Lampiran 1. Flowsheet Rancangan Percobaan

43

Lampiran 1. Flowsheet Rancangan Percobaan Furosemida

Sifat Fisikokimia Serbuk hablur berwarna putih s/d kekuningan dan tidak berbau Praktis tidak larut dalam air pKa 3,9 Log P 0,74 Kelarutan 0,01 (mg/ml) Panjang gelombang 275 nm Titik lebur 206oC

Penelitian yang telah dilakukan antara lain : 1. Laju Penguraian Furosemida Dalam Suasana Asam (Joshita D.,1991) 2. Uji Bioekivalensi Tablet Furosemida Generik dan Nama Dagang (Doharni Tanjung,2001) 3. Pengaruh Perbedaan pH Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Duodenum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Siregar,2006) 4. Pengaruh Perbedaan pH Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Matondang,2006) 5. Pengaruh Perbedaan pH Terhadap Laju Absorpsi Furosemida pada Ileum Terbalik (Everted sac) Kelinci (Panggabean, 2006)

absorpsi furosemida pada intestine kelinci paling tinggi dalam jejunum pada pH 6,0. Proses absorpsi yang terjadi selain difusi pasif kemungkinan juga terjadi mekanisme absorpsi lain

Faktor yang mempengaruhi transpor aktif antara lain : 1. Molekul (senyawa) ditranspor dari daerah yang mempunyai perbedaan potensial kimia yang rendah menuju yang lebih tinggi. 2. Hasil metabolisme senyawa akan mengganggu transpor. 3. Kecepatan transpor akan mengalami penjenuhan apabila konsentrasi dari senyawa meningkat. 4. Sistem transpor umumnya memperlihatkan struktur kimia spesifik. 5. Senyawa kimia dengan struktur yang hampir sama akan bekerja sebagai kompetitif inhibitor.

Pengaruh Perbedaan Konsentrasi Terhadap Laju Absorpsi Tablet Furosemida Generik Pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci

Dilakukan melalui proses Uptake

Variasi waktu dan Konsentrasi tetap

Variasi Konsentrasi dan Waktu tetap

Diukur secara Spektrofotometri UV (277,0 nm)

Diukur secara Spektrofotometri UV (277,0 nm) Diperoleh hasil V maks dan Km melalui Kurva Lineweaver -Burk

Diperoleh Hasil AUC, C maks, dan t maks

Kesimpulan

Universitas Sumatera Utara

44

Lampiran 2. Contoh Perhitungan Kadar Furosemida Baku 1. Pembakuan NaOH 0,1 N No

Berat Kalium Biftalat (mg)

Volume Titrasi(ml)

1.

151

8,00

2.

152

7,95

3.

152

8,15

Perhitungan : N

=

mgKaliumBiftalat VxBEKaliumBiftalat

N1

=

151 = 0,0924 N 8,00 x 204,2

N2

= 0,0936 N

N3

= 0,0913 N

Dihitung harga N rata-rata dan deviasi (d) Nr 1

=

N1 + N 2 0,0924 + 0,0936 = = 0,093N 2 2

d1

=

N1 − Nr1 x100% = 0,6451% Nr1

Nr 2 = 0,0918 N dengan d 2 = 0,5988 % Nr 3 = 0,0924 N dengan d 3 = 1,24 % Maka, normalitas NaOH adalah harga N rata-rata dengan deviasi terkecil yaitu d 2 = 0,5988 % dengan N = 0,0918 N.


45

2. Penetapan Kadar Furosemida Baku No.

Berat Sampel (mg)

Volume titrasi (ml)

1.

606

19,75

2.

607

19,85

3.

605

19,80

Contoh Perhitungan : Kadar (K) =

K1 =

VxNxBE x100% beratsampel

19,75mlx0,0918 Nx330,74 x100% = 98,9518 % 606

K2 = 99,2890 % K3 = 99,3663 % Dihitung harga K rata-rata dan deviasi (d) Kr 1

=

K1 + K 2 99,9518% + 99,2890% = = 99,1204% 2 2

d1

=

K1 − Kr1 x100% = 0,1701% Kr1

Kr 2 = 99,1590 % dengan d 2 = 0,2090 % Kr 3 = 99,3276 % dengan d 3 = 0,0389 % Maka, kadar furosemida baku adalah harga K rata-rata dengan deviasi terkecil yaitu d 3 = 0,0389 % dengan K = 99,3276 %.


