organ hati ayam broiler ..
50
Tabel 8
Persentase dan kualitas karkas ayam broiler ………………………….
50
Tabel 9
Penampilan ayam broiler (8 – 28 hari) ………………………………..
51
Tabel 10
Temperatur dan nilai amper mesin pellet serta nilai kualitas fisik 56 ransum ....................................................................................................
Tabel 11
Income over feed and chick cost (IOFC) ransum penelitian ..................
xxi
37
57
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1
Partisi energi pada unggas, A (konstan) dan B (dinamis) (Latshaw & Moritz 2009) ..............................................................
5
Gambar 2
Hubungan lingkungan dengan produksi ternak (Hafez 1968) .......
8
Gambar 3
Rumus molekul kolesterol (Lehninger 2005) ................................
10
Gambar 4
Proses biosintesis kolesterol dalam 4 tahap (Lehninger 2004) ......
12
Gambar 5
Mekanisme peroksida lipid ............................................................
15
Gambar 6
Reaksi TBA dengan MDA ............................................................. 16
Gambar 7
Mekanisme kerja vitamin C sebagai antioksidan (Lehninger 2005) ............................................................................................. Regenerasi vitamin E (α-tokoferol) (Gropper et al. 2009) ..........
Gambar 8
23 24
Gambar 9
Interaksi antara beberapa antioksidan untuk mencegah kerusakan sel (Gropper et al. 2009) …………………..……………………..
26
Gambar 10
Kandang penelitian .......................................................................
27
Gambar 11
Proses produksi ransum di Putri Gunung Farm Feedmill .............. 29
Gambar 12
Roche Cobas Mira plus chemical analyzer ....................................
Gambar 13
Sysmex KX-21 ............................................................................... 35
Gambar 14
Rataan suhu (oC) kandang penelitian dan referensi Ross …….....
39
Gambar 15
Nilai suhu siang hari (oC) kandang penelitian dan referensi Ross
40
Gambar 16
Stabilitas vitamin C dalam air ........................................................ 42
Gambar 17
Bentuk dan fraksi lipoprotein (Gropper et al. 2009) .....................
xxiii
34
48
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1
Halaman Foto – foto pelaksanaan penelitian …………………………. 67
Lampiran 2
Kurva standar MDA ...............................................................
70
Lampiran 3
Analisis ragam pertambahan bobot badan …………………..
71
Lampiran 4
Analisis ragam konversi pakan ………….…………………..
71
Lampiran 5
Analisis ragam hemoglobin .………….…………………......
71
Lampiran 6
Analisis ragam hematokrit ………….…………………….....
72
Lampiran 7
Analisis ragam eritrosit ………………….…………………..
72
Lampiran 8
Analisis ragam SGPT …………...……….………………….. 72
Lampiran 9
Analisis ragam trigliserida ……………....…………………..
72
Lampiran 10
Analisis ragam total kolesterol ………….…………………..
73
Lampiran 11
Analisis ragam HDL kolesterol …...…….…………………..
73
Lampiran 12
Analisis ragam LDL kolesterol ………….………………….. 73
Lampiran 13
Analisis ragam MDA hati ……………….…………………..
74
Lampiran 14
Analisis ragam kolesterol daging ayam ……………………..
74
Lampiran 15 Lampiran 16
Analisis ragam MDA karkas …………….………………….. 74 Analisis ragam % bobot hati …………….…………………..
xxv
74
PENDAHULUAN
Latar Belakang Ayam broiler optimal diproduksi pada wilayah sub tropis atau berada pada kisaran suhu 20 - 25 oC dengan kelembaban udara berkisar 60 -70% (Ross 2009). Pada minggu pertama broiler memerlukan suhu yang lebih hangat dibanding dengan minggu-minggu berikutnya. Semakin tua umur ayam maka suhu lingkungan yang dibutuhkan semakin rendah atau sejuk untuk membantu proses pelepasan panas dalam tubuh akibat adanya usaha menyeimbangkan suhu tubuh dan lingkungan melalui mekanisme evaporasi yang ditandai dengan peningkatan gerakan bernafas (panting). Indonesia sebagai salah satu negara tropis memiliki suhu rata-rata siang hari diatas 30 0C dan kelembaban berkisar diantara 60 – 90% (BMKG 2010), hal ini berpeluang menyebabkan ayam kesulitan untuk melepaskan panas yang dihasilkan selama proses metabolisme dalam tubuh dan terus meningkat seiring dengan bertambahnya umur ayam. Cekaman panas ini bisa menyebabkan gangguan pertumbuhan, penurunan nafsu makan, menurunnya kecernaan zat nutrisi, penurunan sistem kekebalan tubuh bahkan sampai dengan peningkatan angka kematian ternak (Sugito et al. 2007; Mashaly et al. 2004; Mckee et al. 1997), meningkatnya laju pernafasan yang menyebabkan kadar CO2 dalam darah menurun (alkalosis) dan terjadinya perubahan keseimbangan asam basa darah (Borges et al. 2003b). Kondisi
stress
memacu
pelepasan
hormon
kortikosteron,
hormon
katekolamin dan memacu level peroksidasi lemak yang bisa merangsang kerusakan membran sel dan jaringan tubuh sehingga bisa berdampak negatif pada ayam. Peroksidasi lemak juga mempengaruhi kualitas lemak yang ada dalam daging dan telur sehingga lebih mudah rusak dan memperpendek umur penyimpanan. Jenis dan komposisi asam lemak (jenuh dan tidak jenuh) ransum akan mempengaruhi kecepatan metabolisme energi, jumlah peroksidasi lemak yang dihasilkan dan jumlah lemak yang bisa dideposit dalam daging atau telur. Hasil metabolisme lemak akan menghasilkan asam lemak yang akan
1
2
dioksidasikan menjadi gliserol untuk biosintesis atau oksidasi trigliserida menjadi acetyl CoA (Drackley 2000). Ransum berbasis karbohidrat sebagai sumber energi akan menghasilkan panas di dalam tubuh yang lebih tinggi dibanding dengan ransum berbasis lemak, hal ini dikarenakan karbohidrat tergolong sumber energi yang mudah digunakan akan tetapi tidak sebaik lemak dari nilai energi metabolis per satuan unit. Karbohidrat merupakan sumber energi yang biasa digunakan pada ayam broiler dengan sumber utamanya berasal dari jagung, dedak dan biji-bijian lainnya. Meningkatnya harga biji-bijian di level lokal dan internasional memaksa ahli nutrisi ransum untuk mencari sumber-sumber energi yang optimal, lebih efisien dan berkesinambungan dalam hal ketersediannya. Salah satu sumber energi yang perlu menjadi pertimbangan ialah lemak.. Proses metabolisme energi yang berasal dari lemak akan menghasilkan sejumlah senyawa peroksida (radikal bebas) yang bisa bersifat merusak sel-sel tubuh dan bisa mempengaruhi metabolisme nutrisi pada tingkat sel dan jaringan. Senyawa radikal bebas akan meningkat lebih banyak ketika kondisi ayam stres, karena pada kondisi stres tubuh ayam tidak bisa mensitesa asam askorbat (vitamin C) yang bisa menetralisir senyawa-senyawa radikal bebas. Senyawa-senyawa radikal bebas ini akan merusak dinding sel yang ada di dalam tubuh terutama pada organ-organ yang berperan dalam sistem metabolisme tubuh. Hati merupakan salah satu organ yang berperan cukup kompleks dalam proses metabolisme zat-zat nutrisi di dalam tubuh. Organ hati berkaitan dengan metabolisme lemak, protein, karbohidrat, proses detoksifikasi serta metabolisme vitamin-vitamin larut lemak seperti vitamin A, D3, E dan K. Organ hati akan memproduksi garam-garam empedu yang akan berperan dalam emulsifikasi lemak agar lebih mudah untuk dimetabolisme. Metabolisme lemak akan mempengaruhi jumlah energi, senyawa radikal bebas, komposisi trigliserida, kolesterol dan asam lemak di dalam darah atau jaringan tubuh. Usaha untuk menjaga kesehatan organ hati sangat diperlukan agar proses metabolisme zat-zat nutrisi dan penampilan ayam broiler ketika panen menjadi optimal. Untuk itu pada penelitian ini akan dilihat pengaruh sumber energi yang berbeda pada ayam broiler yang diberi suplementasi vitamin E dan C melalui air
3
minum terhadap status radikal bebas, profil organ hati, dan penampilan ayam broiler selama 4 minggu pemeliharaan.
Tujuan Penelitian ini bertujuan untuk mengamati manfaat suplementasi vitamin E dan C melalui air minum pada ayam broiler yang diberi ransum berbasis karbohidrat atau lemak.
Hipotesis Hipotesis dari penelitian ini ialah : 1. Pemberian karbohidrat dan lemak sebagai sumber energi berpengaruh terhadap kinerja hati, status radikal bebas dan penampilan ayam broiler 2. Suplementasi vitamin E dan vitamin C pada ayam broiler dapat memperbaiki kinerja hati, status radikal bebas dan penampilan ayam broiler 3. Adanya interaksi antara perbedaan sumber energi ransum berbasis karbohidrat dan lemak dengan suplementasi vitamin E dan vitamin C pada ayam broiler dapat memperbaiki kinerja hati, status radikal bebas dan penampilan ayam broiler.
4
TINJAUAN PUSTAKA
Karbohidrat atau Lemak sebagai Sumber Energi Energi merupakan faktor pembatas pertama dalam manajemen nutrisi ayam broiler yang akan mempengaruhi jumlah ransum yang dikonsumsi. Energi dalam ransum dapat berasal dari karbohidrat, protein atau lemak yang dimetabolisme di dalam tubuh. Energi metabolis itu sendiri diartikan sebagai total energi ransum bahan dikurangi dengan kandungan energi yang terbuang dalam ekskreta (pada unggas saluran feses dan urine menjadi satu) serta kandungan energi yang hilang dalam bentuk gas (CO2). Partisi energi pada unggas disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1 Partisi energi pada unggas, A (konstan) dan B (dinamis) (Latshaw & Moritz 2009) Pada unggas, kandungan energi metabolis ransum dapat dinyatakan dengan ada energi metabolis semu (EMS), energi metabolis semu terkoreksi nitrogen (EMSn), energi metabolis murni (EMM) dan energi metabolis murni terkoreksi nitrogen (EMMn). Nilai energi metabolis semu merupakan nilai energi yang belum dikurangi oleh nilai energi endogenus, yaitu energi yang berasal dari peluruhan sel-sel mukosa dan jaringan tubuh
yang didapatkan ketika ayam
dipuasakan. Faktor koreksi terhadap nitrogen perlu diperhitungkan sebagai pertimbangan ketika asam urat yang keluar di dalam ekskreta bisa dioksidasi secara sempurna (Sibbald 1980). Lopez dan Leeson (2008) melaporkan bahwa nilai EMSn ransum berbasis jagung sebesar 95 – 97% EMS dan pada ransum berbasis bungkil kedelai sebesar 88 – 93% EMS.
5
6
Latshaw (2008) mencoba untuk membandingkan sumber energi ransum kaya akan protein, lemak dan serat (karbohidrat) dengan berbasis pada jagung dan bungkil kedele dengan penambahan lemak yang sudah terhidrolisa, terlihat bahwa penambahan lemak sebesar 5% meningkatkan nilai energi metabolis sebesar 10%, penambahan protein sebesar 2% meningkatkan nilai energi metabolis sebesar 4% dan penambahan serat kasar 4% menurunkan nilai energi metabolis sebesar 20%. Sementara itu Plavik et al. (1997) melaporkan bahwa performa ayam yang dipelihara pada suhu 20 oC yang diberikan karbohidrat dan lemak sebagai sumber energi tidak berbeda, termasuk persentase kandungan lemak abdominal dan daging dada.
Stres pada Ayam Broiler Suhu optimal untuk produksi ayam broiler ialah 20 - 25 oC dan kelembaban 60 -70% (Ross 2009). Suhu dan kelembaban lingkungan yang tinggi merupakan kondisi yang membuat ayam tidak nyaman, laju pernafasan meningkat, keseimbangan asam basa darah berubah menjadi lebih basa, lebih rentan terhadap serangan bakteri patogen, metabolisme nutrisi terganggu, pertumbuhan terhambat dan dapat menyebabkan kematian (Sugito et al. 2007; Mashaly et al. 2004; Borges et al. 2003a; Borges et al. 2003b; Mckee et al. 1997). Cekaman panas menyebabkan
energi
untuk
produksi
digunakan
untuk
homeostasis
(keseimbangan tubuh), hal ini biasanya dimulai dengan menurunnya konsumsi ransum, menurunnya laju aliran darah dan berkurangnya energi yang dimetabolisme (Mckee et al. 1997) Puthpongsiriporn et al. (2001) melaporkan bahwa cekaman panas dapat merangsang pelepasan kortikosteron dan katekolamine serta menginisiasi peroksidasi lemak didalam sel membran termasuk sel membran T dan limposit B, yang sangat erat kaitannya dengan sistem kekebalan tubuh. Cekaman panas merangsang radikal bebas yang dapat merusak membran sel dengan cara menginduksi peroksidasi asam lemak tidak jenuh rantai panjang sehingga kekuatan membran sel tersebut menjadi berkurang dan mudah rusak. Asam lemak tak jenuh merupakan salah satu target paling sensitif dari radikal bebas yang dikenal dengan istilah lipid peroksida. Di dalam tubuh, lipid peroksida ini
7
menyebabkan kerusakan sel imun (kekebalan) serta dapat merusak komponen sel seperti lemak, protein, karbohidrat dan DNA. Mekanisme Stres Oksidatif Tingginya suhu lingkungan, selain mengganggu tubuh melalui mekanisme fisiologis, juga dapat merupakan salah satu penyebab terjadinya stres oksidatif yakni kondisi aktivitas oksidan yang melebihi antioksidan. Oksidan atau oksigen reaktif (radikal bebas) adalah molekul yang mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan pada orbit terluarnya (Aruoma 1999; Miller et al. 1993). Menurut Supari (1996), radikal bebas dibentuk melalui 2 cara yakni melalui endogen dan eksogen. Cara endogen diproduksi di dalam sel oleh mitokondria, membran plasma, lisosom, peroksisom, retikulum endoplasma dan inti sel, sebagai respon normal dari peristiwa biokimia dalam tubuh. Cara eksogen diperoleh dari polusi yang berasal dari luar, yang berasal dari tubuh melalui inhalasi, digesti, injeksi dan penyerapan kulit. Radikal
bebas
memungkinan mengambil partikel dari molekul lain kemudian menimbulkan senyawa yang abnormal dan memulai reaksi berantai yang dapat merusak sel-sel dengan menyebabkan perubahan yang mendasar pada materi genetis serta bagian-bagian sel penting lainnya (Yashikawa & Naito 2002) Asam lemak tak jenuh adalah senyawa yang paling sensitif terhadap serangan radikal bebas yang disebut serangan lipid peroksida. Dalam tubuh, terbentuknya lipid peroksida menyebabkan kerusakan sel seperti sel imun, mencetuskan
arteriosklerosis
dan
kanker
serta
dapat
mengakibatkan
penggumpalan darah yang dapat memunculkan stroke dan penyakit jantung koroner (Noda & Wakasugi 2001; Yamada 2001). Peroksidase lipid dapat merusak
lipid
dengan
menghasilkan
malonaldehid
(MDA)
dan
4-
hidroksinonenal. Kedua senyawa tersebut dapat menyebabkan kerusakan pada protein dengan menghasilkan protein karbonil, hidroksileusin, hidrobvalin dan nitrotirosin, sehingga menyebabkan protein mudah mengalami lisis (Supartondo 2002). Kerusakan lainnya terjadi pada DNA dengan hasil 8-oksoguanin dan timin glikol (Yashikawa & Naito 2002) yang menyebabkan mutasi serta penuaan dini (Yakode & Kita 2002).
8
Penelitian Takahashi dan Akiba (1999) membuktikan bahwa pemberian lemak teroksidasi pada ayam broiler, nyata menurunkan konsumsi ransum, pertambahan bobot badan serta konsentrsi vitamin C dan α-tokoferal plasma darah. Hasil tersebut diikuti dengan meningkatnya MDA plasma dan rasio heterofil dan limfosit darah sebagai indeks dari cekaman. Selanjutnya penelitian Taniguchi et al. (1999) membuktikan bahwa stres oksidatif karena pemberian hormon kortison, dapat meningkatkan kandungan lemak abdomen, MDA dan kolesterol plasma ayam broiler. Skema hubungan antara suhu lingkungan dengan produksi ternak disajikan pada Gambar 2. Faktor Lingkungan
Reseptor Cahaya
Stress Oksidatif
Suhu Tubuh
Hipotalamus
Pusat Haus
Pusat Lapar
Minum
Makan
Substrat
Enzim
Peroksidasi Lemak
Sistem Hormon
Pusat Termoregulasi
Lemak & Kolesterol ↑ Sintesis Protein ↓
Kelenjar Endokrin
Tiroid
Adrena
Metabolisme Nutrisi
Produksi
Gambar 2 Hubungan lingkungan dengan produksi ternak (Hafez 1968)
9
Pada Gambar 2 terlihat bahwa suhu lingkungan akan sampai ke tubuh baik melalui reseptor pada kulit maupun melalui pembuluh darah sehingga sampai ke hipotalamus. Suhu lingkungan yang tinggi dapat merangasang pusat haus dan sekresi hormon kortikosteron, sementara pusat lapar dan sekresi thyroid stimulating hormone (TSH) yang berperan dalam sekresi hormon tiroid dihambat, akibat terjadinya penurunan dalam metabolisme, sehingga produksi menjadi turun. Selanjutnya suhu lingkungan yang tinggi dapat meningkatkan radikal bebas baik berasal dari endogen maupun eksogen yang antara lain dapat menyebabkan peroksidasi lipid terutama asam lemak tidak jenuh (ALTJ) serta gangguan metabolisme lainnya seperti terserangnya DNA dan protein dalam sel. Lemak, Asam Lemak dan Kolesterol Lemak terdiri dari campuran asam lemak dan gliserol. Gliserol mempunyai tiga gugus hidroksil yang masing-masing mengikat satu molekul asam lemak yang disebut trigliserida. Asam lemak adalah komponen terbesar dari beberapa lipida kompleks yang mengandung atom C yang sebagian besar umumnya terdapat pada jaringan hewan (Enser 1984). Sifat asam lemak ditentukan oleh komposisi asam lemak, panjang rantai karbon serta posisi ikatan rangkapnya (Girindra 1988). Berdasarkan sifat-sifat tersebut, asam lemak dapat digolongkan ke dalam asam lemak jenuh (tidak mengandung ikatan rangkap) dan asam lemak tak jenuh (mengandung ikatan rangkap). Asam lemak yang mengandung satu ikatan rangkap disebut asam lemak tak jenuh tunggal (mono unsaturated fatty acid) dan asam lemak yang mengandung lebih dari satu ikatan rangkap disebut asam lemak tak jenuh ganda (poly unsaturated fatty acid/ PUFA). Asam lemak jenuh memiliki titik didih yang lebih tinggi daripada asam lemak tidak jenuh dengan jumlah atom karbon yang sama. Disamping itu terdapat istilah penamaan asam lemak dengan omega atau ω yang ditandai dengan posisi ikatan rangkap yang berdekatan dengan gugus metil (CH3). Asam linolenat (ω -3) adalah asam lemak yang memiliki posisi ikatan rangkap pada rantai ketiga dari gugus metil (CH3). Asam lemak linoleat (ω -6) dan oleat (ω -9) masing-masing memiliki ikatan rangkap berjarak 6 dan 9 rantai dari gusus metil (CH3). Komposisi asam lemak daging dipengaruhi oleh komposisi asam lemak ransum disamping umur dan bangsa ternak, terutama pada ternak monogastrik.
10
Pada ternak monogastrik pemberian ransum dengan kandungan lemak jenuh tinggi akan mengakibatkan kandungan lemak jenuh daging menjadi lebih tinggi. Penurunan lemak kemungkinan sejalan dengan penurunan komposisi asam lemak karena kecepatan penimbunan sangat berpengaruh terhadap komposisi asam lemak ransum (Girindra 1988). Kolesterol adalah sterol terpenting dari organ hewan, dan menyusun 17% bahan kering otak (Tillman et al. 1991), serta terdapat dalam semua sel hewan, sehingga tersebar luas dalam tubuh dan terdapat dalam darah serta cairan empedu. Kolesterol mempunyai rumus molekul C27H45OH dan dapat dinyatakan sebagai 3 hidroksi-5,6 kolesten, karena mempunyai satu gugus hidroksil pada atom C3 dan ikatan rangkap pada atom C5 dan C6 serta percabangan pada C10 C13 C17 (Mayes 1995). Rumus molekul kolesterol disajikan pada Gambar 3.
Gambar 3 Rumus molekul kolesterol (Lehninger 2005) Menurut Sitepoe (1992) kolesterol diklasifikasikan ke dalam lipida berkomponen alkohol steroid yang sebagian besar berfungsi sebagai penghasil kalori serta memberikan nilai tambah terhadap cita rasa makanan. Fungsi kolesterol dalam tubuh adalah sebagai prekusor pembentuk asam empedu oleh hati, yang merupakan rute utama untuk katabolisme kolesterol; untuk pembentukan hormon-hormon steroid seperti glukokortikosteroid dan aldosteron dalam gonad dan beberapa jaringan lainnya; dan untuk pembentukan vitamin D yang merupakan satu-satunya vitamin yang disintesis oleh tubuh dan tidak dibutuhkan dalam makanan. Herman (1991) menyatakan bahwa kolesterol berfungsi untuk membantu sel saraf dalam menjalankan fungsinya dimana tanpa kolesterol koordinasi gerak tubuh dan kemampuan berbicara akan terganggu.
11
Kolesterol dalam tubuh berupa kolesterol eksogen dan kolesterol endogen (Fransdson 1992). Kolesterol eksogen masuk ke dalam tubuh berasal dari makanan dan sebaliknya kolesterol endogen dibentuk sendiri oleh sel-sel tubuh, terutama di dalam hati. Di dalam tubuh tidak dapat dibedakan antara kolesterol yang berasal dari sintesis dalam tubuh dan kolesterol yang berasal dari makanan. Jika jumlah kolesterol dari makanan kurang, maka sintesis kolesterol di dalam hati dan usus meningkat untuk memenuhi kebutuhan jaringan dan organ lain. Sebaliknya jika jumlah kolesterol di dalam makanan meningkat maka sintesis kolesterol di dalam hati dan usus menurun (Muchtadi et al. 1993) Kolesterol dalam darah berasal dari usus atau diproduksi oleh jaringan tubuh dari asetat dan ditemui pada semua fraksi lipid darah. Piliang dan Djojosoebagio (2002) melaporkan bahwa peningkatan kadar kolesterol dalam serum disebabkan oleh terganggunya mekanisme dalam pengubahan kolesterol menjadi asam empedu, dan Girindra (1988) menyatakan kadar kolesterol plasma akan naik jika makan banyak kolesterol, obstruksi duktus empedu, fungsi usus terganggu dan diabetes melitus. Tingginya masukan lemak jenuh, rendahnya perbandingan lemak tak jenuh dan tingginya masukan kolesterol dalam darah juga akan meningkatkan kolesterol dalam darah Herman (1991). Kolesterol berhubungan erat dengan aterosklerosis, suatu keadaan di mana kolesterol dan lipida yang lain masuk ke dinding pembuluh darah bagian dalam (Frandson 1992). Lebih lanjut dikatakan bahwa aterosklerosis berkaitan dengan makanan yang tinggi kadar kolesterolnya dan lemak yang jenuh. Tillman et al. (1991) menyatakan bahwa aterosklerosis ditandai oleh penumpukan (deposisi) ester kolesteril dan lipida lain dalam jaringan ikat dinding arteri, sehingga akan menyebabkan penggumpalan dan dinding arteri dapat menebal serta pada keadaan parah menyebabkan serangan jantung. Beyne (1980) menyatakan bahwa jumlah kolesterol dalam tubuh tergantung pada keadaan individu, dalam masa pertumbuhan atau tidak. Jumlah kolesterol bervariasi baik untuk setiap individu maupun pada setiap organ tubuh. Mekanisme pengaturan kolesterol di dalam tubuh hewan pada dasarnya tergantung pada sintesis kolesterol dan eksresi steroid pada feses.
12
Biosintesis Kolesterol Kolesterol disintesis dalam tubuh, terutama oleh sel-sel hati, usus halus dan kelenjar andrenal. (Piliang & Djojosoebagio 2002). Lebih lanjut dikatakan bahwa dengan melalui suatu rangkaian yang rumit, dua karbon fragmen sederhana, yaitu Asetil CoA diubah menjadi 1 atau 2 gram kolesterol setiap hari. Proses biosintesis kolesterol dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4 Proses biosintesis kolesterol dalam 4 tahap (Lehninger 2004) Menurut Lehninger (2005) biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi 4 tahap, yaitu (1) sintesis mevalonat, yaitu suatu senyawa 6 karbon dari asetil-CoA, terbentuk akibat reaksi kondensasi dan reduksi yang berlangsung di dalam
13
mitokondria; (2) Unit isoprenad dibentuk dari mevalonat melalui pelepasan CO2, pada reaksi fosforilasi oleh ATP; (3) enam unit isopropenoid mengadakan kondensasi untuk membentuk senyawa antara skualena; (4) Skualena mengadakan siklisasi untuk menghasilkan senyawa steroid induk yaitu lanosterol, yang berlangsung di dalam retikulum endoplasma; kolesterol dibentuk di dalam membran retikulum endoplasma dari lanosterol setelah melewati sekitar 20 rangkaian reaksi, termasuk migrasi gugus metil dan pelepasan senyawa-senyawa lainnya. Menurut Muchtadi et al. (1993) dari strukturnya dapat diketahui bahwa biosintesis kolesterol akan membutuhkan sumber atom karbon dan daya pereduksi untuk menciptakan ikatan antara atom karbon hidrogen. Daya pereduksi dalam bentuk NADPH dihasilkan hanya oleh enzim yang berasal dari ”hexose monophospate shunt”, yaitu glukosa 6 dehidrogenase dan 6 fosfoglukonat dehidrogenase. Untuk setiap molekul gula yang dioksidasi melalui proses tersebut akan menghasilkan 2 NADPH. Semua atom karbon kolesterol berasal dari asetat. Asetil Ko-A sebagai prekusor asam mevalonat diperoleh dari berbagai sumber, yaitu: proses β-oksidasi asam lemak berantai panjang, oksidasi asam amino ketogenik seperti leusin dan isoleusin, serta reaksi piruvat dehidrogenase yang menghubungkan glikolisis dan siklus krebs. Kolesterol tidak larut dalam sistem larutan, karena itu harus diangkut melalui lipoprotein plasma, yang terdiri atas lemak polar, lesitin, apoprotein spesifik dan kolesterol bebas, serta lipid non polar termasuk kolesterol ester dan trigliserida. Lipoprotein plasma terdiri dari kilomikron, very low density lipoprotein (VLDL), intermediate density lipoprotein (IDL), low density lipoprotein (LDL) dan high density lipoprotein (HDL). Kilomikron dan VLDL yang terbentuk dala mukosa usus diangkut ke dalam limfa dan sekresinya melalui pembuluh darah. Hati juga mensintesis beberapa VLDL. Sekitar 75% dari kolesterol
diesterifikasi dengan asam lemak rantai panjang, kemudian
dihidrolisis dan kolesterol bebas dimanfaatkan oleh sel atau bergabung di dalam membran sel, sedangkan kelebihannya dibuang. Kolesterol yang diekskresikan mengalami siklus ulang ke dalam hati atau diangkut oleh HDL dan ditransfer ke VLDL.
14
Fungsi masing-masing lipoprotein plasma dijelaskan oleh Piliang dan Djojosoebagio (2002). Kilomikron protein dengan densitas terendah mempunyai fungsi untuk mentransport trigliserida dan membawa sebagian kolesterol. VLDL berfungsi sebagai pembawa trigliserida yang dibawa dari hati ke jaringanjaringan lain dalam tubuh, terutama jaringan adiposa untuk disimpan. LDL berfungsi mentransport kolesterol, yaitu lebih dari setengahnya dalam bentuk kolesterol ester. HDL untuk mentransport fosfolipida dan kolesterol ester dari jaringan perifer kembali ke hati untuk diubah menjadi asam empedu. Kolesterol yang tidak diperlukan akan dikeluarkan bersama-sama dengan feses dan lebih kurang setengahnya dalam bentuk hormon-hormon steroid normal. Dijelaskan oleh Muchtadi et al. (1993), jalur utama pembuangan kolesterol dari tubuh adalah melalui konversi oleh hati menjadi asam empedu, yaitu asam kholat dan ”chenodeoxycholic” yang berkaitan dengan glisin atau taurin membentuk garam empedu, kemudian diekskresi di dalam empedu ke dalam duodenum bersama-sama dengan kolesterol bebas. Sebagian besar asam empedu direabsorbsi oleh hati melalui sirkulasi dan selanjutnya diekskresi kembali ke dalam empedu. Asam empedu yang tidak diserap didegradasi oleh mikroba usus besar dan diekskresikan ke dalam feses. Kebutuhan pasti akan kolesterol tubuh belum diketahui. Tetapi para ahli sependapat bahwa meskipun dalam bentuk sedikit saja kolesterol disintesis oleh tubuh telah lebih dari cukup untuk memenuhi kebutuhan tubuh. Menurut Herman (1991), kadar kolesterol di dalam darah menentukan besar kecilnya resiko terkena penyakit kardiovaskular. Peningkatan kadar kolesterol dalam darah dihubungkan dengan terjadinya artherosklerosis (Piliang & Djojosoebagio 2002; Tillman et al. 1991), dimana terjadinya penimbunan bahan-bahan yang mengandung kolesterol pada dinding pembuluh darah sehingga menyebabkan penggumpalan. Selanjutnya dinding pembuluh darah arteri dapat menebal dan dalam keadaan parah dapat menyebabkan serangan jantung. Peningkatan kadar kolesterol dalam serum darah dapat disebabkan oleh terganggunya mekanisme pengubahan kolesterol menjadi asam empedu.
15
Lipid Peroksida Lipid Peroksida merupakan hasil peroksidasi lipid, yaitu adalah reaksi yang terjadi antara radikal bebas dengan PUFA (polyunsaturated fatty acid) yang mengandung sedikitnya tiga ikatan rangkap. Reaksi ini diakibatkan oleh radikal bebas, yaitu suatu atom atau molekul yang memiliki satu atau lebih elektron tidak berpasangan dan sangat reaktif (Halliwell & Guteridge 1989). Peroksidasi lipid dimulai dengan pemisahan sebuah atom hidrogen oleh radikal bebas dari suatu grup metilena (-CH2-) PUFA. Reaksi ini menghasilkan pembentukan suatu radikal bebas karbon (-CH-) pada PUFA. Radikal karbon distabilkan melalui suatu pengaturan ulang ikatan rangkap yang menghasilkan pembentukan diena terkonjugasi. Bila diena terkonjugasi berikatan dengan O2 akan terbentuk radikal peroksil lipid (ROO). Selanjutnya reaksi peroksil lipid ini membentuk endoperoksida lipid atau lipid peroksida. Radikal peroksil lipid ini dapat juga menghilangkan sebuah atom hidrogen dari molekul lipid lain yang berdekatan untuk membentuk suatu hidroperoksil lipid dan juga membentuk radikal karbon lain. Bila radikal karbon ini bereaksi dengan oksigen maka reaksi peroksidasi lipid akan terus berlanjut. Pembentukan endoperoksida lipid pada PUFA yang mengandung sedikitnya tiga ikatan rangkap akan mendorong terbentuknya senyawa malonaldehid (MDA) (Sayogya 2002). Mekanisme reaksi peroksidasi lipid ini disajikan pada Gambar 5.
Gambar 5 Mekanisme peroksida lipid Kadar lipid peroksida diukur dengan menggunakan metode TBARs dimana digambarkan reaksi antara asam triarbiturat (TBA) dengan malonaldehid (MDA). TBA akan bereaksi dengan gugus karbonil MDA, yaitu satu molekul TBA
16
berikatan dengan dua molekul MDA. Reaksi tersebut dapat dilihat pada Gambar 6.
Gambar 6 Reaksi TBA dengan MDA Produk yang terbentuk berupa kromofor berwarna merah ungu yang diukur serapannya pada =532 nm. Pada reaksi ini sejumlah senyawa lain juga dapat bereaksi dengan TBA, namun karena jumlahnya kecil maka dapat diabaikan. Senyawa-senyawa itu antara lain glukosa < 0,4 mg (2,2 ʋ mol) dan sukrosa < 8,56 mg (25,0 ʋ mol) (Ohkawa et al. 1979). Beberapa penelitian menunjukkan peroksidasi lipid mengawali serangkaian peristiwa yang berakibat peningkatan pemanfaatan LDL oleh makrofag dan terbentuknya sel busa pertanda kerusakan dini lesi aterosklerosis pada intima arteri. Membran-membran mikrosom hati menjalani peroksidasi lipid secara enzimatis. Peroksidasi lipid yang bergantung kepada NADPH atau NADH. Reaksi ini juga bergantung kepada Fe3+ (sebagai kompleks dengan ADP, pirofosfat, dan EDTA). Dalam reaksi ini, NADPH atau NADH berperan sebagai reduktor yang akan mereduksi Fe3+ menjadi Fe2+ proses reduksi ini dikarenakan Fe2+ akan lebih menstimulasi peroksidasi lipid karena memiliki kecepatan reaksi yang lebih besar, serta adanya reaktivitas yang tinggi dari radikal alkoksi (RO.) yang dihasilkan (Halliwell & Gutteridge 1989). Membran-membran mikrosom hati rentan terhadap peroksidasi lipid karena banyaknya kandungan PUFA pada membran ini. Proses ini akan mengubah kekentalan membran. Produksi MDA saat peroksidasi membran mikrosom bervariasi pada tipe jaringan yang berbeda. Ini disebabkan oleh jumlah PUFA yang tidak sama. Peroksidasi non enzimatis dari membran-membran mikrosom
17
kemungkinan disebabkan oleh hemoprotein endogen dan logam-logam transisi (St. Angelo 1992). Pada darah maupun organ, kadar lipid peroksida yang berlebih dapat mengakibatkan berbagai penyakit degeneratif. Jika kadar lipid peroksida di hati meningkat, maka lipid peroksida ini keluar dari hati menuju pembuluh darah, dan akan merusak organ atau jaringan lain. Pada manusia kadar lipid peroksida akan meningkat seiring dengan bertambahnya usia, tetapi jumlahnya tidak boleh melebihi kadar normalnya yaitu 4 nmol/ml (Yagi 1994). Darah Darah terdiri dari sel-sel yang terendam dalam cairan yang disebut plasma (Frandson 1992). Menurut Nielsen (1997) volume darah total pada burung sebesar 5 - 40% dari berat badannya, dan menurut Swenson (1984) sebanyak 8% dari berat badannya. Variasi volume darah dalam tubuh tergantung pada umur, nutrisi, kesehatan ternak, aktivitas tubuh, jenis kelamin dan faktor lingkungan. Menurut Post et al. (2002) peubah sel darah merupakan ukuran yang berguna bagi penelitian kesehatan dan kesejahteraan hewan. Pemeriksaan darah merupakan salah satu metode untuk menetapkan suatu diagnosis penyakit yang dapat memberi gambaran tentang keadaan patologis dan fisiologis. Kelainankelainan dalam darah atau organ-organ pembentuk tubuh ternak dapat diketahui melalui pemeriksaan darah ini (Guyton 1986). Frandson (1992) menyatakan bahwa darah pada hewan merupakan medium transportasi. Beberapa fungsi darah yaitu (1) membawa nutrient dari saluran pencernaan ke seluruh jaringan, (2) membawa produk akhir metabolisme dari sel ke organ pengeluaran, (3) membawa O2 dari paru-paru ke jaringan, (4) membawa CO2 dari jaringan ke paru-paru dan (5) mengandung faktor-faktor penting untuk pertahanan tubuh terhadap penyakit. Menurut Strurkie dan Grimminger (1976), darah terdiri atas cairan (plasma), garam-garam, zat-zat kimia dan butiran sel-sel darah. Sel-sel tersebut terdiri atas eritrosit (sel darah merah) dan leukosit (sel darah putih). Eritrosit Fungsi utama dari sel-sel darah merah atau eritrosit, adalah mengangkut hemoglobin yang membawa oksigen dari paru-paru ke jaringan (Guyton 1997).