46

Lampiran 3. Flowsheet Pembuatan Larutan Induk Baku Furosemida dalam Dapar Fosfat pH 6,0 Isotonis Furosemida baku

Dikeringkan pada suhu 105°C selama 3 jam Ditimbang seksama 50,0 mg Dimasukkan secara kuantitatif kedalam labu tentukur 100 ml. Ditambah tetes demi tetes NaOH 0,1 N sampai serbuk larut. Dicukupkan dengan dapar posfat pH 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Larutan Induk Baku Konsentrasi 500 mcg/ml


47

Lampiran 4. Flowsheet Penentuan λ Maksimum Furosemida dalam Dapar Fosfat pH 6,0 Isotonis Larutan Induk Baku

Dipipet 0,75 ml Dimasukkan dalam labu tentukur 50 ml Dicukupkan dengan dapar posfat pH 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Diukur pada panjang gelombang 230 – 340 nm. Panjang Gelombang maksimum


48

Lampiran 5. Penentuan Kurva Serapan Furosemida Baku dalam Larutan Dapar Fosfat pH 6,0 Isotonis


49

Lampiran 6. Flowsheet Pembuatan Kurva Kalibrasi Furosemida Baku dalam Dapar Fosfat pH 6,0 Isotonis Larutan Induk Baku Dipipet masing-masing 0,2; 0,25; 0,30; 0,35; 0,55; 0,75; 0,95; 1,15 ml atau setara dengan konsentrasi 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5; 3,0; 3,5; 5,5; 7,5; 9,5; 11,5 mcg/ml. Dimasukkan dalam labu tentukur 50 ml. Dicukupkan dengan dapar fosfat pH 6,0 isotonis sampai dengan garis tanda Diukur pada panjang gelombang maksimum 277,0 nm. Absorbansi


50

Lampiran 7. Penentuan Persamaan Regresi dan Kurva Kalibrasi Furosemida Baku dalam Larutan Dapar Fosfat pH 6,0 Isotonis Konsentrasi (mcg/ml) 2,0 2,5 3,0 3,5 5,5 7,5 9,5 11,5

I 0,1285 0,1407 0,1782 0,2096 0,3306 0,4536 0,5829 0,7113

Konsentrasi (mcg/ml) (X) 0,0 2,0 2,5 3,0 3,5 5,5 7,5 9,5 11,5 ∑X = 45,0000

II 0,1168 0,1495 0,1826 0,2122 0,3464 0,4738 0,5974 0,7241

Absorbansi III 0,1245 0,1575 0,1902 0,2203 0,3547 0,4816 0,6191 0,7473

Rata-rata Absorbansi (Y) 0,0000 0,1195 0,1476 0,1797 0,2100 0,3391 0,4679 0,5960 0,7244 ∑Y = 2,7842