18
Pada beberapa hewan tingkat rendah, hemoglobin ini beredar sebagai protein bebas dalam plasma, tidak terbatas dalam sel darah merah. Selain mengangkut hemoglobin, sel-sel darah merah mengandung banyak karbonik anhidrase yang berperan dalam mengkatalisis reaksi antara karbon dioksida dan air, sehingga meningkatkan kecepatan reaksi bolak balik menjadi beberapa ribu kali lipat. Sel darah merah normal, berbentuk lempeng bikonkaf dengan diameter kira-kira 7.8 mikrometer dan dengan ketebalan pada bagian yang paling tebal 2.5 mikrometer pada bagian tengah 1 mikrometer atau kurang. Cakram bikonkaf tersebut mempunyai permukaan yang relatif luas untuk pertukaran oksigen melintasi membran sel (Frandson 1992). Volume rata-rata sel darah merah adalah 90-95 mikrometer kubik. Bentuk sel darah merah dapat berubah-ubah ketika sel berjalan melewati kapiler (Guyton 1997). Hemoglobin Hemoglobin mempunyai tugas pokok membawa atau mengangkut oksigen dari paru-paru menuju kesemua jaringan tubuh hewan. Setelah sampai di jaringan oksigen dibebaskan untuk diberikan kepada sel. Karbondioksida yang dihasilkan oleh sel akan berdifusi ke dalam darah dan dibawa kembali ke paruparu untuk dibuang pada saat terjadi pernafasan (Frandson 1992). Besi di dalam darah berada dalam bentuk hemoglobin yang terdapat dalam butir-butir darah merah (eritrosit), dalam bentuk transferrin di dalam plasma darah dan dalam bentuk ferritin. Meskipun tidak cukup banyak, ferritin juga didapati di dalam butir-butir darah merah dan di dalam butir-butir darah putih (Piliang & Djojosoebagio 2002). Piliang dan Djojosoebagio (2002) menyatakan bahwa cadangan zat besi tersimpan dalam bentuk ikatan ferritin dan hemosiderin. Kedua macam zat ini terkumpul di dalam jaringan tubuh tetapi sebagian besar disimpan didalam hati, limpa dan sumsum tulang. Mekanisme tentang penyerapan atau absorbsi besi oleh usus ketika tubuh memerlukan tambahan besi dari luar dan menurunnya efisiensi penyerapan besi oleh usus ketika tubuh mempunyai kelebihan besi belum diketahui dengan pasti. Dalam keadaan normal fisiologis, besi dalam tubuh melalui makanan dan setelah melewati saluran pencernaan besi akan
19
masuk ke dalam peredaran darah. Banyaknya besi yang diperoleh dari makanan tidak selalu sama pada setiap individu. Bila sel darah merah mencapai akhir usia hidupnya, globin akan diuraikan menjadi asam amino (yang akan digunakan kembali dalam tubuh), besi dilepaskan dari heme dan juga akan digunakan kembali dan komponen tetrapirol pada heme diubah menjadi bilirubin, yang terutama dieksresikan ke dalam usus lewat empedu. Hematokrit Hematokrit adalah fraksi darah yang terdiri dari sel-sel darah merah, yang ditentukan melalui sentrifugasi darah dalam tabung hematokrit sampai sel-sel ini benar-benar mampat pada bagian bawah tabung. Sangat sulit
untuk
memampatkan semua sel darah merah; karenanya sekitar 3 - 4% plasma tetap terjebak diantara sel, dan hematokrit sebenarnya hanya sekitar 96% dari hematokrit yang terukur (Guyton 1997). Semakin besar persentase sel dalam darah artinya semakin besar hematokrit, semakin banyak gesekan yang terjadi antara berbagai lapisan darah, dan gesekan ini menunjukkan viskositas. Karena itu viskositas darah meningkat hebat dengan meningkatnya hematokrit. Bila hematokrit meningkat sampai 60 atau 70, yang seringkali terjadi pada polisitemia, viskositas darah menjadi 10 kali lebih besar daripada air dan alirannya melalui pembuluh darah menjadi sangat terhambat. Nilai hematokrit atau volume sel packed, adalah suatu istilah yang artinya persentase sel-sel darah merah dari total darah yang penentuannya dilakukan dengan mengisi tabung hematokrit dengan darah yang diberi zat agar tidak menggumpal (anti koagulan), kemudian dilakukan sentrifuge sampai sel-sel mengumpul di bagian dasar tabung. Nilai hematokrit biasanya dianggap sama manfaatnya dengan hitungan sel darah merah total (Frandson 1992). Piliang dan Djojosoebagio (2002) mengemukakan bahwa kadar hematokrit ditentukan dengan mensentrifuge darah yang terdapat di dalam tabung kapiler selama 10-15 menit
kemudian
mengukur
tinggi
butir-butir
darah
merah
dan
membandingkannya dengan ketinggian butir-butir darah merah bersama plasmanya.
20
SGOT dan SGPT Jaringan hati mengandung enzim-enzim transaminase dalam jumlah yang besar seperti Glutamat Piruvat Transaminase (GPT) dan Glutamat Oksaloasetat Transaminase (GOT). Adanya kerusakan sel-sel parenkim hati atau permeabilitas membran akan mengakibatkan enzim GOT dan GPT, arginase, Laktat Dehydrogenase (LDH) dan Gamma Glutamil Transaminase (GGT) bebas keluar sel, sehingga cairan masuk ke pembuluh darah melebihi keadaan normal dan kadarnya dalam darah meningkat terlebih dahulu dan peningkatannya lebih nyata bila dibandingkan dengan enzim-enzim lainnya (Callbreath 1982). Kenaikan kadar transaminase dalam serum disebabkan oleh sel-sel yang kaya akan transaminase mengalami nekrosis atau hancur. SGPT adalah ukuran nekrosis hepatoseluler yang paling spesifik dan paling luas ditemukan. SGOT bekerja serupa tetapi kurang spesifik (Sujono 2002). Enzim GPT akan memindahkan gugus amino pada alanin ke gugus keto dari α ketoglutarat membentuk glutamat dan piruvat. Selanjutnya piruvat diubah menjadi laktat. Reaksi tersebut dikatalis oleh enzim Laktat Dehydrogenase (LDH) yang membutuhkan NADH dalam reaksi yang dikatalisisnya. Enzim GPT merupakan enzim yang spesifik ada pada hati. Persamaan reaksi dari aktivitas GPT dan LDH terlihat pada reaksi sebagai berikut. α -ketoglutarat+ L-alanin Piruvat + NADH+H+
(GPT)
piruvat+L-glutamat L-laktat+NAD+
(LDH)
Enzim GOT mengkatalisis pemindahan gugus amino pada L-aspartat ke gugus keto dari α-ketoglutarat membentuk glutamat dan oksalat. Selanjutnya oksaloasetat diubah menjadi malat. Reaksi tersebut dikatalisis oleh enzim malat dehydrogenase (MDH) yang membutuhkan NADH dalam reaksi yang dikatalisisnya. Enzim GOT tidak spesifik untuk disfungsi hati karena enzim ini juga ditentukan pada otot rangka, ginjal, dan pankreas.Persamaan reaksi aktivitas GOT sebagai berikut α -ketoglutarat+ L-aspartat
(GOT)
Oksaloasetat + NADH+H+
(MDH)
L-glutamat + oksaloasetat L-malat+NAD+
21
Sistem Kekebalan (Immune) Tubuh Sistem pertahanan tubuh (kekebalan) pada unggas merupakan sistem kompleks yang befungsi untuk menjaga stabilitas kesehatan tubuh ternak dari infeksi dan juga meningkatkan level kesehatan ternak (Klasing 1998). Sistem ini terdiri dari berbagai macam sel-sel tubuh dan berbagai macam jenis protein yang bekerja dengan cara mengenali dan kemudian membunuh berbagai macam bakteri patogen dan benda atau makhluk asing yang masuk ke dalam sistem tubuh. Keberadaan sistem pertahanan tubuh terdapat pada berbagai macam permukaan jaringan tubuh, terutama pada saluran pencernaan dan sistem kelenjar getah bening. Sistem ini dapat bekerja secara spesifik dan non spesifik. Sistem pertahanan tubuh ini bisa bekerja secara non spefisik yang merupakan sistem pertahanan tubuh pertama dengan cara bereaksi terhadap sesuatu yang asing (mikroba atau zat) dan masuk ke dalam tubuh. Sistem non spesifik ini biasanya tidak meninggalkan memori sehingga tidak bersifat spesifik terhadap bakteri tertentu, melainkan akan bersifat lebih luas terhadap semua mikroba atau zat yang masuk yang bisa menginfeksi. Sistem ini bisa berupa pagocytes yang dapat langsung memakan dan membunuh bakteri patogen, menghasilkan bahan kimia (protein, asam organik atau bakteriosin) yang dapat membunuh bakteri patogen dan juga makrofag sebagai pusat sistem kekebalan (pertahanan tubuh) yang akan merangsang Sel B dan Sel T dalam menghasilkan antibodi (Mashaly et al. 2004) Sistem pertahanan tubuh spesifik merupakan lini pertahanan kedua jika terjadi infeksi atau serangan benda atau mikroba asing dan biasanya memerlukan waktu lebih lama dalam proses netralisasi atau penyembuhan infeksi jenis ini. Sistem ini biasanya akan menghasilkan antigen yang bersifat spesifik terhadap mikroba tertentu, sehingga sistem ini sangat dimungkinkan untuk meninggalkan memori. Salah satu analogi dari sistem pertahanan tubuh spesifik ini ialah program vaksinasi yang bermaksud untuk memberikan kuman patogen yang sudah dilemahkan sehingga tidak berdampak negatif bagi tubuh namun akan tetap merangsang makrofag agar menghasikan antigen yang dapat mengenali kuman patogen sejenis dan kemudian bisa membunuhnya atau dengan cara menstimulus sel B dan sel T agar dapat mengenalinya, menyimpan dalam
22
memori dan kemudian bisa membunuh kuman patogen yang sejenis tapi masih berbahaya bagi tubuh ternak (Chae et al. 2006). Suplementasi Vitamin pada Ayam sebagai Antioksidan Berbagai usaha telah dilakukan untuk mengatasi stres cekaman panas, antara lain dengan penambahan magnesium (Kusnadi 1993; Kusnadi 1990), pemberian vitamin C (Habibie 1993), pemberian vitamin E (Dirican & Tas 1999) dan pemberian bahan alami yang kaya akan zat antioksidan (Dalimartha 2000; Pramono 1992). Vitamin merupakan salah satu bahan esensial yang tidak bisa sepenuhnya diproduksi oleh tubuh, untuk itu suplementasi melalui makanan dan air minum sangat diperlukan. Terdapat 2 golongan utama vitamin, yaitu vitamin larut lemak yang meliputi vitamin A, D, E dan K; serta vitamin larut air yang meliputi vitamin B komplek, choline, vitamin C dan carnitine. Choline dan carnitine memiliki sedikit perbedaan dibandingkan dengan vitamin B kompleks lainnya. Perbedaan dan pengelompokkan vitamin larut lemak dan vitamin larut air dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1 Pengelompokkan jenis vitamin Deskripsi Komponen Deposit Ekskresi Prekursor Fungsi
Vitamin Larut Lemak C, H, O Jaringan adiposa Melalui Feses Ada Menghasilkan energi
Vitamin Larut Air C, H, O, Cl, N, Co, S Bukan jaringan adiposa Melalui urine Tidak ada, koenzim Transfer energi
Sumber : DSM (2007)
Vitamin E termasuk vitamin larut lemak yang erat kaitannya dengan metabolisme lemak, berfungsi sebagai antioksidan dalam pemecahan rantai asam lemak, berperan dalam sistem kekebalan dan penuaan serta behubungan erat dengan metabolisme mineral selenium. Selain sebagai proteksi dari peroksidasi lemak, vitamin E berperan sebagai regulator sistem kekebalan tubuh di tingkat sel dan suplemetasi vitamin E 100 mg/kg ransum dapat mempengaruhi sistem kekebalan tubuh ketika berlangsung stres panas (Niu et al. 2009). Sahin et al. (2002) melaporkan bahwa pemberian vitamin E 250 mg/kg ransum memperbaiki performa ayam broiler dan menurunkan konsentrasi tryclicerida serta cholesterol dalam plasma darah yang dipelihara dalam kondisi stres panas (32 oC). Rasio heterophyl (H): lympocyte (L) meningkat yang menandakan kemampuan sistem
23
kekebalan dalam melakukan phagocytosis meningkat dengan pemberian vitamin E 30 kali dosis normal (10 mg/kg ransum) pada ayam broiler (Boa et al. 2000). Selain vitamin E, antioksidan yang sangat diperlukan dalam proses metabolisme adalah vitamin C. Vitamin C bisa disintesa oleh tubuh pada kondisi normal dan hewan dewasa, fungsinya ialah sebagai antioksidan dalam berbagai reaksi yang bisa merugikan tubuh, sintesa vitamin C dalam tubuh erat kaitannya dengan level glukosa tubuh dan akan berkurang ketika terjadi stres. Mckee et al. (1997) melaporkan bahwa pemberian vitamin C 150 mg/kg ransum mempengaruhi sistem penyimpanan energi di dalam tubuh yang bisa digunakan ketika asupan energi berkurang saat stres panas berlangsung. Vitamin C bisa teroksidasi, terdegradasi oleh enzim, tereduksi oleh trace mineral dan rusak oleh suhu pemanasan. Mekanisme kerja vitamin C sebagai antioksidan tampak pada Gambar 7.
Gambar 7 Mekanisme kerja vitamin C sebagai antioksidan (Lehninger 2005) Pada Gambar 7 dapat dilihat bahwa mekanisme kerja vitamin C sebagai antioksidan dibagi menjadi 3 tahap yaitu 1) selama oksidasi oleh asam askorbat, sebuah radikal bebas disebut radikal asam semidehidroaskorbic dibentuk tetapi memiliki paruh waktu yang pendek 2) Oksidasi senyawa radikal tersebut membentuk asam dehidroaskorbic 3) asam dehidroaskorbik dapat dikurangi dengan hidrogen yang berasal dari glutathione tereduksi.
24
Vitamin E dan vitamin C dapat melakukan sinergi dalam peranannya sebagai antioksidan. Vitamin E yang terletak pada atau dekat dengan permukaan membran dapat bereaksi dengan radikal peroxyl (LOO*), sebelum radikal tersebut bereaksi dengan asam lemak pada membran sel atau komponen sel lain. Vitamin E menghentikan reaksi kurang efektif
pembentukan rantai, akan tetapi vitamin E
dalam menghentikan peroksidasi yang menghasilkan radikal
(*OH) atau radikal alkoxyl (RO*). Vitamin E (dalam bentuk tereduksi) karena kereaktifan hydrogen fenolik dan gugus karbon 6 hidroxyl dan kemampuan sistem cincin kromanol untuk menstabilkan elektron tidak stabil, menyediakan hydrogen untuk reduksi radikal peroxyl, sebagai berikut: LOO* + EH ---------- > LOOH + E* Vitamin E (EH) juga menyediakan hydrogen untuk mereduksi radikal lemak yang terdapat senyawa karbon ditengahnya: L*+ EH ---------- > LH + E• E* mewakili vitamin E teroksidasi (juga disebut radikal alfa tokoferol atau radikal alfa tokoperokxyl), proses ini disebut “mencari radikal bebas”. Proses ini akan berhenti jika dua radikal bebas bersatu membentuk molekul yang bukan lagi radikal bebas dan tidak dapat meneruskan reaksi. Radikal tokoperoxyl yang dihasilkan dalam reaksi penghentian radikal bebas harus direduksi untuk dapat digunakan kembali. Regenerasi menjadi tokoperoxyl dari vitamin E tereduksi dapat dilihat pada Gambar 8.
Gambar 8 Regenerasi vitamin E (α-tokoferol) (Gropper et al. 2009) Gambar 8 menunjukkan bahwa regenersasi vitamin E membutuhkan agen pereduksi, termasuk vitamin C (asam askorbat), gluthation tereduksi (GSH), NADPH, ubiquinol, dan asam dihidrolipoic. Selanjutnya, radikal tokoperoxyl
25
dapat bereaksi dengan radikal peroxyl untuk membentuk produk tidak aktif seperti tokopherylquinon. Puthpongsiriporn et al. (2001) melaporkan bahwa pemberian vitamin E (65 IU/kg ransum) dan C (1000 ppm melalui air minum) pada ayam petelur yang mengalami stres panas tidak mempengaruhi parameter produksi, tetapi mempengaruhi level status imunitas, kandungan antioksidan dalam kuning telur dan kandungan antioksidan pada plasma darah. Kombinasi pemberian vitamin E (240 mg/kg ransum) dengan vitamin C (240 mg/kg ransum) pada puyuh masa pertumbuhan dan produksi telur yang mengalami stres cekaman panas berpotensi untuk memperbaiki performa produktivitas dan memperbaiki efek negatif dari stres panas (Ipek et al. 2007). Pemberian vitamin E (60 mg/kg ransum) yang dikombinasikan dengan vitamin C (60 mg/kg ransum) pada hewan kesayangan yang sehat tidak berdampak banyak pada sistem kekebalan dan parameter antioksidan tubuh (Hesta et al. 2009). Hal ini menunjukkan bahwa peningkatan suplementasi vitamin E yang dikombinasikan vitamin C lebih optimal ketika ternak dalam kondisi stres, baik yang diakibatkan oleh lingkungan atau dalam tubuh ternak itu sendiri, hal ini disebabkan ketika stres ternak akan mengalami gangguan sintesa vitamin C dalam tubuh dan tingginya radikal bebas dalam tubuh yang dapat merusak membran sel dan jaringan tubuh. Vitamin E salah satu pertahanan melawan kerusakan jaringan secara oksidatif. Perlindungan lain termasuk vitamin C, gluthation, karotenoid dan enzim yang membutuhkan sejumlah mineral mikro (besi, selenium, zinc, copper dan mangan) untuk aktivasinya. Oleh sebab itu, terdapat hubungan yang erat antara vitamin E dan C, karotenoid, mineral-mineral tersebut pada aktivitas antioksidan. Vitamin E dan C tampak bekerja secara sinergis dalam menghambat oksidasi. Hubungan antara vitamin E dan nutrisi lain yang berfungsi sebagai antioksidan disajikan pada Gambar 9.