IV 0,1189 0,1489 0,1735 0,2048 0,3348 0,4683 0,5931 0,7314

X2 0,0000 4,0000 6,2500 9,0000 12,2500 30,2500 56,2500 90,2500 132,2500 ∑X2 = 340,5000

V 0,1119 0,1417 0,1753 0,2045 0,3314 0,4644 0,5891 0,7108

VI 0,1165 0,1471 0,1786 0,2087 0,3365 0,4656 0,5942 0,7216

Y2 0,0000 0,0143 0,0218 0,0323 0,0441 0,1150 0,2189 0,3552 0,5248 ∑Y2 = 1,3263

Rata-rata Absorbansi 0,1195 0,1476 0,1797 0,2100 0,3391 0,4679 0,5960 0,7244

SD 0,0060 0,0061 0,0060 0,0058 0,0095 0,0094 0,0124 0,0137

XY 0,0000 0,2390 0,3689 0,5392 0,7350 1,8648 3,5091 5,6616 8,3307 ∑XY = 21.2486

Persamaan garis regresi : Y = aX + b a=

n ∑ XY − ∑ X . ∑ Y n ∑ X 2 − (∑ X ) 2

a=

9(21,2486) − (45)(2,7842) 9(340,500) − (45) 2

a = 0,0634

b=

∑Y − a ∑ X n

b=

(2,7842) − (0,0634)(45) 9

b = - 0,0079


51

Jadi persamaan regresi furosemida dalam larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis adalah : Y = 0,0634X – 0,0079 Nilai koefisien korelasi (r) = 0,9998

Absorbansi rata-rata (nm)

0.800

y = 0.0634x - 0.0079 R2 = 0.9998

0.700 0.600 0.500 0.400 0.300 0.200

Data : rata-rata ± SD n=6

0.100 0.000 0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

14.0

konsentrasi (mcg/ml)


52

Lampiran 8. Flowsheet Pembuatan Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci

Kelinci jantan

Berat 1,5 - 2 kg. Dipuasakan selama 20-24 jam Dianastesi dengan eter sampai pingsan Perutnya dibuka dan ususnya dikeluarkan Dibersihkan dari jaringan ikat, pembuluh darah halus dan jaringan saraf

Usus bersih Dikanulasi pada jarak 25 cm dari pylorus. Bagian atas jejunum diukur 10 cm dan diikat dgn benang digunakan sebagai kontrol Bagian bawahnya diukur 10 cm diikat dan dilakukan sebanyak 3 kali, digunakan untuk percobaan Dipotong pada setiap bagian tetapi pada salah satu ujung tetap terikat. Potongan usus Isinya dibersihkan dengan cara dicelupkan dalam larutan NaCl dingin Dibalik menggunakan batang pengaduk berpenampang 2 mm. Dilepaskan dari batang pengaduk dan dicelupkan kembali dalam larutan NaCl dingin.

Usus terbalik


53

Lampiran 9. Flowsheet Penentuan Pola Penembusan Membran oleh Tablet Furosemida Generik dengan Berbagai Konsentrasi pada Jejunum Terbalik (Everted sac) Kelinci 10 cm potongan jejunum terbalik

Ujung bagian atas dihubungkan dan diikat pd kanula dengan panjang 7 cm.

Ke dalam kantong usus diisi 2 ml cairan serosa berupa larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis Dimasukkan cairan mukosa pada bagian atas (sebagai kontrol) berupa larutan dapar fosfar pH 6,0 isotonis tanpa mengandung bahan obat dan bagian bawah (sebagai percobaan) berupa larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis yang mengandung larutan tablet furosemida generik 0,001 M ke dalam tabung cairan

Diatur termostat pada temperatur 37 ± 0,5oC.

Dialiri oksigen secara terus-menerus dengan kecepatan kira-kira 1 gelembung/detik. Pada menit ke-5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 cairan serosa diambil sebanyak 1 ml melalui kanula dan dimasukkan 1 ml setiap pengambilan Dipipet 0,5 ml masing-masing cairan diencerkan dengan larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis sampai dengan

Diukur serapan dengan Spektrofotometer UV pada λ 277,0 nm

Dilakukan cara yang sama untuk konsentrasi 0,002 M dan 0,003 M

Absorbansi


54

Lampiran 10. Contoh Perhitungan Penentuan Harga Konsentrasi Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam mcg/ml Harga konsentrasi dari tablet furosemida generik dalam larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis pada interval waktu tertentu dihitung dengan menggunakan persamaan garis regresi : Y = 0,0634 X – 0,0079 Dimana; Y = Absorbansi X = Konsentrasi Misal, pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik dengan konsentrasi 0,001 M diperoleh absorbansi 0,0759. Maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-5 adalah : X=

0,0759 + 0,0079 0,0634

X = 1,3218 mcg/ml Dilakukan cara yang sama untuk menit berikutnya dan pada masing – masing konsentrasi yaitu 0,002 M dan 0,003 M.


55

Lampiran 11.

Contoh Perhitungan Penentuan Harga Konsentrasi Kumulatif Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam mcg/ml

Nilai konsentrasi dari tablet furosemida dalam larutan dapar fosfat pH 6,0 isotonis pada interval waktu dihitung dengan menggunakan persamaan garis regresi; Y = 0,0634X – 0,0079 Pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik, dipipet larutan sebanyak 0,5 ml, diencerkan dengan larutan dapar fosfat pH 6,0 dalam labu tentukur 25 ml sampai garis tanda. Kemudian serapannya diukur pada panjang gelombang 277,0 nm sehingga diperoleh absorbansi 0,0759. Maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-5 adalah : 0,0759 + 0,0079 25ml x x1ml = 66,0883mcg / ml = 0,1998 .10-3 M 0,0634 0,5ml Pada waktu t = 10 menit, diperoleh absorbansi (A) = 0,0555, maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-10 adalah:  0,0555 + 0,0079 25ml  x x1ml  + 66,0883mcg / ml  0,0634 0,5ml   = 50,0000 mcg/ml + 66,0883 mcg/ml = 116,0883 mcg/ml = 0,3510.10-3 M Pada waktu t = 15 menit, diperoleh absorbansi (A) = 0,0251, maka konsentrasi cuplikan pada menit ke-15 adalah :  0,0251 + 0,0079 25ml  x x1ml  + 115,0883mcg / ml  0,0634 0,5ml   = 26,0250 mcg/ml + 116,0883 mcg/ml = 142,1136 mcg/ml = 0,4297.10-3 M Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh kadar kumulatif tablet furosemida pada menit ke-45.


56

Lampiran 12. Contoh Perhitungan Penentuan Harga AUC (Area Under The Curve) Tablet Furosemida Generik pada Berbagai Konsentrasi dalam mcg.menit/ml Penentuan harga AUC dari tablet furosemida generik pada konsentrasi 0,001 M diperoleh dengan cara memplot konsentrasi terhadap waktu sehingga dihasilkan kurva absorpsi. Kemudian luas daerah di bawah kurva absorpsi dihitung dengan menggunakan metode luas trapesium berdasarkan rumus: Luas= ½ (Jumlah sisi yang sejajar) x tinggi Misal, pada waktu t = 5 menit sampai dengan t = 10 menit maka luas daerah di bawah kurva adalah: = (½ ( 1,3218 mcg/ml + 1,0000 mcg/ml) x (10 menit-5 menit) = 1,1609 mcg/ml x 5 menit = 5,8045 mcg.menit/ml Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh jumlah total AUC pada konsentrasi 0,001 M tablet furosemida generik hingga menit ke-45 dan dilakukan cara yang sama untuk konsentrasi 0,002 M dan 0,003 M.


57

Lampiran 13. Data Absorbansi Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi a. Data Absorbansi Furosemida dalam Cairan Serosa pada Konsentrasi 0,001 M No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,1058 0,0686 0,0269 0,0101 0,0156 -0,0049 -0,0176 -0,0049 -0,0071

Absorbansi Blanko 0,0299 0,0131 0,0018 0,0042 -0,011 -0,0177 -0,0211 -0,0216 -0,0159

Absorbansi Sebenarnya 0,0759 0,0555 0,0251 0,0059 0,0266 0,0128 0,0035 0,0167 0,0088

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,1028 0,0314 0,0061 0,0021 -0,0099 0,0126 -0,0128 -0,0122 0,0104


Absorbansi Sebenarnya 0,0729 0,0183 0,0043 -0,0021 0,0011 0,0303 0,0083 0,0094 0,0263

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,1277 0,0342 0,0045 0,0356 0,0187 -0,0103 0,0233 -0,0162 0,002




58

b. Data Absorbansi Furosemida dalam Cairan Serosa pada Konsentrasi 0,002 M No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,0120 -0,0020 0,0045 0,0106 0,0033 0,0004 -0,0021 0,0000 0,0024