26
Keterangan EH = AH2 = SOD = GSH = GSSG = O2 = LOO* = LH =
Vitamin E Vitamin C Superoxide dismutase Reduced gluthatione Oxidizeg gluthatione Superoxide radical Peroxy radical Unsaturated fatty acid
L* RH R* H2O2 ROO* ROOH LOOH
= = = = = = =
Carbon-centered lipid radical Organic nonlipid compound Carbon-centered nonlipid radical Hydrogen peroxide Nonlipid peroxy radical Nonlipid peroxides Lippid peroxides
Gambar 9 Interaksi antara beberapa antioksidan untuk mencegah kerusakan sel (Gropper et al. 2009)
BAHAN DAN METODE
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober – Desember 2011, bertempat di laboratorium Ilmu Nutrisi Ternak Unggas dan kandang C Fakultas Peternakan IPB, laboratorium Biokimia Pangan IPB, laboratorium kimia terpadu PAU IPB serta laboratorium Mandapa, Bogor. Untuk proses pembuatan ransum dilakukan di Putri Jaya Gunung Farm Bogor, sedangkan untuk uji kualitas fisik ransum dilakukan di laboratorium Industri Pakan IPB.
Bahan dan Alat Ternak Penelitian menggunakan DOC ayam broiler jantan strain Ross sebanyak 160 ekor berbobot rataan 42 gram dengan merk CP 707 (strain Ross) yang ditetaskan pada tanggal 31 Oktober 2011 dari hatchery di Sukabumi. Kandang dan Perlengkapan Kandang yang digunakan selama proses pemeliharaan ialah kandang kelompok (pen) dengan ukuran 1 m x 1 m x 2 m yang berlokasi di laboratorium lapang Ilmu Nutrisi Ternak Unggas. Kandang ini dilengkapi dengan lampu 60 watt, tempat pakan dan air minum masing-masing berjumlah 1 buah disetiap pen. Lantai kandang dialasi dengan sekam, dan dinding kandang terbuat dari kawat yang memudahkan sirkulasi udara dan dilengkapi dengan penutup plastik (tirai) yang dapat digunakan sewaktu hujan. Bentuk dan kandang penelitian dapat dilihat pada Gambar 10.
Gambar 10 Kandang penelitian
27
28
Ransum Selama satu minggu pertama ayam dipelihara menggunakan ransum broiler starter komersial yang berasal dari PT Charoen Pokphand Indonesia (CP 611), sedangkan untuk umur 8 – 33 hari ransum yang digunakan terdiri dari 2 jenis, yaitu ransum berbasis karbohidrat (PC) dan ransum berbasis lemak (PL) sebagai sumber energi dengan komposisi disajikan pada Tabel 2.
Kedua ransum
penelitian ini dibedakan berdasarkan kandungan lemaknya. Tabel 2 Komposisi ransum penelitian (umur 8 – 33 hari) No 1 2 3 4 5 6 7 8
Bahan C : karbohidrat L : lemak Jagung (%) 60.30 46.06 Wheat Pollard (%) 1.40 8.20 Bungkil kedele argentina (%) 24.75 34.63 Tepung daging dan tulang (%) 4.85 1.10 Corn gluten meal (%) 4.75 1.00 Crude palm oil (%) 1.35 6.15 Premixa (%) 2.50 2.50 Tepung batu (%) 0.10 0.36 Total (%) 100.00 100.00 Kandungan nutrien (perhitungan) : 1 Kadar air (%) 11.75 11.15 2 Abu (%) 4.74 5.35 3 Serat kasar (%) 3.35 3.80 4 Lemak kasar (%) 4.50 9.00 5 Asam linoleat (%) 1.52 1.80 6 Protein kasar (%) 22.00 22.00 7 BETNb (%) 53.66 48.70 8 EM (kkal/kg) 3,080.00 3,080.00 9 Lysine (%) 1.28 1.28 10 Methionine (%) 0.49 0.49 11 Calcium (%) 0.95 0.96 12 Phospor (%) 0.77 0.78 13 Phospor tersedia (%) 0.40 0.40 14 Sodium (%) 0.16 0.16 15 Chloride (%) 0.26 0.26 Catatan : a setiap kg premix mengandung vitammin A 500 KIU, vitamin D3 140 KIU, vitamin E 3.2 g, vitamin B1 120 mg, vitamin B 2 320 mg, vitamin B6 160 mg, vitamin B12 0.8 mg, biotin 3.6 mg, vitamin K3 120 mg, calcium d-pantothenate 480 mg, folic acid 40 mg, niacin 2 g, Fe 2.4 g, Cu 0.8 g, Zn 2.4 g, Mn 2.8 g, Se 6 mg, I 60 mg. Didapatkan dari PT Trouw Nutrition Indonesia. b % BETN = 100 – kadar air – abu – serat kasar – lemak kasar – protein kasar
Proses pembuatan ransum meliputi proses penimbangan, pencampuran (mixing), pemasakan dengan steam (conditioning), pencetakan pellet, pendinginan (cooler), crumbling, proses pemisahan produk tepung dan crumble (sieving), penimbangan dan pengemasan (Gambar 11) yang bekerja secara otomatis berkesinambungan dengan kapasitas mixer sebanyak 200 kg dan kapasitas mesin
29
pellet sebesar 500 kg per jam dan ukuran die mesin pellet sebesar 3 mm. Kedua jenis ransum menggunakan kecepatan mesin pellet yang sama yaitu sebesar 400 rpm dan memiliki tekanan steam (uap) yang digunakan ketika proses conditioning sebesar 3 kg/cm2. Penimbangan bahan baku
Pencampuran bahan-bahan
Conditioning
Pelleting
Coolling
Sieving
Crumbling
Pengemasan
Gambar 11 Proses produksi ransum di Putri Jaya Gunung Farm Suplemen Vitamin E dan C Suplemen vitamin E dalam bentuk tokoferol asetat dan vitamin C dalam bentuk asam askorbat yang digunakan berasal dari PT Trouw Nutrition Indonesia. Adapun acuan dalam pemberian vitamin C ialah sebesar 150 mg/kg ransum atau setara dengan 60 mg/l air minum (Mckee et al. 1997) sedangkan untuk vitamin E sebesar 100 mg/kg ransum atau setara dengan 8 mg/l air minum setelah dikurangi kandungan yang ada dalam ransum (Niu et al. 2009). Jenis vitamin E dan vitamin C yang digunakan dalam penelitian ini ialah jenis vitamin yang memiliki tingkat kelarutan terbaik dan khusus diaplikasikan melalui air minum ternak. Adapun kandungan vitamin E di dalam ransum sebesar 80 mg/kg dan vitamin C tidak terkandung di dalam ransum. Alat Peralatan yang digunakan ialah kateter, tabung sampel darah, tabung sampel darah EDTA, freezer, termohigrometer, pita ukur, timbangan, gelas ukur, pisau bedah, penggaris, jangka sorong dan termos es (pendingin).
30
Metode Penelitian Penelitian ini dilakukan dalam beberapa tahapan yang meliputi : 1. Tahap Persiapan Vitamin C memiliki stabilitas yang lebih rendah dibandingkan dengan vitamin E (Coelho 1994), terutama ketika berhubungan dengan mikro mineral. Air mengandung makro mineral dan mikro mineral yang bisa mempengaruhi stabilitas vitamin setelah dilarutkan didalam air minum (kemasan isi ulang). Untuk itu uji stabilitas vitamin C setelah dilarutkan didalam air minum dilakukan pada 0, 1, 2 dan 3 jam menggunakan metode HPLC pada panjang gelombang 243 nm (The European Pharmacopoeia 2005) pada suhu 25 0C Pada minggu pertama (umur : 0 – 7 hari) penelitian ini menggunakan ransum crumble starter komersial yang dipelihara menggunakan pemanas buatan secara berkelompok, pemberian ransum dan air minum ad libitum. Hal ini perlu dilakukan mengingat pada minggu pertama kemampuan ayam dalam mencerna lemak belum optimal yang disebabkan masih berkembangnya saluran pencernaan terutama hati dan kantung empedu. Kemudian pada umur 7 hari dilakukan penimbangan secara individu dan dilakukan pengacakan serta pengelompokan sesuai dengan perlakuan yang diujikan 2. Tahap Pemeliharaan Ayam (perlakuan) Penelitian ini dilangsungkan selama 21 hari dimulai pada ayam berumur 8 hari sampai dengan 28 hari, dibagi menjadi 4 perlakuan, 4 ulangan dan berjumlah 10 ekor setiap ulangan. Ransum perlakuan yang diberikan (Tabel 2) mengacu pada kebutuhan Ross (2009) berbentuk crumble untuk ayam berumur 8 – 18 hari dan berbentuk pellet (ukuran 3 mm) untuk ayam berumur 19 – 28 hari. Aktivitas harian dimulai dengan membuka tirai penutup kandang dipagi hari agar sirkulasi udara di dalam kandang menjadi lebih baik dan sehat untuk ayam. Ransum penelitian diberikan 2 kali sehari, pagi sebanyak 40% dimulai pada jam 06.30 WIB setelah kandang, perlengkapan ransum dan tempat air minum dibersihkan, kemudian sebanyak 60% pada jam 16.00 WIB. Untuk perlakuan pemberian vitamin melalui air minum (berasal dari galon isi ulang) dilakukan pada jam 09.00 – 15.00 WIB, dimana dilakukan pergantian minuman bervitamin
31
setiap 3 jam. Setelah jam 15.00 WIB sampai esok pagi, air minum diberikan ad libitum. Setiap minggu dilakukan pencatatan konsumsi ransum, konsumsi air minum, pertambahan bobot badan, konversi ransum dan kematian. Suhu dan kelembaban kandang dicatat sebanyak 3 kali sehari pada pagi (06.00 WIB), siang (13.00 WIB) dan malam (23.00 WIB) selama proses penelitian menggunakan alat termohigrometer. 3. Tahap Pengambilan Sampel Proses pengambilan sampel darah dilakukan hari ke 33 sebanyak 4 ulangan per perlakuan. Sampel darah diambil pada bagian sayap, kemudian darah disimpan dalam tabung sampel darah dan termos es untuk mencegah kerusakan sebelum dianalisa. Pengamatan organ dalam dilakukan pada hari ke 33 menggunakan 1 ekor ayam per ulangan yang meliputi hati, bursa fabricius, thymus dan limpa. Proses pemotongan ayam juga dilakukan untuk mengambil daging bagian dada dan paha yang akan dianalisa kandungan cholesterol dan bilangan thio barbituric acid (TBA). Untuk uji retensi energi, lemak dan nitrogen dilakukan pasca penelitian menggunakan ayam yang sama (umur 33 hari) sebanyak 3 ekor per jenis ransum yang diujikan. 4. Tahap Analisis Sampel 1. Pengujian kualitas fisik ransum (Briggs et al. 1999) Uji kualitas fisik ransum berkaitan dengan ketahanan ransum terhadap benturan selama proses penyimpanan, pengiriman dan aplikasi pemberian ransum dikandang yang dampak akhirnya mempengaruhi nilai konversi ransum. Uji yang dilakukan meliputi uji pellet durability index (PDI) yaitu kemampuan pellet dalam menghadapi benturan menggunakan metode tumbling. Untuk uji kandungan debu (dust) menggunakan vibrator ball mill dengan berbagai ukuran mesh 4, 8, 16, 30, 50, dan 100, sebanyak 100 gram lalu diletakkan pada bagian paling atas ayakan (sieve), lalu dilakukan penyaringan bahan yang tertinggal pada setiap saringan, nilai kandungan debu ialah jumlah yang berada di mesh 50 dan 100.
32
2. Pengujian bilangan thio barbituric acid (TBA) pada daging ayam Pengujian ini dilakukan dengan metode Tarlagdis (1960) dilakukan dengan cara sampling per ekor per ulangan yang diambil pada umur 33 hari dengan cara mengambil daging bagian dada sebanyak 10 g yang ditumbuk secara halus dan ditambahkan aquades sebanyk 50 ml. Kemudian 47.5 ml larutan diambil untuk ditambahkan HCL 4M sampai pH bernilai 1.5 sebelum didestilasi menggunakan tabung destilasi selama 10 menit. Hasil destilasi diambil 5 ml untuk dimasukkan kedalam tabung reaki untuk direaksikan dengan 5 ml larutan TBA, lalu dipanaskan kembali selama 35 menit. Malonaldehid (MDA) dapat bereaksi dengan 2-thiobarbituric acid (TBA) membentuk warna merah yang dapat diukur pada panjang gelombang 528 nm menggunakan spectrofotometer setelah larutan didinginkan (Apriyantono et al., 1989) Bilangan TBA (mg malonaldehid/kg) =
3
x absorbansi x 7.8
g sample 3. Pengujian malonaldehid (MDA) pada hati ayam (Conti dan Sutherland 1991) Prinsip ini berdasarkan pada kemampuan pembentukan kompleks berwarna merah keunguan antara MDA dan asam tiobarbiturat (TBA). Hati yang telah disimpan dalam freezer -20ºC dicairkan terlebih dahulu sebelum dianalisis pada suhu ruang kemudian digerus dengan menggunakan lumpang (dalam keadaan dingin), dengan ditambahkan 1,25 ml buffer fosfat yang mengandung 11,5 g/L kalium klorida dalam kondisi dingin pH 7,4 (disimpan pada suhu 5ºC). Campuran ini disentrifuse 4000 rpm selama 10 menit, diambil supernatan keruh dan disentrifuse lagi 4000 rpm selama 10 menit, sebanyak 1 ml supernatan jernih diambil dan ditambahkan 1 ml campuran larutan asam klorida dingin 0,25 N (2,23 ml asam klorida pekat/100 ml) yang mengandung 15 % asam trikloroasetat (w/v); 0,38 % asam tiobarbiurat dan 0,5% butilat hidroksitoluen). Campuran larutan asam klorida dan supernatan tersebut dipanaskan pada suhu 80ºC (inkubator) selama 1 jam, selanjutnya didinginkan dengan air mengalir dan disentrifuse 3500 rpm selama 10 menit. Supernatan
33
hasil sentifuse tersebut kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 532 nm.
KadarMDA (umol/L)
A x 20000 x Fp BeratSampel
A
= Kadar sampel
Fp
= Faktor pengenceran
Kurva standar dibuat dengan mengencerkan larutan standar 1,1,3,3 tetraetoksipropana (TEP) hingga menghasilkan beberapa konsentrasi yaitu 500, 1000, 2000, 2500, 3000, 4000 dan 5000 pmol/50μL (Lampiran 2) 4. Pengujian kadar kolesterol daging ayam Kadar kolesterol daging ayam diukur pada daging bagian dada dan paha karkas ayam dengan perbandingan 1 : 1 yang digiling sampai halus dan homogen dengan metode Leibermann-Burchard (Kleiner dan Dotti 1962). Caranya adalah menimbang sampel daging sebanyak ± 0,2 gram dimasukkan ke dalam tabung sentrifuse berskala 15 ml, kemudian ditambahkan campuran alkohol eter (3:1) sebanyak 12 ml dan diaduk hingga merata. Larutan didiamkan sambil dikocok sekali dua kali selama 30 menit. Pengaduk dibilas dengan alkohol eter (3:1) dan volume disetarakan menjadi 15 ml, lalu disentrifuse dengan kecepatan 3000 rpm selama 15 menit. Supernatan yang terbentuj dimasukkan ke dalam gelas piala 50 ml dan dipanaskan pada penangas air sampai kering. Ekstrak residu dilarutkan dengan 2.5 khloroform sedikit demi sedikit atau dicuci sebanyak dua kali atau dimasukkan ke dalam tabung reaksi 10 ml untuk disetarakan volumenya menjadi 5 ml. 5 ml kolesterol standar (0,4 mg kolesterol dan 5 ml khloroform) dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang lain. Keduanya ditambahkan 2 ml asetat anhidrida dan 10 ɥ l H2SO4 pekat, kemudian dikocok sampai timbul warna hijau dan disimpan selama 15 menit di ruang gelap. Selanjutnya dilakukan pembacaan dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 420 nm. Nilai kolesterol diperoleh dari perhitungan dengan menggunakan rumus sebagai berikut: Kolesterol (mg/100g) = absorbans sampel X 0,4 (konsentrasi standar) X 100 Absorbans standar berat sampel
34
5. Profil serum darah Analisa darah meliputi kandungan triglicerida, kolesterol, HDL kolesterol, LDL kolesterol dan SGPT mengunakan alat ukur Roche Cobas Mira plus chemical analyzer. Uji triglicerida dan kolesterol darah menggunakan metode kalorimetri enzimatis dengan prinsip bahwa triglycerida akan dipecah menjadi glycerol dan asam lemak bebas oleh lipase lipoprotein, kemudian gliserol akan mengalami
phosporilisasi
oleh
ATP
yang
dibantu
oleh
kehadiran
glycerolkinease (GK) menjadi glycerol-3-phospate (G-3-P) dan ADP. G-3-P akan
teroksidasi
oleh
glicerolphosphate
oxidase
(GPO)
menjadi
dihydroxyacetone phosphate (DHAP) dan hydrogen peroxida (H2O2). Kromogen berwarna merah akan terbentuk akibat adanya reaksi antara 4amirioantipyrine (4-AA) dengan
gugus phenol yang dibantu enzim
peroxidase (POD) dan H2O2 yang berasal dari proses oksidasi tryglicerida. Uji kolesterol darah menggunakan metode kalorimetri enzimatis dengan prinsip bahwa semua enzim yang berperan dalam proses oksidasi kolesterol menjadi H2O2 dan H2O yang meliputi cholesterol esterase (CE), cholesterol oxidase (CO) dan peroxidase (PO). 1 ml monoreagent (test kit) yang berasal dari AMS diagnostic Spanyol di reaksikan dengan sampel serum darah yang akan diuji sebanyak 10 ɥ L, aduk sampai rata selama 5 menit pada suhu 37 oC dan uji pada absorbansi 500 ± 20 nm. Untuk uji kandungan HDL kolesterol dan LDL kolesterol menggunakan tes kit yang berasal dari Sekusui Medical Co.Ltd. Jepang yang dibaca pada absorbansi 550 nm. Alat yang digunakan untuk analisa darah dapat dilihat pada Gambar 12.
Gambar 12. Roche Cobas Mira plus chemical analyzer
35
Enzim serum glutamic pirivuc transaminease (SGPT) atau alanine aminotranferase (ALT) adalah dua enzim yang lazim berada di dalam hati, sebagian berada di dalam serum darah dan akan meningkat konsentrasi diatas normal di dalam darah ketika terjadi kerusakan hati. ALT merupakan katalisator pembentukan glutamat dan piruvat dari reaksi antara alanin dengan oxoglutarat. Kemudian piruvat yang bereaksi dengan nicotinamide adenine dinucleotida (NADH) untuk direduksi menjadi laktat oleh enzim
lactate
dehydrogenase (LDH). Selanjutnya sampel dan reagen (tes kit yang berasal dari AMS diagnostic Spanyol) dipipet untuk dimasukkan ke dalam cuvette, diaduk sehingga homogen, kemudian dilakukan pembacaan pada suhu 37 oC dan absorbansi 340 nm. Uji profile darah selanjutnya meliputi kandungan hemoglobin, hematokrit, eritrosit (sel darah merah) dan leukosit (sel darah putih) menggunakan alat ukur Sysmex KX-21 menggunakan metode flowcytometry (Gambar 13).