Absorbansi Blanko 0,0050 0,0071 -0,0078 0,0027 0,0007 -0,0021 -0,0049 -0,0122 -0,0170

Absorbansi Sebenarnya 0,0070 -0,0091 0,0123 0,0079 0,0026 0,0025 0,0028 0,0122 0,0194

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,0061 0,0068 0,0176 0,0004 -0,0037 -0,0095 -0,0013 -0,0045 0,0096


Absorbansi Sebenarnya 0,0011 -0,0003 0,0254 -0,0023 -0,0044 -0,0074 0,0036 0,0077 0,0266

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,0017 0,0000 0,0006 0,0018 -0,0026 -0,0094 -0,0029 -0,0081 -0,0004


Absorbansi Sebenarnya -0,0033 -0,0071 0,0084 -0,0009 -0,0033 -0,0073 0,0020 0,0041 0,0166


59

c. Data Absorbansi Furosemida dalam Cairan Serosa pada Konsentrasi 0,003 M

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Absorbansi Sampel 0,0267 0,0140 0,027 0,0266 0,0228 0,0306 0,0496 0,0718 0,0531

Absorbansi Blanko 0,0178 0,0121 0,0072 0,0117 0,0085 0,0205 0,0277 0,0139 0,0111


No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45



Absorbansi Sebenarnya -0,0041 0,0051 0,0667 0,0194 0,0035 -0,0033 0,0090 0,0105 0,0396

No 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Waktu (menit) 5 10 15 20 25 30 35 40 45



Absorbansi Sebenarnya -0,0019 -0,0077 0,0013 0,0033 0,0173 -0,0090 -0,0126 0,0342 0,0182


60

Lampiran 14. Data Konsentrasi Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam mcg/ml Perlakuan Waktu

Konsentrasi 0,001 M Tabet Generik

Konsentrasi 0,002 M Tablet Generik


Konsentrasi Tablet Furosemid Dalam Interval Waktu Tertentu (mcg/ml)

Rata-rata

± SD

(menit)

I

II

III

Konsentrasi

5

1,3218

1,2744

1,6672

1,4211

0,2144

10

1,0000

0,4132

0,4574

0,4353

0,0312

15

0,5205

0,1924

0,1672

0,2934

0,1971

20

0,2177

0,0915

0,6199

0,4188

0,2844

25

0,5442

0,1420

0,5931

0,5686

0,0346

30

0,3265

0,6025

0,2413

0,3901

0,1888

35

0,1798

0,2555

0,8249

0,4201

0,3526

40

0,3880

0,2729

0,2098

0,2902

0,0904

45

0,2634

0,5394

0,4069

0,4033

0,1380

5

0,2350

0,1420

0,0726

0,1073

0,0491

10

-0,0189

0,1199

0,0126

0,0662

0,0758

15

0,3186

0,5252

0,2571

0,3670

0,1405

20

0,2492

0,0883

0,1104

0,1798

0,0981

25

0,1656

0,0552

0,0726

0,0978

0,0594

30

0,1640

0,0079

0,0095

0,0868

0,1093

35

0,1688

0,1814

0,1562

0,1688

0,0126

40

0,3170

0,2461

0,1893

0,2815

0,0502

45

0,4306

0,5442

0,3864

0,4085

0,0312

5

0,2650

0,0599

0,0946

0,1798

0,1205

10

0,1546

0,2050

0,0032

0,1798

0,0357

15

0,4369

1,1767

0,1451

0,5862

0,5317

20

0,3596

0,4306

0,1767

0,3223

0,1310

25

0,3502

0,1798

0,3975

0,3738

0,0335

30

0,2839

0,0726

-0,0174

0,1782

0,1495

35

0,4700

0,2666

-0,0741

0,3683

0,1439

40

1,0379

0,2902

0,6640

0,8509

0,2643

45

0,7871

0,7492

0,4117

0,7681

0,0268


61

Lampiran 15. Data Konsentrasi Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam 10-3 M Perlakuan Waktu

Konsentrasi 0,001 M Tabet Generik



Konsentrasi Tablet Furosemid Dalam Interval Waktu Tertentu (10-3 M)