Gambar 13. Sysmex KX-21
36
6. Energi Metabolis Semu Terkoreksi Nitrogen (EMSn), Retensi Lemak (RL) dan Retensi Nitrogen (RN) Uji energi metabolis semu terkoreksi nitrogen, retensi lemak dan retensi nitrogen (Sibbald 1983) dilakukan setelah perlakuan selesai menggunakan ayam yang sama pada saat penelitian. Percobaan ini mengggunakan 6 ekor ayam broiler berumur 35 hari dengan perincian 3 ekor media uji coba ransum berbasis karbohidrat (PC) dan 3 ekor sebagai media uji ransum berbasis lemak (PL). Sebelum dilakukan uji coba, ayam dipuasakan terlebih dahulu selama 24 jam namun tetap diberi air minum secara ad libitum, yang bertujuan untuk mengurangai dampak ransum sebelumnya. Kemudian ayam diberi ransum perlakuan masing-masing sebanyak 30 gram per ekor. Koleksi ekskreta dilakukan selama 24 jam setelah pemberian ransum. Hasil koleksi ekskreta dari setiap perlakuan dan ulangan dipisahkan sendiri-sendiri, dibersihkan dari kotoran-kotoran dan bulu-bulu, kemudian ditimbang dan dikeringkan dengan oven pada suhu 60 oC selama 24 jam. Selanjutnya ditimbang, digiling dan dianalisis kandungan bahan kering, protein kasar, lemak kasar dan energi bruto. Hasil yang didapat dilakukan perhitungan sebagai berikut : EMSn (kkal/kg) = (X x EBp) – [(Y x EBe) + (8.22 x RN) X RL (%)
= Retensi Lemak (g) x 100% Konsumsi Lemak (g)
RN (%)
= Retensi Nitrogen (g) x 100% Konsumsi Nitrogen (g)
Dimana : EMSn = Energi metabolis semu terkoreksi nitrogen (kkal/kg) X = Bobot ransum yang dikonsumsi (g) EBp = Energi bruto ransum (kkal/kg) Y = Bobot ekskreta (g) EBe = Energi bruto ekskreta (kkal/kg) RN = Retensi nitrogen (g)
7. Income Over Feed and Chick Cost (IOFC) Merupakan selisih dari penerimaan dikurangi biaya produksi selama penelitian yang bertujuan untuk mengetahui dampak ekonomi dari penelitian ini.
37
5. TahapAnalisis Data Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap faktorial (RAL Faktorial) dengan faktor pertama ialah jenis ransum (PC = ransum berbasis karbohidrat; PL = ransum berbasis lemak) dan faktor kedua ialah dosis suplemen vitamin E dan vitamin C (0 = 0 gram/liter air minum, 1 = 1 gram/liter air minum). Total perlakuan yang ada ialah 4 perlakuan seperti yang disajikan pada Tabel 3 (R1 = PC0, R2 = PC1, R3 = PL0, R4 = PL1), masing-masing perlakuan diulang sebanyak 4 kali dan masing-masing ulangan terdiri dari 10 ekor ayam. Tabel 3 Perlakuan penelitian Suplemen air minum 0 : Tanpa Suplementasi
1: Vitamin E dan Vitamin Ca
PC : Karbohidrat
R1 : PC0
R2 : PC1
PL : Lemak
R3 : PL0
R4 : PL1
Ransum
Catatan : a Dosis suplementasi vitamin E dan C = 1 gram/liter (mengandung vitamin E 8 mg dan vitamin C 60 mg per liter air minum)
Hasil yang diperoleh dianalisis menggunakan ANOVA
(analysis
of
variance) dan apabila terdapat perbedaan (p < 0.05) antar perlakuan, maka dilanjutkan dengan uji kontras orthogonal (Mattjik & Sumertajaya 2002). Data yang
didapatkan
diuji
menggunakan
prosedur
General
Linier
Model
menggunakan software SAS versi 9.1. Model linier yang digunakan adalah sebagai berikut : Yijk = ɥ + αi + βj + (αβ)ij + εijk Dimana : Yijk
= Nilai hasil pengamatan pada faktor jenis ransum ke – i, dosis suplementasi vitamin ke – j dan ulangan ke – k
I
= Faktor jenis ransum
J
= Dosis suplementasi vitamin E dan vitamin C
ɥ
= Rataan umum
αi
= Pengaruh faktor jenis ransum
βj
= Pengaruh dosis suplementasi vitamin E dan vitamin C
(αβ)ij
= Pengaruh interaksi jenis ransum dengan dosis suplementasi vitamin E dan vitamin C
εijk
= Galat percobaan
38
HASIL DAN PEMBAHASAN Pemberian ransum berbasis karbohidrat sebagai sumber energi akan menghasilkan panas di dalam tubuh yang lebih tinggi dibanding dengan ransum berbasis lemak sebagai sumber energi, hal ini dikarenakan karbohidrat tergolong sumber energi yang mudah digunakan akan tetapi tidak sebaik lemak dari nilai energi metabolis per satuan unit. Suhu dan Kelembaban Lingkungan Pemeliharaan Proses pemeliharaan ayam dilakukan selama penelitian yang dimulai pada tanggal 31 Oktober 2011, rataan suhu lingkungan kandang selama proses pemeliharaan disajikan pada Gambar 14.
Gambar 14 Rataan suhu (oC) kandang penelitian (
) dan referensi Ross (
)
Nilai rataan suhu lingkungan kandang selama proses pemeliharaan berkisar 25 – 30 oC, nilai rataan suhu pada pagi hari 25.67 ± 0.67 oC, nilai rataan suhu pada siang hari 32.66 ± 1.8 oC dan dimalam hari sebesar 26.47 ± 0.94 oC. Nilai kelembaban lingkungan bekisar 65 – 85% selama proses pemeliharaan, tertinggi terjadi pada pagi hari 88.21 ± 3.37% dan terendah pada siang hari 57.76 ± 8.05%. Besarnya variasi kelembaban pada siang hari disebabkan oleh terjadinya hujan disaat siang hari selama proses pemeliharaan, dimana setelah hujan terjadi maka nilai kelembaban lingkungan cenderung meningkat (Gambar 15).
39
40
Gambar 15 Nilai suhu siang hari (oC) kandang penelitian ( ( ) Suhu tubuh ayam sekitar 41
) dan referensi Ross
o
C dengan suhu nyaman lingkungan
pemeliharaan berkisar pada 30 oC dengan kelembaban lingkungan sebesar 60 – 70% (Ross 2009) dan suhu nyaman pemeliharaan ayam akan menurun seiring dengan bertambahnya umur ayam seperti tertera pada Gambar 14 dan 15. Pertambahan umur ayam akan menyebabkan proses metabolisme dalam tubuh meningkat yang berdampak pada bertambahnya panas yang dihasilkan selama proses metabolisme zat-zat makanan, sehingga membutuhkan suhu lingkungan yang lebih rendah agar proses pelepasan panas yang dihasilkan selama proses metabolisme bisa ikut meningkat dan ayam terhindar dari stres yang bisa mengganggu produktivitas dan bahkan menyebabkan kematian. Rataan suhu selama penelitian (Gambar 14) berada di atas suhu ideal yang disarankan oleh Ross (2009) dan semakin besar variasinya seiring dengan bertambahnya usia ayam. Variasi suhu ideal dengan suhu lingkungan selama proses pemeliharaan terlihat lebih besar pada siang hari (Gambar 15). Dengan demikian penambahan vitamin E dan C melalui air minum sudah tepat dilakukan pada jam 09.00 – 15.00 WIB, dengan tujuan untuk menanggulangi stres selama proses pemeliharaan yang diakibatkan oleh variasi suhu tersebut. Gejala stres dimulai dengan penurunan pembentukan vitamin C dalam tubuh, kemudian penurunan konsumsi ransum, panting, gangguan proses metabolisme sampai
41
dengan kematian pada ternak. Salah satu gangguan metabolisme yang terjadi ialah adanya serangkaian kerusakan sel-sel tubuh yang diakibat oleh adanya reaksi radikal bebas (MDA) dalam tubuh. Dampak dari pemberian vitamin E dan C ini terlihat dari nilai MDA hati (Tabel 7) dan nilai MDA karkas (Tabel 8) yang lebih rendah ketika diberi suplementasi dibandingkan tidak diberi suplementasi vitamin melalui air minum.Vitamin E dan C
berperan sebagai antioksidan yang
menetralisir MDA di dalam tubuh (Gambar 9) Variasi suhu lingkungan dengan suhu ideal (Gambar 14 dan 15) menyebabkan energi untuk produksi digunakan untuk homeostasis, yang dimulai dengan menurunnya konsumsi ransum, menurunnya laju aliran darah dan berkurangnya energi yang dimetabolisme (Mckee et al. 1997). Kondisi yang tidak nyaman ini untuk ayam menyebabkan laju pernafasan meningkat, keseimbangan asam basa darah berubah, lebih rentan terhadap serangan bakteri patogen, metabolisme nutrisi terganggu, pertumbuhan terhambat dan dapat menyebabkan kematian (Sugito et al. 2007; Mashaly et al. 2004; Borges et al. 2003a; Borges et al. 2003b; Mckee et al. 1997). Stabilitas Vitamin C dalam Air Vitamin C (ascorbic acid) termasuk vitamin larut air yang hanya dibutuhkan ayam broiler pada kondisi stres, pada kondisi normal tubuh bisa memproduksi vitamin C. Suplementasi vitamin C bisa dilakukan melalui ransum atau melalui air minum untuk memudahkan aplikasi di lapangan. Vitamin C terdiri dari berbagai macam bentuk sediaan, seperti vitamin C kristal, vitamin C coated (ethyl cellusoe) dan vitamin C monophosphate. Masing-masing jenis vitamin C tersebut memiliki kandungan bahan aktif, stabilitas dan aplikasi yang berbeda. Vitamin C kristal tergolong yang paling tidak stabil, paling tinggi kandungan bahan aktifnya, ekonomis harganya dan memiliki tingkat kelarutan yang paling baik. Hasil uji coba stabilitas vitamin C di dalam air minum (galon isi ulang) (Gambar 16) pada suhu 25 oC menunjukkan bahwa sampai dengan 3 jam masih memiliki potensi sebesar 82.58%, hal ini penting untuk menentukan efektifitas dosis dan lama pemberian vitamin melalui air minum. Dengan kondisi tersebut maka setelah 3 jam pemberian vitamin C perlu dikoreksi dengan cara
42
menambahkan dosis ekstra atau mengganti dengan yang baru. Vitamin C memiliki stabilitas yang lebih rendah dibandingkan dengan vitamin E dan jenis vitamin lainnya (Coelho 1994), terutama ketika berhubungan dengan mikro mineral. Faktor yang menyebabkan stabilitas vitamin C dalam air rendah ialah pH dan mineral seperti besi dan perunggu yang bisa merangsang terjadinya oksidasi (kerusakan) vitamin C. Stabilitas ini ditunjukkan oleh nilai konsentrasi vitamin C yang tetap tinggi di dalam air.
Gambar 16 Stabilitas vitamin C dalam air Energi Metabolis, Retensi Nitrogen dan Retensi Lemak Energi merupakan parameter kehidupan dan proses metabolisme nutrisi dalam tubuh yang akan menggerakkan sel, jaringan dan organ-organ vital ayam broiler. Energi merupakan salah satu dasar dalam penyusunan ransum yang akan diikuti dengan perhitungan pemenuhan kebutuhan asam amino, asam lemak, vitamin dan mineral agar ransum menjadi seimbang sesuai dengan kebutuhan. Konsumsi energi akan linier dengan jumlah kandungan energi ransum tercerna yang dapat dikonversi dari karbohidrat, lemak dan protein dikalikan dengan jumlah ransum yang dikonsumsi oleh ternak. Hasil uji EMSn ransum pada ayam broiler menunjukkan bahwa ransum berbasis karbohidrat (PC) memiliki nilai standar deviasi 23.84 kkal/kg yang lebih besar dibanding ransum berbasis lemak (PL) 19.62 kkal/kg (Tabel 4), namun nilai
43
rataan energi metabolis ransum PC (2887.01 kkal/kg) lebih kecil dibanding ransum PL (3091.61 kkal/kg). Tabel 4 Nilai energi metabolis semu terkoreksi nitrogen (EMSn), retensi nitrogen dan retensi lemak ayam broiler umur 33 hari Peubah Ransum PC PL EMSn (kkal/kg) 2887.01 ± 23.84 3091.61 ± 19.62 Retensi Nitrogen (%) 80.57 ± 1.78 83.16 ± 3.26 Retensi Lemak (%) 79.05 ± 2.01 89.01 ± 1.75 Keterangan : PC = ransum berbasis karbohidrat; PL = ransum berbasis lemak
Hasil ini menunjukkan bahwa ransum berbasis karbohidrat kurang adaptif bagi ayam ketika terjadi variasi suhu dan kelembaban lingkungan yang disebabkan oleh tinggi panas yang dihasilkan selama proses metabolisme (heat increment) dan cepatnya laju metabolisme dalam tubuh yang berdampak pada terjadinya peningkatan konsumsi ransum agar kebutuhan energi tercukupi. Plavik et al. (1997) melaporkan bahwa penampilan ayam yang dipelihara pada suhu 20 o
C yang diberikan karbohidrat dan lemak sebagai sumber energi tidak berbeda,
termasuk persentase kandungan lemak abdominal dan otot dada, namun suhu selama penelitian ini berlangsung berkisar diatas 25 oC dan berada diatas suhu nyaman untuk ayam (Gambar 15) sehingga tingkat stres lingkungan berpengaruh terhadap kemampuan metabolisme energi. Latshaw dan Moritz (2009) mengemukakan bahwa proses metabolisme akan menghasilkan panas (heat increment) sehingga akan berdampak pada kemampuan ayam dalam metabolisme sejumlah nutrien menjadi energi dalam tubuh. Nilai rataan retensi nitrogen ransum PC (80.57%) lebih rendah dibanding ransum PL (83.16%) dengan nilai standar deviasi ransum PC yang lebih baik dibanding ransum PL (1.78% berbanding 3.26%). Nitrogen yang diretensi oleh ayam berasal dari proses metabolisme asam amino yang bergantung pada konsumsi asam amino, kualitas sumber asam amino dan umur ayam. Jika terjadi kekurangan energi maka sebagian asam amino tersebut akan dikonversi menjadi energi untuk memenuhi kebutuhan hidupnya. Nitrogen yang diretensi akan digunakan oleh tubuh untuk membangun jaringan tubuh, sintesis protein daging, proses regenerasi sel-sel dan proses pembentukan enzim-enzim yang akan berperan dalam metabolisme didalam tubuh.
44
Retensi lemak ransum PL (89.01 ± 1.75%) lebih baik dan lebih tidak bervariasi dibanding ransum PC (79.05 ± 2.01) yang mengindikasikan bahwa sebagian lemak digunakan oleh tubuh ayam untuk memenuhi kebutuhan energinya, dengan cara merubah trigliserida menjadi asam lemak bebas yang siap digunakan dalam proses pembentukan ATP. Lemak yang diserap akan digunakan sebagai bahan pembetukan komponen sel membran, prekursor pembentukan hormon, pelarut dan pembawa vitamin (vitamin A, D, E dan K) dan sebagai sumber steroid yang akan dimanfaatkan dalam proses metabolisme. Faktor yang mempengaruhi retensi lemak ialah jumlah lemak yang dikonsumsi, kualitas lemak dalam ransum, jumlah lemak teroksidasi, dan tingkat stres ternak Profil Darah Ayam Broiler Darah merupakan komponen ayam broiler yang terdiri dari plasma darah dan sel-sel darah. Komposisi dan volume darah ayam tergantung dari nutrisi yang diberikan, tingkatan stres, aktivitas tubuh, jenis kelamin dan interaksi dengan lingkungan sekitar. Pemeriksaan status darah ayam broiler merupakan salah satu usaha untuk mengetahui ada atau tidaknya stres dan penyakit, mendapatkan gambar fisiologis, mendeteksi adanya kelainan dan untuk mengetahui terjadinya proses metabolisme nutrisi. Komponen Darah Hasil pengujian profil komponen darah ayam broiler disajikan pada Tabel 5. Uji statistik profil darah ayam broiler menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (P > 0.05). Kandungan hemoglobin, hematokrit dan eritrosit cenderung menurun akibat perlakuan jenis ransum dan suplementasi vitamin E dan C melalui air minum. Hemoglobin merupakan sel darah merah yang mengandung komponen mineral besi (Fe) yang befungsi untuk mengangkut oksigen dari paru-paru menuju semua jaringan tubuh. Setelah sampai di jaringan, oksigen dibebaskan untuk diberikan kepada sel, sedangkan karbon dioksida yang dihasilkan oleh sel akan berdifusi ke dalam darah dan dibawa kembali ke paru-paru untuk dibuang pada saat terjadi pernafasan (Frandson 1992). Jumlah hemoglobin dalam tubuh terkait dengan jumlah ketersediaan cadangan besi dalam bentuk ikatan ferritin dan
45
hemosderin yang sebagian besar berada dihati, limpa dan sumsum tulang belakang (Piliang & Djojosoebagio 2006b). Nilai hemoglobin normal untuk ayam broiler berkisar 7.0 – 13.0 (Bounous & Stedman, 2000) dan hasil pada Tabel 5 tergolong normal. Da silva et al. (2009) mengemukakan bahwa penambahan vitamin E pada ayam broiler akan menurunkan konsentrasi hemoglobin dan hematokrit namun masih dalam kisaran normal, karena stres pada ayam berkurang ketika diberikan tambahan vitamin E. Tabel 5 Profil komponen darah ayam broiler umur 33 hari Peubah Hemoglobin (g/dl) Hematokrit (%) Eritrosit ( x 106)
Vitamin Ransum PC PL Rataan PC PL Rataan PC PL Rataan
0 10.33 ± 0.51 9.58 ± 0.63 9.95 ± 0.67 34.25 ± 1.50 32.00 ± 2.16 33.13 ± 2.10 2.55 ± 0.06 2.48 ± 0.26 2.51 ± 0.18
1 9.70 ± 0.67 9.75 ± 0.73 9.73 ± 0.50 32.00 ± 1.41 32.50 ± 1.29 32.25 ± 1.28 2.45 ± 0.13 2.48 ± 0.13 2.46 ± 0.12
Rataan 10.01 ± 0.64 9.66 ± 0.49 33.13 ± 1.81 32.25 ± 1.67 2.50 ± 0.11 2.48 ± 0.19
Keterangan : PC = ransum berbasi karbohidrat, PL = ransum berbasis lemak, 0 = tanpa suplemetasi vitamin E dan C melalui air minum, 1 = suplementasi vitamin E dan C melalui air minum
Hematokrit merupakan salah satu uji untuk mengetahui rasio sel darah merah dalam darah dibanding dengan komponen darah lainnya. Bounous dan Stedman (2000) mengemukakan bahwa kisaran nilai hematokrit normal ayam broiler ialah 22.0 – 35.0, sedangkan untuk eritrosit berkisar 2.5 – 3.5, sehingga nilai hematokrit dan eritrosit pada Tabel 5 tergolong normal. Peningkatan nilai hematokrit akan menyebabkan viskositas darah ikut meningkat dan jika viskositas berlebihan akan menghambat peredaran darah dan distribusi oksigen didalam tubuh yang berpeluang terjadinya hipoksemia (keadaan oksigen darah yang menurun). Hipoksemia dapat terjadi ketika nilai hematokrit dan hemoglobin diatas standar normal sehingga eritrosit menjadi lebih besar dan kaku (Tarmudji 2005). Eritrosit berperan dalam mengangkut hemoglobin yang mendistribusikan oksigen dari paru-paru ke seluruh jaringan tubuh. Selain itu kandungan karbonik anhidrase pada eritrosit sangat penting dalam mengkatalis reaksi antara karbondioksida dengan air (Guyton 1997).