Rata-rata

± SD

(menit)

I

II

III

Konsentrasi

5

0,0040

0,0039

0,0050

0,0043

0,0006

10

0,0030

0,0012

0,0014

0,0013

0,0010

15

0,0016

0,0006

0,0005

0,0009

0,0006

20

0,0007

0,0003

0,0019

0,0013

0,0008

25

0,0016

0,0004

0,0018

0,0017

0,0007

30

0,0010

0,0018

0,0007

0,0012

0,0006

35

0,0005

0,0008

0,0025

0,0013

0,0011

40

0,0012

0,0008

0,0006

0,0009

0,0003

45

0,0008

0,0016

0,0012

0,0012

0,0004

5

0,0007

0,0004

0,0002

0,0003

0,0002

10

-0,0001

0,0004

0,0000

0,0002

0,0002

15

0,0010

0,0016

0,0008

0,0011

0,0004

20

0,0008

0,0003

0,0003

0,0005

0,0003

25

0,0005

0,0002

0,0002

0,0003

0,0002

30

0,0005

0,0000

0,0000

0,0003

0,0003

35

0,0005

0,0005

0,0005

0,0005

0,0000

40

0,0010

0,0007

0,0006

0,0009

0,0002

45

0,0013

0,0016

0,0012

0,0012

0,0002

5

0,0008

0,0002

0,0003

0,0005

0,0003

10

0,0005

0,0006

0,0000

0,0005

0,0003

15

0,0013

0,0036

0,0004

0,0018

0,0016

20

0,0011

0,0013

0,0005

0,0010

0,0004

25

0,0011

0,0005

0,0012

0,0011

0,0003

30

0,0009

0,0002

-0,0001

0,0005

0,0005

35

0,0014

0,0008

-0,0002

0,0011

0,0008

40

0,0031

0,0009

0,0020

0,0026

0,0011

45

0,0024

0,0023

0,0012

0,0023

0,0006


62

Lampiran 16. Data Konsentrasi Kumulatif Tablet Furosemida Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam mcg/ml Perlakuan Waktu

Konsentrasi 0,001 M tablet generik



Konsentrasi kumulatif tablet furosemid pada interval waktu tertentu (mcg/ml)

Rata-rata Konsentrasi

± SD

(menit)

I

II

III

( mcg/ml )

5

66,0883

63,7224

83,3596

71,0568

10,7200

10

116,0883

84,3849

106,2303

95,3076

16,2251

15

142,1136

94,0063

114,5899

116,9033

24,1369

20

152,9968

98,5804

145,5836

149,2902

5,2420

25

180,2050

105,6782

175,2366

177,7208

3,5132

30

196,5300

135,8044

187,3028

173,2124

32,7231

35

205,5205

148,5804

228,5489

194,2166

41,1652

40

224,9211

162,2240

239,0379

208,7277

40,8872

45

238,0915

189,1956

259,3849

228,8906

35,9878

5

11,7508

7,0978

3,6278

5,3628

2,4537

10

10,8044

13,0915

4,2587

8,6751

6,2457

15

26,7350

39,3533

17,1136

27,7340

11,1535

20

39,1956

43,7697

22,6341

30,9148

30,9148

25

47,4763

46,5300

26,2618

40,0894

11,9844

30

55,6782

46,9243

26,7350

41,2066

20,4659

35

64,1167

55,9937

34,5426

51,5510

15,2794

40

79,9685

68,2965

44,0063

74,1325

8,2533

45

101,4984

95,5047

63,3281

82,4132

26,9905

5

13,2492

2,9968

4,7319

8,9905

6,0227

10

20,9779

13,2492

4,8896

17,1136

5,4650

15

42,8233

72,0820

12,1451

42,3502

29,9713

20

60,8044

93,6120

20,9779

58,4648

36,3735

25

78,3123

102,6025

40,8517

59,5820

26,4886

30

92,5079

106,2303

39,9842

99,3691

9,7032

35

116,0095

119,5584

36,2776

117,7839

2,5094

40

167,9022

134,0694

69,4795

118,6909

69,5954

45

207,2555

171,5300

90,0631

189,3927

25,2618


63

Lampiran 17. Data Konsentrasi Kumulatif Tablet Furosemidan Generik dalam Cairan Serosa Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci pada Berbagai Konsentrasi dalam 10-3 M Perlakuan Waktu