46
Kimia Darah Hasil uji statistik untuk kimia darah menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata (P > 0.05) baik untuk perlakuan ransum atau suplementasi vitamin melalui air minum, kecuali untuk komponen total cholesterol (P < 0.01) dan HDL kolesterol (P < 0.05) berbeda akibat adanya perlakuan ransum (Tabel 6). Tabel 6 Hasil Uji kimia darah ayam broiler Peubah
Vitamin
Rataan
Trigliserida (mg/dl)
Ransum 0 PC 125.50 ± 57.25 PL 141.75 ± 22.49 Rataan 133.63 ± 41.19
1 132.50 ± 45.48 102.75 ± 36.73 117.63 ± 41.44
129.00 ± 48.01 122.25 ± 35.06
Total kolesterol
PC
150.00 ± 9.35
133.00 ± 14.54
141.50 ± 14.51A
(mg/dl)
PL Rataan
107.75 ± 16.88 128.88 ± 21.87
103.00 ± 8.04 118.00 ± 19.38
105.38 ± 12.50B
HDL kolesterol
PC
77.75 ± 13.05
68.00 ± 13.09
72 88 ± 13.17a
(mg/dl)
PL Rataan PC PL Rataan PC PL Rataan
60.75 ± 7.14 69.25 ± 12.28 31.75 ± 10.90 21.75 ± 5.74 26.75 ± 9.68 12.00 ± 2.83 11.50 ± 2.38 11.75 ± 2.43
55.25 ± 8.50 61.63 ± 12.28 28.25 ± 6.95 24.25 ± 6.50 26.25 ± 6.58 12.25 ± 4.03 9.00 ± 0.82 10.63 ± 3.20
58.00 ± 7.84b
LDL kolesterol (mg/dl) SGPT (ALT) (U/L)
30.00 ± 8.67 23.00 ± 5.83 12.13 ± 3.23 10.25 ± 2.12
Keterangan : PC = ransum berbasi karbohidrat, PL = ransum berbasis lemak, 0 = tanpa suplemetasi vitamin E dan C melalui air minum, 1 = suplementasi vitamin E dan C melalui air minum. Superskrip dengan huruf kecil menunjukkan perbedaan yang nyata (P < 0.05) dan superskrip dengan huruf besar menunjukkan perbedaaan yang sangat nyata (P < 0.01).
Pemberian ransum berbasis lemak nyata menurunkan (P < 0.01) nilai total kolesterol dari 141.50 menjadi 105.38 mg/dl (penurunan sebesar 36.12 mg/dl atau 25.47%) dan HDL cholesterol dalam darah dari 72.88 menjadi 58.00 mg/dl (penurunan sebesar 14.88 mg/dl atau 20.42%). Hasil ini menunjukkan bahwa pakan berbasis lemak akan meningkatkan kebutuhan garam empedu yang berperan dalam proses emulsifikasi lemak menjadi bentuk micell yang larut dalam air agar lebih mudah dicerna dan diserap oleh tubuh. Garam empedu dihasilkan dari hasil konversi dan reabsorbsi kolesterol yang diangkut oleh HDL dari jaringan perifer atau darah ke dalam hati yang akan diekskresikan kedalam
47
kantung empedu dan duodenum (Muchtadi et al. 1993), sehingga kandungan total kolesterol dan HDL kolesterol darah menurun. Sumber energi pakan berbasis lemak menyebabkan pemanfaatan gliserol dan asam lemak melalui proses β-oksidasi asam lemak dalam mitokondria menjadi lebih intensif untuk memenuhi kebutuhan energi sel, jaringan dan tubuh ayam broiler. Gliserol dan asam lemak didapatkan dari proses pemecahan trigliserida dalam pakan secara lipolisis. β-oksidasi adalah proses perubahan asam lemak bebas menjadi molekul asetil KoA sehingga bisa digunakan dalam siklus trycarboxylic acid (TCA) untuk menghasilkan energi jika diperlukan oleh tubuh, kelebihan asetil KoA akan dimanfaatkan dalam sintesis lemak tubuh. Salah satu proses β-oksidasi asam lemak yang terjadi ialah proses oksidasi asam lemak jenis palmitat (C 16 : 0) yang banyak terdapat dalam crude palm oil (CPO) yang digunakan dalam penelitian ini. Manfaat dari pemberian CPO ialah ketersediaan beta carotene yang tinggi, kandungan energi yang tinggi dan ketersediaan di lokal yang cukup banyak. Namun dari itu penggunaan CPO dapat merangsang terjadinya reaksi radikal bebas yang berlebihan dikarena komposisi asam lemak yang terkandung didalam nya. Dauqan et al. (2011) menyatakan bahwa CPO mengandung asam lemak jenuh (SFA) yeng terdiri dari asam kapilat (C 8: 0) 0.034%, asam laurat (C 12: 0) 0.173%, asam miristat (C 14: 0) 0.961%, asam palmitat (C 16: 0) 42.465% dan asam stearat (C 18: 0) 0.395; asam lemak tidak jenuh dengan satu ikatan rangkap (MUFA) yang terdiri dari asam oleat (C 18: 1) 44.616%; dan asam lemak tidak jenuh dengan banyak ikatan rangkap (PUFA) yang terdiri dari dari asam linoleat (C 18: 2) 10.372% dan asam linolenat (C 18: 3) 0.257%. Ketersediaan MUFA dan PUFA yang tinggi dibanding SFA pada pakan PL menyebabkan kandungan cholesterol (Herman 1991) darah lebih rendah dibanding pakan PC (Tabel 6) Proses metabolisme lemak selain menghasilkan energi juga akan menghasilkan trigliserida, kolesterol dan fospolipid yang akan masuk dalam siklus cylomicron untuk menjadi molekul komplek yang siap untuk di distribusikan ke seluruh jaringan tubuh melalui pembuluh darah. Bentuk molekul yang lazim dikenal ialah bentuk lipoprotein yang disintesis di dalam hati yang berasal dari lemak endogenous dan apoprotein. Selain itu hati mampu melakukan proses
48
sintesis lemak baru yang berasal dari glukosa atau asam amino jika diperlukan dan hati aktif mesintesis garam empedu untuk proses emulsifikasi lemak agar lebih mudah di cerna oleh lipase sebelum diserap tubuh. Bentuk lipoprotein yang dihasilkan oleh hati terdiri dari VLDL, IDL, LDL dan HDL seperti disajikan pada Gambar 17. Masing-masing jenis lipoprotein tersebut memiliki karakteristik dan fungsi yang berbeda-beda sesuai dengan struktur dan komposisi komponen pendukungnya. VLDL berperan dalam distribusi trigliserida, LDL sebagai turunan dari VLDL berperan dalam distribusi kolesterol dan HDL berperan dalam distribusi fospolipida dan kolesterol ester dari jaringan perifer kembali ke hati (Piliang & Djojosoebagio 2002). Rasio HDL dengan LDL kolesterol pada penelitian ini berkisar 2.28 – 2.79, dimana ransum lemak dan suplementasi vitamin E dan C melalui air minum dapat menurunkan rasio HDL dengan LDL kolesterol.
Gambar 17 Bentuk dan fraksi lipoprotein (Gropper et al. 2009)
49
SGPT adalah ukuran nekrosis hepatoseluler yang
paling spesifik dan
paling luas ditemukan. SGOT bekerja serupa tetapi kurang spesifik
(Sujono
2002) karena jaringan hati menghasilkan enzim glutamat piruvat transmirase (GPT) yang akan mudah keluar sel masuk ke pembuluh darah melebihi keadaan normal ketika terjadi kerusakan sel-sel hati dan berkonjugasi positif dengan bobot relatif organ hati. Hasil uji nilai SGPT pada Tabel 6 terlihat bahwa nilai tersebut masih berada dalam kisaran kandungan SGPT ayam broiler yang normal 9.5 – 14.3 U/L (Apata 2011) sehingga bisa disimpulkan kerusakan sel-sel hati pada penelitian ini masih belum terjadi, hasil ini akan ditunjang oleh nilai MDA hati (Tabel 7). MDA merupakan hasil lipid peroksidasi yang mengawali serangkaian peristiwa yang berakibat peningkatan pemanfaatan LDL oleh makrofag dan terbentuknya sel bursa pertanda kerusakan dini lesi aterosklerosis pada intima arteri. Reaksi peroksidasi lipid akan berdampak negatif yang akan merangsang stres oksidatif yang bisa menyebabkan ekstra stres pada ayam selain adanya stres dari lingkungan selama proses pemeliharaan. Dengan demikian kosumsi lemak sebagai sumber energi menjadi kurang menguntungkan jika tidak disiasati dengan baik. Profile Organ Hati dan Kualitas Karkas Ayam Broiler Nilai malonaldehid (MDA) dan bobot relatif organ hati ayam broiler tidak berbeda nyata (P > 0.05) yang disajikan pada Tabel 7. Nilai MDA merupakan salah satu ciri kerusakan organ hati yang berkorelasi positif dengan nilai SGPT (Tabel 6). MDA adalah senyawa yang terbentuk akibat adanya reaksi senyawa peroksida lipid dengan PUFA yang banyak terkandung pada jaringan hati. Suplementasi vitamin E dan C melalui air minum bisa menurunkan level MDA pada hati karena vitamin E dan C berperan dalam menangkal reaksi radikal bebas yang disebabkan oleh peroksidasi lemak agar kerusakan sel-sel hati bisa lebih tereliminasi. Bobot relatif organ hati ayam broiler yang diberikan ransum berbasis lemak (PL) relatif lebih kecil dibanding ransum berbasis karbohidrat (PC). Hal ini disebabkan kinerja hati dalam melakukan fungsi kerja berbanding terbalik dengan kandungan lemak ransum dimana ransum PL memiliki kandungan lemak yang lebih tinggi dibanding ransum PC. Suplementasi vitamin melalui air minum
50
menyebabkan organ hati menjadi lebih berat karena vitamin E tergolong vitamin larut lemak yang erat kaitannya dengan metabolisme lemak dan organ hati. Tabel 7 Nilai malonaldehid (MDA) dan bobot relatif organ hati ayam broiler Peubah MDA (x106) Bobot Hati (%)
Vitamin Ransum PC PL Rataan PC PL Rataan
0 859.73 ± 92.34 752.64 ± 180.51 806.18 ± 144.56 2.69 ± 0.26 2.43 ± 0.13 2.56 ± 0.24
Rataan 1 655.59 ± 83.79 757.66 ± 136.27 706.08 ± 188.58 729.36 ± 172.70 680.83 ± 137.76 2.91 ± 0.55 2.80 ± 0.41 2.56 ± 0.32 2.50 ± 0.24 2.73 ± 0.46
Keterangan : PC = ransum berbasi karbohidrat, PL = ransum berbasis lemak, 0 = tanpa suplemetasi vitamin E dan C melalui air minum, 1 = suplementasi vitamin E dan C melalui air minum
Tabel 8 Persentase dan kualitas karkas ayam broiler Peubah Karkas (%) Lemak abdominal (%) Kolesterol daging ayam (mg/100g) MDA daging (mg/kg)
Vitamin Ransum PC PL Rataan PC PL Rataan PC PL Rataan PC PL Rataan
0 67.13 ± 1.31 65.27 ± 1.90 66.20 ± 1.81 0.77 ± 0.08 0.56 ± 0.22 0.67 ± 0.19 47.56 ± 11.73 61.34 ± 6.56 54.45 ± 11.47 0.07 ± 0.08 0.13 ± 0.18 0.10 ± 0.13
1 67.03 ± 2.67 67.66 ± 1.38 67.35 ± 2.00 0.94 ± 0.50 0.89 ± 0.47 0.92 ± 0.45 58.11 ± 4.17 60.92 ± 11.40 59.51 ± 8.09 0.04 ± 0.02 0.09 ± 0.04 0.07 ± 0.04
Rataan 67.08 ± 1.05 66.47 ± 2.00 0.86 ± 0.35 0.72 ± 0.38 52.84 ± 9.91 61.13 ± 8.61 0.06 ± 0.06 0.11 ± 0.12
Keterangan : PC = ransum berbasi karbohidrat, PL = ransum berbasis lemak, 0 = tanpa suplemetasi vitamin E dan C melalui air minum, 1 = suplementasi vitamin E dan C melalui air minum
Persentase dan kualitas karkas ayam broiler tidak berbeda nyata (P > 0.05) dan disajikan pada Tabel 8. Pakan berbasis lemak (PL) memiliki kecenderungan persentase karkas yang lebih kecil, kandungan lemak abdominal yang lebih kecil, kandungan kolesterol karkas yang lebih tinggi sehingga kandungan MDA dagingnya menjadi lebih tinggi. Hal ini disebabkan karena pakan berbasis lemak
51
(PL) akan menghasilkan deposit cadangan asam lemak dan biosíntesis lemak daging yang lebih tinggi dibanding dengan pakan berbasis karbohidrat (PC). Suplementasi vitamin E dan C melalui air minum memiliki kecenderungan meningkatkan persentase karkas, kandungan lemak abdominal, kolesterol karkas, namun menurunkan nilai MDA daging. Hal ini menunjukkan bahwa metabolisme vitamin E sangat erat kaitannya dengan biosíntesis asam lemak dan lemak daging. Adanya sejumlah vitamin E yang dideposisi pada bagian membran daging ikut membantu mencegah kerusakan daging ayam akibat adanya reaksi dari peroksidasi lipid sehingga nilai MDA daging ayam yang disuplementasi vitamin menjadi lebih rendah. Penampilan Ayam Broiler Penampilan ayam broiler yang meliputi konsumsi air minum , konsumsi ransum, pertambahan bobot badan dan konversi ransum (Tabel 9) dilakukan pencatatan dan analisa untuk mengetahui seberapa besar pengaruh perlakuan. Tabel 9 Penampilan ayam broiler (8 – 28 hari) Peubah Konsumsi air minum (ml/ekor)
Vitamin Ransum
PC PL Rataan Konsumsi ransum PC (g/ekor) PL Rataan Pertambahan PC Bobot badan PL (g/ekor) Rataan Konversi ransum PC PL Rataan
0
1
4481.43 ± 240.87 4660.86 ± 207.61 4571.15 ± 229.21 1836.68 ± 31.08D 1952.41 ± 43.77B 1894.54 ± 71.14b 1187.11 ± 28.23 1231.68 ± 18.45 1209.40 ± 32.48 1.439 ± 0.03B 1.475 ± 0.02C 1.457 ± 0.03
4721.61 ± 197.61 4612.88 ± 93.88 4667.25 ± 154.57 1955.88 ± 71.67A 1922.16 ± 46.53C 1959.02 ± 68.43a 1239.85 ± 55.62 1251.73 ± 21.44 1245.79 ± 39.53 1.494 ± 0.01D 1.431 ± 0.01A 1.462 ± 0.03
Rataan 4601.52 ± 241.00 4636.87 ± 151.35 1916.28 ± 99.28 1937.28 ± 44.84 1213.84 ± 49.62 1241.70 ± 21.39 1.466 ± 0.03 1.453 ± 0.03
Keterangan : PC = ransum berbasi karbohidrat, PL = ransum berbasis lemak, 0 = tanpa suplementasi vitamin E dan C melalui air minum, 1 = suplementasi vitamin E dan C melalui air minum. Superskrip dengan huruf kecil menunjukkan perbedaan yang nyata (P < 0.05) dan superskrip dengan huruf besar menunjukkan perbedaaan yang sangat nyata (P < 0.01)
52
Konsumsi air minum Minum merupakan salah satu paramater kesehatan ayam broiler karena air memiliki banyak fungsi seperti pelarut vitamin, komponen pengisi sel dan jaringan tubuh, termoregulasi tubuh dan pelarut penting dalam proses metabolisme tubuh. Uji statistik menunjukkan bahwa perlakuan tidak berpengaruh nyata terhadap total konsumsi air minum selama 21 hari penelitian (Tabel 9) namun berkorelasi positif dengan konsumsi pakan selama penelitian. Ross (2009) menyarankan konsumsi air minum pada suhu pemeliharaan 21 oC sebesar 1.6 – 1.8 kali konsumsi pakan, sedangkan nilai konsumsi air minum selama penelitian dengan suhu 25 – 30 oC menjadi sebesar 2.3 – 2.4 kali konsumsi pakan. Hal ini normal mengingat suhu lingkungan yang lebih tinggi akan menyebabkan ayam lebih banyak untuk mengkonsumsi air minum membantu melepaskan panas tubuhnya sebagai usaha untuk menyeimbangkan suhu tubuh dengan suhu lingkungan. Umur ayam, status kesehatan ayam, tingkat produktivitas ayam, jumlah tempat air minum, jenis tempat air minum dan kualitas air minum adalah faktorfaktor yang mempengaruhi konsumsi air minum selain suhu lingkungan dan juga konsumsi ransum. Jumlah konsumsi air minum ini akan berdampak pada fungsi air sebagai pelarut beberapa jenis vitamin larut air, pelarut zat-zat nutrisi penting, penyusun struktur jaringan tubuh, termoregulator dan sebagai penanda ketika terjadi gangguan proses metabolisme atau kesehatan pada ayam. Konsumsi ransum Konsumsi ransum merupakan usaha ayam untuk memenuhi kebutuhan energi dan nutrisi selama proses pertumbuhan. Hasil uji statistik konsumsi pakan pada Tabel 9 berbeda nyata (P < 0.01) dengan nilai terbesar pada R2 (1955.88 ± 71.67 g/ekor) yang diikuti oleh R3 (1952.41 ± 43.7 g/ekor), R4 (1922.16 ± 46.53
g/ekor) dan R1 (1836.68 ± 31.08 g/ekor) secara berturut-turut. Hal ini mengindikasikan bahwa adanya sumber energi pakan yang berbeda dan suplementasi vitamin melalui air minum memiliki interaksi dalam mempengaruhi konsumsi ransum. Secara umum pakan berbasis lemak memberikan dampak pada peningkatan konsumsi ransum dibanding pakan berbasis karbohidrat. Nilai konsumsi ransum