Konsentrasi kumulatif tablet furosemid pada interval waktu tertentu (10-3 M)

Rata-rata Konsentrasi

± SD

(menit)

I

II

III

( 10-3 M )

5

0,1998

0,1927

0,2520

0,2148

0,0324

10

0,3510

0,2551

0,3212

0,2882

0,0491

15

0,4297

0,2842

0,3465

0,3535

0,0730

20

0,4626

0,2981

0,4402

0,4514

0,0892

25

0,5449

0,3195

0,5298

0,5373

0,1260

30

0,5942

0,4106

0,5663

0,5237

0,0989

35

0,6214

0,4492

0,6910

0,5872

0,1245

40

0,6801

0,4905

0,7227

0,6311

0,1236

45

0,7199

0,5720

0,7843

0,6921

0,1088

5

0,0355

0,0215

0,0110

0,0162

0,0123

10

0,0327

0,0396

0,0129

0,0262

0,0139

15

0,0808

0,1190

0,0517

0,0839

0,0337

20

0,1185

0,1323

0,0684

0,0935

0,0336

25

0,1435

0,1407

0,0794

0,1212

0,0362

30

0,1683

0,1419

0,0808

0,1246

0,0449

35

0,1939

0,1693

0,1044

0,1559

0,0462

40

0,2418

0,2065

0,1331

0,2241

0,0555

45

0,3069

0,2888

0,1915

0,2492

0,0621

5

0,0401

0,0091

0,0143

0,0272

0,0166

10

0,0634

0,0401

0,0148

0,0517

0,0243

15

0,1295

0,2179

0,0367

0,1280

0,0906

20

0,1838

0,2830

0,0634

0,1768

0,1100

25

0,2368

0,3102

0,1235

0,1801

0,0941

30

0,2797

0,3212

0,1209

0,3004

0,1057

35

0,3508

0,3615

0,1097

0,3561

0,1424

40

0,5077

0,4054

0,2101

0,3589

0,1512

45

0,6266

0,5186

0,2723

0,5726

0,1816


64

Lampiran 18. Perhitungan Analysis of Variance (ANOVA) Konsentrasi Kumulatif Tablet Furosemida Generik pada Kantung Terbalik (everted sac) Jejunum Kelinci dengan Berbagai Konsentrasi Waktu

Source of variation Between Groups

Sum of Squares 8144,921

df 2

Mean Square 4072,460

5 menit

Within Groups

323,285

6

53,881

Total

8468,206

8

Between Groups

16590,268

2

8295,134

Within Groups

698,022

6

116,337

Total

17288,289

8

Between Groups

13722,962

2

6861,481

Within Groups

3210,532

6

535,089

Total

16933,494

8

Between Groups

15451,100

2

7725,550

Within Groups

4635,176

6

772,529

Total

20086,276

8

Between Groups

20419,100

2

10209,550

Within Groups

5695,173

6

949,195

Total

26114,272

8

Between Groups

27023,560

2

13511,780

Within Groups

5027,454

6

837,909

Total

32051,013

8

Between Groups

32612,756

2

16306,378

Within Groups

8291,213

6

1381,869

Total

40903,969

8

Between Groups

31697,013

2

15848,507

Within Groups

9017,890

6

1502,982

Total

40714,903

8

Between Groups

24704,154

2

12352,077

Within Groups

11402,032

6

1900,339

Total

36106,185

8

10 menit

15 menit

20 menit

25 menit

30 menit

35 menit

40 menit

45 menit

F hitung 75,583*

F tabel 5,14

Sig. 0,000

71,303*

5,14

0,000

12,823*

5,14

0,007

10,000*

5,14

0,012

10,756*

5,14

0,010

16,126*

5,14

0,004

11,800*

5,14

0,008

10,545*

5,14

0,011

6,500*

5,14

0,031

* The mean difference is significant at the 0.05 level.