53
ini erat kaitannya dengan nilai energi metabolis ransum berbasis lemak yang lebih tinggi dibanding ransum berbasis karbohidrat (Tabel 4). Semakin tinggi nilai energi metabolis ransum maka ayam akan mengkonsumsi ransum lebih rendah. Suplementasi vitamin melalui air minum juga ikut meningkatkan konsumsi ransum dibanding yang tidak diberi suplementasi vitamin melalui air minum. Hal ini mengindikasikan bahwa suplementasi vitamin melalui air minum berdampak positif dalam proses metabolisme nutrisi karbohidrat dan lemak untuk dikonversi menjadi energi. Proses ini berhubungan erat dengan peranan vitamin E dan C sebagai antioksidan untuk menanggulangi stres selama proses pemeliharaan. Mckee et al. (1997) melaporkan bahwa pemberian vitamin C 150 mg/kg ransum mempengaruhi sistem penyimpanan energi di dalam tubuh yang bisa digunakan ketika asupan energi berkurang saat stres panas berlangsung. Kombinasi pemberian vitamin E (240 mg/kg ransum) dengan vitamin C (240 mg/kg ransum) pada puyuh masa pertumbuhan dan produksi telur yang mengalami stres cekaman panas berdampak memperbaiki penampilan produktivitas dan memperbaiki efek negatif dari stres panas (Ipek et al. 2007) Nilai konsumsi ransum berhubungan dengan konsumsi air minum, pertambahan bobot badan dan konversi pakan karena konsumsi ransum diatur oleh pusat lapar dibawah koordinasi hipotalamus yang sama dengan pengaturan konsumsi minum, termoregulasi dan juga sistem hormon (Hafez 1968). Jumlah konsumsi ini akan menghasilkan nilai nutrisi termetabolis yang berhubungan dengan tingkat stres dan ketersediaan enzim-enzim. Pertambahan Bobot Badan Sejumlah ransum yang dimakan akan dimetabolisme untuk menghasilkan pertambahan bobot badan pada ayam broiler. Pertambahan bobot badan meliputi pertambahan daging, tulang dan bulu. Hasil uji statistik menunjukkan bahwa perlakuan tidak mempengaruhi pertambahan bobot badan. Konsumsi ransum yang tinggi tidak langsung berkorelasi positif terhadap pertambahan bobot badan, karena jumlah yang bisa dimetabolisme dan diserap yang akan langsung berdampak pada pertambahan bobot badan, sehinga nilai energi metabolis, retensi nitrogen dan retensi lemak yang tertera pada Tabel 4, lebih berhubungan dengan pertambahan bobot badan dibanding dengan konsumsi ransum. Nilai metabolisme
54
nutrisi erat kaitannya dengan ketersediaan enzim-enzim dan juga status kesehatan (stres) pada ayam. Hafez (1968) mengemukakan bahwa pada saat stres oksidatif akan menghasilkan sintesis lemak dan kolesterol yang meningkat dan sintesis protein yang menurun yang berindikasi pada penampilan ayam broiler. Suhu lingkungan yang kurang nyaman (Gambar 14 dan 15) menyebabkan energi untuk produksi digunakan untuk homeostasis (keseimbangan tubuh), hal ini biasanya dimulai dengan menurunnya konsumsi ransum, menurunnya laju aliran darah dan berkurangnya energi yang dimetabolisme (Mckee et al. 1997). Penurunan pemanfaatan energi untuk produksi akan mempengaruhi pertambahan bobot badan yang dihasilkan. Latshaw & Moritz (2009) mengemukakan bahwa partisi energi netto yang masuk ke dalam tubuh ayam sebagian akan dikonversi menjadi panas tubuh selain untuk kebutuhan produksi dan menjaga aktivitas harian ayam Konversi Ransum Konversi ransum atau yang lebih dikenal sebagai FCR (feed coversion ratio) merupakan hasil pembagian antara pertambahan bobot badan dengan konsumsi ransum. Hasil uji statistik konversi ransum menunjukkan hasil yang berbeda nyata (P < 0.01) seperti tertera pada Tabel 9. Nilai konversi ransum terbaik secara berurutan ialah R4 (1.431 ± 0.01), R1 (1.439 ± 0.03), R3 (1.475 ± 0.02) dan R2 (1.4394± 0.01). Nilai ini menunjukkan efisiensi penggunaan nutrisi ransum untuk diubah menjadi komponen daging. Hasil ini dipengaruhi oleh komposisi sumber energi dan tingkat kecernaan ransum, status stres dan kesehatan ayam serta suhu dan kelembaban lingkungan pemeliharaan. Komposisi lemak ransum mempengaruhi nilai konversi ransum, dimana ransum PL lebih baik dibanding ransum PC (Tabel 9). Hal ini disebabkan oleh ransum PC memiliki sumber energi (glukosa dari karbohidrat) yang lebih cepat dicerna dibanding PL sehingga heat increment yang dihasilkan lebih tinggi dan menyebabkan pelepasan panas di dalam tubuh terhambat yang berdampak pada penurunan konsumsi ransum (Tabel 9), peningkatan oksigen dalam darah yang ditandai dengan peningkatan konsentrasi hemoglobin darah (Tabel 5), peningkatan konsentrasi trigliserida dan kolesterol darah (Tabel 6) serta peluang
55
terjadinya stres yang bisa diperparah oleh kondisi lingkungan pemeliharaan yang kurang nyaman Status stres dan kesehatan ayam bisa diwakili oleh komponen dan susunan kimia darah serta status organ hati. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa selama proses penelitian ayam berada dalam kondisi sehat dengan tingkat kenyaman yang berbeda (Gambar 14 dan 15). Tingkat kenyamanan yang berbeda dimulai dengan adanya pengaruh lingkungan yang diakibatkan oleh perbedaan suhu nyaman (termonetral) dengan suhu lingkungan pemeliharaan, sehingga hipotalamus akan mempengaruhi pusat lapar, pusat minum, pusat termoregulasi dan keseimbangan sistem hormon. Dampak dari stress ini akan menyebabkan suplai dan pemanfaatan nutrisi menjadi berubah dibanding dengan kondisi normal seperti dikemukakan oleh Mckee et al. (1997). Stres lingkungan juga berdampak pada stres oksidatif yaitu stres yang diakibatkan oleh banyak molekul reaktif (radikal bebas) yang diartikan sebagai molekul yang mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan pada orbit terluarnya (Aruoma 1999; Miller et al. 1993). Radikal
bebas
berkemungkinan mengambil partikel dari molekul lain kemudian menimbulkan senyawa yang abnormal dan memulai reaksi berantai yang dapat merusak sel-sel dengan menyebabkan perubahan yang mendasar pada materi genetis serta bagianbagian sel penting lainnya (Yashikawa & Naito 2002). Stres ini dimulai dari tingkat kerusakan sel, jaringan, organ dan ayam itu sendiri. Salah satu organ yang menjadi target dari stres oksidatif ialah organ hati yang ditandai dengan senyawa malonaldehid (MDA) yang lebih tinggi (Tabel 7). MDA merupakan
senyawa yang terbentuk akibat reaksi radikal bebas
dengan PUFA yang mengandung sedikitnya tiga ikatan rangkap. Reaksi ini diakibatkan oleh radikal bebas, yaitu suatu atom atau molekul yang memiliki satu atau lebih elektron tak berpasangan dan sangat reaktif (Halliwell & Guteridge 1989). Hati merupakan organ yang kaya akan poly unsaturated fatty acid (PUFA) sehingga menjadi salah satu target perusakan dari radikal bebas, dan jika kandungan MDA dalam hati berlebih akan ditransfer menuju ke darah dan organ lainnya. Kerusakan hati akan berdampak sangat signifikan terhadap metabolisme asam lemak dan biosintesis kolesterol. Kolesterol dan asam lemak sangat erat
56
kaitannya dengan sistem hormon tubuh yang mengatur berbagai macam reaksi metabolisme nutrisi. Hal ini sesuai dengan yang dikemukakan oleh Takahashi dan Akiba (1999), bahwa pemberian lemak teroksidasi pada ayam broiler, nyata menurunkan konsumsi ransum, pertambahan bobot badan, penurunan level vitamin C dan αtokoferal plasma darah. Hasil tersebut ternyata diikuti dengan meningkatnya MDA plasma darah sebagai indeks dari cekaman. Selanjutnya penelitian Taniguchi et al. (1999) membuktikan bahwa stres oksidatif karena pemberian hormon kortison, dapat meningkatkan kandungan lemak abdomen, MDA dan kolesterol plasma ayam broiler. Nilai konversi ransum ikut dipengaruhi oleh kualitas fisik pakan yang dihasilkan seperti disajikan pada Tabel 10, Nilai kualitas fisik ransum berbasis lemak (PL) memiliki nilai pellet durability index (PDI) dan kadar debu yang lebih baik dibanding dengan ransum berbasis karbohidrat (PC). Nilai PDI menggambarkan kemampuan pellet dalam menahan benturan, nilai PDI yang tinggi akan memberikan kadar debu yang lebih rendah baik dan akan berdampak pada income over feed and chick cost (IOFC : Tabel 11) karena dapat mengurangi jumlah sisa ransum yang terbuang selama proses produksi dan pemberian di kandang, salah satu parameter terjadinya proses gelatinisasi pati yang terkandung dalam ransum lebih baik, memperbaiki kecernaan ransum, mengurangi stres pada ayam dan memperbaiki nilai konversi ransum. Tabel 10 Temperatur dan nilai amper mesin pellet serta nilai kualitas fisik ransum PC PL
Suhu (oC) 79.67 ± 1.15 77.33 ± 1.53
Amper (A) 26.67 ± 0.58 20.67 ± 0.58
Debua (%) 2.76 ± 0.01 2.33 ± 0.01
PDI (%) 82.15 ± 1.64 88.10 ± 2.09
Keterangan : PC (ransum berbasi karbohidrat), PL (ransum berbasis lemak); PDI = Pellet Durability Index; a ukuran partikel ≤ 0.3 mm
Nilai suhu dan amper pada proses produksi pellet merupakan salah satu parameter efisiensi proses produksi ransum yang akan berdampak pada harga jual ransum dan nilai IOFC, karena kedua parameter ini berkaitan erat dengan konsumsi energi oleh mesin produksi. Kedua ini juga berkaitan erat dengan kualitas ransum itu sendiri, terutama dalam hal kualitas fisik dan kimia ransum. Suhu yang mencukupi selama proses produksi ransum akan mendukung proses
57
terjadinya gelatinisasi pati yang terkandung di dalam ransum ternak sehingga kualitas fisik ransum bisa lebih baik dan tingkat kecernaan nutrisi menjadi lebih baik. Lee et al. (2006) mengemukakan bahwa suhu yang optimal sangat menentukan
terjadinya
peningkatan
kecernaan
nutrisi
bahan
ransum
meminimalisir kandungan anti nutrisi dan memberikan efek pertumbuhan yang lebih baik, namun suhu yang kurang atau berlebihan justru akan berdampak negatif. Income Over Feed and Chick Cost (IOFC) Nilai IOFC berdasarkan waktu pelaksanaan penelitian disajikan pada Tabel 11. Hasil ini menunjukkan bahwa ransum berbasis lemak (PL) lebih menguntungkan sebesar Rp 292.13 per ekor ayam dibanding dengan ransum PC, dimana hasil ini ditunjang oleh konversi ransum yang lebih baik (Tabel 9), kandungan energi serta retensi nutrisi yang lebih tinggi (Tabel 4). Keuntungan ini menunjang bahwa ransum PL lebih adaptif untuk ayam broiler yang dipelihara pada lingkungan kurang nyaman dan akan lebih efektif ketika diberi suplementasi vitamin E dan C melalui air minum agar penampilannya lebih baik. Tabel 11 Income over feed and chick cost (IOFC) ransum penelitian Harga Jual Ayam Ransum (Rp) PC 16,389.00 PL 16,753.50
Harga Beli DOC (Rp) 4,000.00 4,000.00
Biaya Produksi a (Rp) 11,254.28 11,326.66
IOFC (Rp) 1,134.72 1,426.85
Keterangan : a Meliputi biaya ransum, sekam dan pemeliharaan.
Nilai ini diharapkan bisa mendukung keberlanjutan ketersediaan ransum nasional berbasis bahan baku yang memiliki ketersediaan lokal cukup banyak, dalam hal ini crude palm oil (CPO).
58
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan Ransum berbasis lemak (PL) dapat memberikan nilai keuntungan ekonomis yang lebih baik (IOFC) dan menurunkan nilai total kolesterol dan HDL kolesterol masing-masing sebesar 25.47% dan 20.42% pada ayam broiler. Suplementasi vitamin E dan C melalui air minum diperlukan untuk ayam broiler yang menggunakan sumber energi ransum berbasis lemak (R4) untuk memperbaiki konsumsi dan konversi ransum ayam broiler yang dipelihara pada lingkungan yang kurang nyaman.
Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap sistem bioenergetik ayam broiler dengan berbagai dosis suplementasi vitamin E dan C yang berbeda melalui air minum.
DAFTAR PUSTAKA Allen PC, Danforth HD, Augustine PC. 1998. Dietary modulation of avian coccidiosis. Int J Parasitol 28 : 1131 – 1140. Apata DF. 2011. Effect of Terminalia catappa fruit meal fermented by Aspergillus niger as replacement of maize on growth performance, nutrient digestibility and serum biochemical profile of broiler chickens. Biotechnol Res Int, Vol (2011) : 1 – 6. Aruoma OI.1999. Free radicals, antioxidants and international nutrition. Asia pacific. J Clin Nutr 8 :53-63. St. Angelo. 1992. Lipid Oxidation in Food. American Chemical Society, New York Apriyantono A, Fardiaz D, Puspitassari NL, Sedarnawati, Budiyono S. 1989. Analisis Pangan. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Pusat Antar Universitas dan Gizi. Institut Pertanian Bogor. Beynen AC 1980. Animal models for cholesterol metabolism studies, In A.C beynen ed. New Developments in Biosciences; their Implications for Laboratory Animal Science. Martinus Nijhoff Publishers, Boston. Pp. 279294. [BMKG] Badan Metereolog, Klimatologi dan Geofisika. 2011. Prakiraan cuaca http://www.bmkg.go.id/BMKG_Pusat/Meteorologi/cuacaIndonesia. indo.bmkg [17 Sep 2011]. Borges SA, Fischer da Silva AV, Ariki J, Hooge DM, Cummings KR. 2003a. Dietary electrolyte balance for broiler chickens under moderately high ambient temperatures and relative humilities. Poultry Sci 82 : 301 – 308. Borges SA, Fischer da Silva AV, Ariki J, Hooge DM, Cummings KR.. 2003b. Dietary electrolyte balance for broiler chickens exposed to thermo neutral or heat stress environments. Poultry Sci 82 : 428 – 435. Bounous DI, Stedman NL. (2000). Normal Avian Hematology: Chicken and Turkey. Feldman BF, Zinkl JG, Jain NC, eds. Schalm’s Veterinary Hematology, 5th ed. Philadelphia, Lea & Febiger : 1147 – 1154 . Brenes AA et al. 2008. Effect of grape pomace concentration and vitamin E on digestibility of polyphenols and antioxidant activity in chickens. Poultry Sci 87 : 307 – 316. Briggs JL, Maier DE, Watkins BA, Behnke KC. 1999. Effect of ingredients and processing parameters on pellet quality. Poultry Sci 78 : 1464 – 1471. Cha BJ et al. 2006. Effects of supplementation of β-glucan on the growth performance and immunity on broilers. Res Vet Sci 80 : 291 – 298. Coelho M. 1994. Vitamin stability in premix and feeds : A practical approach in ruminants diets. Proceeding 13th Annual Florida Ruminant Nutrition Symposium : 127 – 145.
61
62
Conti M, Sutherland MD. 1991. Improve flurometric determination of malonaldehyde. J Clin Chem. 37 : 1273-1275. Dalimartha S. 2000. Pegagan Kecil, mungil dan Sakti. Nirmala, Majalah Hidup Sehat Alami. 10/11/Oktober : 57-59. Dasilva ICM et al. 2009. Broiler chicken responses to immunological stimuli as mediated by different levels of vitamin E in the diets. J Appl Poult Res 18 : 752 – 760. Dauqan EMA, Aminah HAS, Adullah, Kasim ZM. 2011.Fatty acid composition of four different vegetable oil (red palm oil, palm olein, corn oil and coconut oil) by gas chromatography. 2nd International conference on chemistry and chemical engineering. IACSIT Press, Singapore. IPCBEE vol. 14 : 31 – 34. Dellman HD, Brown EM. 1989. Textbook of Veterinary Histology. Ed ke-3 Jakarta. Iowa State University. Ames Iowa. Terjemahan. UI Press. Drackley JK. 2000. Lipid metabolism. Di dalam : D’Mello JPF, editor. Farm Animal Metabolism and Nutrition. Ed ke-1. Wallingford : CABI International. hlm 97 – 119. DSM. 2007. Vitamin Basics : The Fact about Vitamins in Nutrition. Ed ke-3. Germany. Enser M. 1984. The Chemistry, Biochemistry and Nutritional Importance of animal Fats in Animal Nutrition. Wiseman J, editor. London: Butterworths. Fransdson RD 1992. Anatomi dan Fisiologi Ternak. Edisi IV. Penerjemah B. Srigandono dan K . Praseno. Gajah Mada university Press, Yogyakarta. Ganong WF. 1995. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Ed ke-14. Jakarta Terjemahan. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Girindra A. 1988. Biokimia I. Jakarta: PT Gramedia Pustaka Utama Gowda NKS, Ledoux DR, Rottinghaus GE, Bermudez AJ, Chen YC. 2009. Antioxidant efficacy of curcuminoids from turmeric (Curcuma longa L.) powder in broiler chickens fed diets containing aflatoxin B1. Br J Nutr 102 : 1629 – 1634. Gropper SS, Smith JL, Groff JL. 2009. Advanced Nutrition and Human Metabolism. 5th Edition. Wadsworth Cengage Learning, Belmont USA Gross WB, Dunnington EA, Siegel PB. 1984. Environmental Effects on the will Being of Chickens from Lines Selected for Responses to Sosial Strife. Arch. Geflugelled. 48 : 3-7. Gross WB, Siegel HS. 1983. Evaluation of Heterofil/Limphocyte Ratio as Measure of Stress Chickens. Avi Dis 27 : 972-979. Guyton AC. 1986. Textbook of Medical Physiology. Ed ke-5. Jakarta. Terjemahan. EGC.
63
Habibie A. 1993. Pengaruh cekaman panas terhadap kebutuhan vitamin C pada ayam petelur komersial yang sedang berproduksi [disertasi]. Bogor : Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Hafez ESE. 1968. envirponmental effects on animal productivity, in Adaptation of domestic animal. Edited by E.S.E hafez, Washingtone State University, Pullman-Washingtone. Halliwell B, Gutteridge JMC. 1989. Free Radicals in Biology and Medicine, Ed ke-2. Oxford University Press, New York. Herman S. 1991. Pengaruh gizi terhadap penyakit kardiovasculer. Cermin Dunia Kedokteran. 73: 12-16. Hesta M et al. 2009. The effect of vitamin C supplementation on healthy dogs on antioxidative capacity and immune parameters. J Anim Physiol Ani Nutr 93 : 26 – 34. Ipek A, Canbolat O, Karabulut A. 2007. The effect vitamin E and vitamin C on the performance of Japanese quail (Coturnix Coturnix Japonica) reared under heat stress during growth and egg production period. Asian Aust J Anim Sci 20 (2) : 252 – 256. Klasing KC. 1998. Nutritional modulation of resistance to infectious diseases. Poultry Sci 77 : 1119 – 1125. Kusnadi E. 1990. Pengaruh pemberian megnesium sebagai penangkal cekaman suhu terhadap respons fisiologis kelinci (Oryctolagus cuniculus) [thesis]. Bogor : Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Kusnadi E. 1993. Pengaruh penambahan magnesioum terhadap respons fisiologis ayam pedaging. J Penelitian Andalas 13:56-69. Latshaw JD, Moritz JS. 2009. The partitioning of metabolizable energy by broiler chickens. Poultry Sci 88 : 98 – 105. Latshaw JD. 2008. Daily energy intake of broiler chickens in altered by proximate nutrient content and form of the diet. Poultry Sci 87 : 89 – 95. Lehninger AL. 2005. Principles of Biochemistry. 4th Edition. W.H. Freeman Publisher. USA Lee HS et al. 2007. Comparison of laboratory analytical value and in vivo soybean meals quality on pigs by employing soyflakes heat-treated under different conditions. J Ani Feed Sci Tech 134 : 337 – 346 . Lopez G, Lesson S. 2008. Assessment of nitrogen correction factor in evaluating metabolizable energy of corn and soybean meal in diets for broiler. Poultry Sci 87 : 298 – 306. Mashaly MM et al. 2004. Effect of heat stress on production parameters and immune responses of commercial laying hens. Poultry Sci 83 : 889 – 894. Mattjik AA, Sumertajaya IM. 2002. Perancangan Percobaan dengan Aplikasi SAS dan Minitab, Jilid I. IPB Press. Bogor.
64
Maxwell MH. 1993. Avian blood leucocytes responses to stress. Poultry Sci 49 (1) : 39-43. Mayes PA 1995. Sintesis Pengangkutan dan Ekskresi Kolesterol. Biokimia Harper (Harper’s Biochemistry). Edisi 22. Alih Bahasa: dr. Andry Hartono. Penerbit Buku Kedokteran EGC. Hal 303-312. McDowell LR. 2006. Vitamin nutrition of livestock animals : overview from vitamin discovery to today. Can J Anim Sci 86 : 171 – 179. Mckee JS, Harrison PC, Riskowski L. 1997. Effects of supplemental ascorbic acid on the energy conversion of broiler chicks during heat stress and feed withdrawal. Poultry Sci 76 : 1278 – 1286. Miller JK, Slebodzinska EB, Madsen FC. 1993. Oxidative stress, antioxidant, and animal function. J Dairy Sci 76 : 2812 - 2823. Muchtadi D, Sri PN, Astawan M. 1993. Metabolisme Zat Gizi. Sumber, Fungsi dan Kebutuhan bagi Tubuh Manusia. Jilid II. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta. Hal 48-50. Muhammad I. 2009. Efek antiokasidan vitamin C terhadap tikus (Rattus nevergicus L) jantan akibat pemaparan rokok. (tesis). Bogor : Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Nielsen KS. 1997. Animal Physiology, Adaptation and Environmental. Ed. Ke-5. New York. Cambridge University Press. Niu ZY, Liu FZ, Yan QL, Li WC. 2009. Effects of different levels of vitamin E on growth performance and immune responses of broilers under heat Stress. Poultry Sci 88 : 2101 – 2107. Nguyen P et al. 2008. Liver lipid metabolism. J Anim Physiol Anim Nutr 92 : 272 – 283. Noda N, Wakasugi H. 2001. Cancer and oxidative stress. JMAJ 44 : 529 – 534. Ohkawa B, Gutterdge JMC. 1989. Assays for lipid peroxide in animal tissue by thiobarbituric acid reaction. Anal Biochem 95 : 351-358. Pantazis PA et al. 2010. Curcumin and turmeric attenuate arsenic-induced angiogenesis in ovo. Alternatives Therapies 16 (2) : 12 – 14. Piliang WG, Djojosoebagio SAH. 2002. Fisiologi Nutrisi. Vol I. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi. Bogor : Pusat Antar Universitas, Institut Pertanian Bogor. Plavik I, Was E, Saklan D, Barbatov I, Hurwitz S. 1997. The response of broiler chickens and turkey poults to dietary energy supplied either by fat or carbohydrate. Poultry Sci 76 : 1000 – 1005. Post J, Rebel MJ, Huurne HM. 2002. Automated Blood Cell Count : A sensitive and reliable method to study corticosterone-related stress in broilers. Poultry Sci 82 : 591-595. Pramono S. 1992. Profil Kromatogram ekstrak herba pegagan yang berefek antihipertensi. Di dalam: Warta Tumbuhan Obat Indonesia 1 : 37 - 39.
65
Puthpongsiriporn U, Scheideler, Sell JL, Beck MM. 2001. Effects of vitamin E and C supplementation on performance, in vitro lymphocyte proliferation, and antioxidant status of laying hens during heat stress. Poultry Sci 80 : 1190 – 1200. Ross. 2009. Broiler Management Manual. Alabama : Aviagen Roy S, Maiti SK, Aliand SL, Sharda R. 1996. Study on Efficacy of Zeetress, an antistress in layers during summer. Indian Vet J 73 : 662 – 664. Sahin N, Orhan C, Tuzcu M, Sahin K, Kucuk O. 2008. The effect of tomato powder supplementation on performance and lipid peroxidation on quail. Poultry Sci 87 : 276 – 283. Sahin K, Kucuk O, Sahin N, Gursu MF. 2002. Optimal dietary concentration of vitamin E for alleviating the effect of heat stress on performance, thyroid status, ACTH and some serum metabolite and mineral concentration in broiler. Vet Med-Czech 47 (4) : 110 – 116. Sayogya PA. 2002. Efek senyawa antioksidan biological response modifier (BRMTM) terhadap kadar lipid peroksida hati tikus [skripsi]. Bogor : Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Sibbald IR. 1980. A new technique for estimating the energy metabolizable content of feeds for poultry. International Development Research Centre. Canada. Siegel HS. 1980. Physiological stress in birds. Bioscience 30 (8) : 529 – 533. Sturkie PD. 1976. Avian Physiology. Ed ke-3. New York. Spinger Verlag Sturkie PD, Grimminger P. 1976. Blood : Physical Characteristic, Forme Elements, Haemoglobin and Coagulation. Ed-ke 3. Sturkie PD (Editor). Avian Physiology. New York. Springer Verlag. Sugito, Manalu W, Astuti DA, Handharyani E, Chairul. 2007. Morfometrik usus dan performa ayam broiler yang diberi cekaman panas dan ekstrak nheksana kulit batang “jaloh” (Salix tetrasperma Roxb). Media Peternakan, 30 (3) : 198 – 206. Supari, F. 1996. Radikal bebas dan Patofisiologi beberapa penyakit. Di dalam Prosiding Seminar Senyawa dan Sistem Pangan, Reaksi Biomolekuler, dampak terhadap Kesehatan dan Penangkalan. Kerjasama Pusat studi pangan dan Gizi-IPB dengan Kedutaan Beasr Perancisd, Jakarta. Supartondo. 2002. Antioksidan dan proses menua. Di dalam: Penatalaksanaan Pasien Geriatri/usia Lanjut secara Terpadu dan Paripurna. Prosiding Temu Ilmiah Geriatri 2002, Jakarta 25 Mei 2002. Pusat informasi dan Penerbitan bagian Ilmu Penyakit Dalam, Fak Kedokteran UI. Jakarta. Hlm 1-6 Swenson MJ. 1977. Physiology of Domestic Animals.Ed ke-9. Comstoc Publishing Associates. Comell University Press, Itacha. Takahashi K, Akiba Y. 1999. Effect of oxidized fat on performance and some physiological response in broiler chickens. J Poultry Sci 6 : 304 – 310.
66
Taniguchi N, Ohsutka A, Hayashi K, 1999. effect of dietary corticosteron and vitamin E on growth and oxidative stress in broiler chickens. Anim Sci J 70 : 105 – 200. Tarmudji. 2005. Asites pada ayam pedaging. Wartazoa 15 (1) : 38 – 48 The European Pharmacopoeia. 2005. Edisi ke 5. hlm 1025 – 1026. Tillman, AD, Hartadi H, Reksohadiprodjo S, Prowirokusumo S, Lebdosukodjo L. 1991. Ilmu Makanan Ternak Dasar. Gajah Mada University Press. Fakultas Peternakan UGM. Yogyakarta. Hal 158-159. Tizzard I. 1987. Immunologi Veteriner. Surabaya. Ed ke-3. Terjemahan Airlangga University Press. Wang L et al. 2008. Effects of Forsythia suspensa extract on growth performance, nutrient digestibility and antioxidant activities in broiler chickens under high ambient temperature. Poultry Sci 87 : 1287 – 1294. Yagi K. 1994. Lipid peroxides in hepatic, gastrointestinal, and pancreatic disease. Free Radicals in Diagnostic Medicine. Plenum Press, New York Yokode M, Kita T. 2002. Aging and Oxidative stress. JMAJ 45 : 277 – 282. Yoshikawa T, Naito, Y. 2002. What is oxidative stress. JMAJ 45 : 271 – 276. Zulkifli I, Siegel TB. 1995. Is There of Positive Side to Stress. Poultry Sci 51 : 63 – 76.
67
Lampiran 1 Foto – foto pelaksanaan penelitian 1. Proses Fumigasi Kandang
2. Kandang Penelitian
68
3. Periode Brooder
69
4. Pen perlakuan
70
Lampiran 2 Kurva standar MDA No 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Konsentrasi (ρmol/50 ɥ L) 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 5000
Absorbansi 532 nm 0.047 0.058 0.084 0.110 0.137 0.169 0.204 0.226 0.298
71
Lampiran 3 Analisis ragam pertambahan bobot badan Sumber Keragaman PAKAN VITAMIN PAKAN*VITAMIN Galat Total
DB 1 1 1 12 15
JK 2934.930625 5036.031225 1222.201600 14796.29825 23989.46170
KT 2934.930625 5036.031225 1222.201600 1233.02485
F 2.38 4.08 0.99
P 0.1488 0.0662 0.3391
JK 0.00062500 0.00010000 0.01102500 0.00385000 0.01560000
KT 0.00062500 0.00010000 0.01102500 0.00032083
F 1.95 0.31 34.36
P 0.1881 0.5869 <.0001
Kontras SS 0.00661250 0.00320000 0.00011250 0.00061250 0.00451250
KT 0.00661250 0.00320000 0.00011250 0.00061250 0.00451250
F 20.61 9.97 0.35 1.91 14.06
P 0.0007 0.0082 0.5647 0.1922 0.0028
Lampiran 4 Analisis ragam konversi pakan Sumber Keragaman PAKAN VITAMIN PAKAN*VITAMIN Galat Total
DB 1 1 1 12 15
Uji lanjut kontras orthogonal Variabel dependen Kontras DB PC0 VS PC1 1 PC0 VS PL0 1 PC0 VS PL1 1 PC1 VS PL0 1 1 PL0 VS PL1
R-Square
Coeff Var
Root MSE
Konversi Pakan Mean
0.753205
1.226837
0.017912
1.460000
Lampiran 5 Analisis ragam hemoglobin Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.49000000 VITAMIN 1 0.20250000 PAKAN*VITAMIN 1 0.64000000 Galat 12 3.74500000 15 5.07750000 Total
KT 0.49000000 0.20250000 0.64000000 0.31208333
F 1.57 0.65 2.05
P 0.2341 0.4362 0.1777
72
Lampiran 6 Analisis ragam hematokrit Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 3.06250000 VITAMIN 1 3.06250000 PAKAN*VITAMIN 1 7.56250000 Galat 12 31.75000000 15 45.43750000 Total
KT 3.06250000 3.06250000 7.56250000 2.64583333
F
Lampiran 7 Analisis ragam eritrosit Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.00250000 VITAMIN 1 0.01000000 PAKAN*VITAMIN 1 0.01000000 Galat 12 0.31500000 15 0.33750000 Total
KT 0.00250000 0.01000000 0.01000000 0.02625000
F
Lampiran 8 Analisis ragam SGPT Sumber Keragaman DB JK KT PAKAN 1 14.06250000 14.06250000 VITAMIN 1 5.06250000 5.06250000 PAKAN*VITAMIN 1 7.56250000 7.56250000 Galat 12 91.7500000 7.6458333 15 118.4375000 Total Lampiran 9 Analisis ragam trigliserida Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.00175659 VITAMIN 1 0.07254124 PAKAN*VITAMIN 1 0.18246408 Galat 12 1.59094701 15 1.84770892 Total
KT 0.00175659 0.07254124 0.18246408 0.13257892
1.16 1.16 2.86
P 0.3031 0.3031 0.1167
0.10 0.38 0.38
P 0.7629 0.5486 0.5486
F 1.84 0.66 0.99
P 0.2000 0.4317 0.3396
F 0.01 0.55 1.38
P 0.9103 0.4737 0.2635
73
Lampiran 10 Analisis ragam total kolesterol Sumber Keragaman DB JK KT PAKAN 1 5220.062500 5220.062500 VITAMIN 1 473.062500 473.062500 PAKAN*VITAMIN 1 150.062500 150.062500 Galat 12 1944.750000 162.062500 15 7787.937500 Total
F 32.21 2.92 0.93
P 0.0001 0.1133 0.3549
Contrast
DF
Contrast SS
Mean Square
F Value
Pr > F
PC vs PL
1
5220.062500
5220.062500
32.21
0.0001
0 vs 1
1
473.062500
473.062500
2.92
0.1133
Lampiran 11 Analisis ragam HDL kolesterol Sumber Keragaman DB JK KT PAKAN 1 885.0625000 885.0625000 VITAMIN 1 232.5625000 232.5625000 PAKAN*VITAMIN 1 18.0625000 18.0625000 Galat 12 1394.250000 116.187500 15 2529.937500 Total
F 7.62 2.00 0.16
P 0.0173 0.1826 0.7003
Contrast
DF
Contrast SS
Mean Square
F Value
Pr > F
PC vs PL
1
885.0625000
885.0625000
7.62
0.0173
0 vs 1
1
232.5625000
232.5625000
2.00
0.1826
Lampiran 12 Analisis ragam LDL kolesterol Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.21999092 VITAMIN 1 0.00019428 PAKAN*VITAMIN 1 0.03185671 Galat 12 1.09735857 15 1.34940048 Total
KT 0.21999092 0.00019428 0.03185671 0.09144655
F 2.41 0.00 0.35
P 0.1469 0.9640 0.5660
74
Lampiran 13 Analisis ragam MDA hati Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 3.3984308E15 VITAMIN 1 2.2741534E14 PAKAN*VITAMIN 1 1.6022631E14 Galat 12 4.3388104E16 15 4.7174177E16 Total
KT 3.3984308E15 2.2741534E14 1.6022631E14 3.6156754E15
Lampiran 14 Analisis ragam kolesterol daging ayam Sumber Keragaman DB JK KT PAKAN 1 274.8135063 274.8135063 VITAMIN 1 102.4650063 102.4650063 PAKAN*VITAMIN 1 120.2860562 120.2860562 Galat 12 984.414475 82.034540 15 1481.979044 Total
F 0.94 0.06 0.04
P 0.3514 0.8062 0.8368
F 3.35 1.25 1.47
P 0.0921 0.2856 0.2492
Lampiran 15 Analisis ragam MDA karkas Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.00233445 VITAMIN 1 0.00110458 PAKAN*VITAMIN 1 0.00000658 Galat 12 0.02597354 15 0.02941916 Total
KT 0.00233445 0.00110458 0.00000658 0.00216446
F 1.08 0.51 0.00
P 0.3195 0.4887 0.9569
Lampiran 16 Analisis ragam % bobot hati Sumber Keragaman DB JK PAKAN 1 0.00003691 VITAMIN 1 0.00001173 PAKAN*VITAMIN 1 0.00000086 Galat 12 0.00014650 15 0.00019599 Total
KT 0.00003691 0.00001173 0.00000086 0.00001221
F 3.02 0.96 0.07
P 0.1077 0.3463 0.7957