65

Lampiran 19. Perhitungan Analysis Variance (ANOVA) dan Least Significant Difference (LSD) terhadap Area Under The Curve (AUC) Tablet Furosemida Generik pada Kantung Terbalik (Everted sac) Jejunum Kelinci dengan Berbagai Konsentrasi ANOVA Source of variation Between Groups

Sum of Squares 289,377

df 2

Mean Square 144,689

Within Groups

56,117

6

9,353

Total

345,494

8

F hitung 15,470*

F tabel 5,14

Sig. 0,004

LSD Mean Difference (I-J) (I) Konsentrasi 1 mM

(J) Konsentrasi 2 mM 13,84443* Konsentrasi 3 mM 5,95407 Konsentrasi 2 mM Konsentrasi 1 mM -13,84443* Konsentrasi 3 mM -7,89037* Konsentrasi 3 mM Konsentrasi 1 mM -5,95407 Konsentrasi 2 mM 7,89037* * The mean difference is significant at the 0.05 level.

Std.Error

Sig.

2,49704 2,49704 2,49704 2,49704 2,49704 2,49704

0,001 0,054 0,001 0,020 0,054 0,020


66

Lampiran 20. Gambar Grafik Log Konsentrasi Kumulatif Terhadap Waktu dari 0,001 M, 0,002 M dan 0,003 M Tablet Furosemida Generik dengan Menggunakan Orde Satu

Log Konsentrasi Kumulatif (mcg/ml)

3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.0 0

10

0,001 M; y = 0,0119 x + 1,8732

20 30 waktu (menit) 0,002 M; y = 0,0273 x + 0,7959

40

50

0,003 M; y = 0,0298 x + 1,0082


67

Lampiran 21. Gambar Grafik Konsentrasi Kumulatif Terhadap Akar Waktu dari 0,001 M, 0,002 M dan 0,003 M Tablet Furosemida Generik dengan Menggunakan Orde Higuchi

Konsentrasi Kumulatif (mcg/ml)

250 200 150 100 50 0 0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

-50 Akar waktu (menit) 0,001 M; y =35,344 x - 12,272

0,002 M; y = 16,794 x - 40, 325

0,003 M; y = 36,02 x - 93,691


68

Pada waktu t = 5 menit untuk tablet furosemida generik dengan konsentrasi 1,0 mM, dipipet larutan sebanyak 0,5 ml, diencerkan dengan larutan dapar fosfat pH 6,0 dalam labu tentukur 25 ml sampai garis tanda. Kemudian serapannya diukur pada panjang gelombang 277,0 nm sehingga diperoleh absorbansi 0,0759. Kemudian dihitung harga konsentrasi berdasarkan nilai absorbansi tersebut dengan menggunakan metode pendekatan berdasarkan rumus : A1 A2 = C1 C 2 Sehingga diperoleh harga konsentrasi cuplikan. Pada waktu t = 5 menit, diperoleh konsentrasi =

mcg/ml, maka harga

konsentrasi kumulatif pada menit ke-5 adalah : mcg/ml x

25ml x 1 ml = 0,5ml

mcg/ml =

Pada waktu t = 10 menit, diperoleh konsentrasi =

M mcg/ml, maka

konsentrasi cuplikan pada menit ke-10 adalah: 25ml   x1ml  +  mcg / mlx 0,5ml   =

+

=

mcg/ml =

mcg/ml mcg/ml M

Pada waktu t = 15 menit, diperoleh konsentrasi =

mcg/ml, maka

konsentrasi cuplikan pada menit ke-15 adalah : 25ml   x1ml  +  mcg / mlx 0,5ml   =

+

=

mcg/ml =

mcg/ml= mcg/ml M

Demikianlah seterusnya, sampai diperoleh kadar kumulatif tablet furosemida pada menit ke-45.


Lampiran 1. Flowsheet Rancangan Percobaan

Recommend Documents