Jurnal Veteriner Maret 2016 pISSN: 1411-8327; eISSN: 2477-5665 Terakreditasi Nasional SK. No. 15/XI/Dirjen Dikti/2011
Vol. 17 No. 1 : 7-15 DOI: 10.19087/jveteriner.2016.17.1.7 online pada http://ejournal.unud.ac.id/php.index/jvet.
Isolasi dan Identifikasi Bakteri dari Tinja Orangutan Penderita Gangguan Gastrointestinal (BACTERIAL ISOLATION AND IDENTIFICATION IN FAECES OF ORANGUTAN WITH GASTROINTESTINAL DISTURBANCE) Michael Haryadi Wibowo1, Antasiswa Windraningtyas Rosetyadewi2, Agustina Dwi Wijayanti2, Claudia Mona Airin3. 1
Bagian Mikrobiologi, 2Bagian Farmakologi, 3Bagian Fisiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Gadjah Mada. Jl. Fauna No 2, Karangmalang, Yogyakarta, 55281. Telp: 0274-560862; Email:
[email protected]
ABSTRAK Orangutan merupakan salah satu satwa yang dilindungi undang-undang. Salah satu permasalahan kesehatan yang sering didapati pada orangutan adalah adanya gangguan gastrointestinal yang disebabkan oleh infeksi bakteri. Sejauh ini data mikrobiologi penyebab penyakit pada orangutan belum banyak dipublikasi. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan identifikasi bakteri penyebab penyakit pada kasus gangguan gastrointestinal pada orangutan. Sampel ulas feses pada kasus gangguan gastrointestinal pada orangutan diperoleh dari Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta dan Yayasan Borneo Orangutan Survival, Semboja, Kalimantan Timur. Isolasi dilakukan dengan teknis agar gores pada media selektif Gram negatif untuk memperoleh biakan murni. Konfirmasi biakan murni untuk mengamati morfologi sel dilakukan dengan pengecatan Gram. Identifikasi biokimia bakteri enterik mengacu pada Bergey’s Manual Determinative Bacteriology. Berdasarkan data yang diperoleh dari berbagai uji biokimia bahwa sampel feses dari kasus penyakit gastrointestinal orangutan yang ditangkarkan di Yayasan Konservasi Sumberdaya Alam Yogyakarta, dapat diidentifikasi tiga jenis bakteri yaitu: Citrobacter amalonaticus, Providensia rustigianii, dan Proteus mirabilis. Sampel dari Borneo Orangutan Survival, Semboja, Kalimantan Timur dapat diidentifikasi tiga bakteri yaitu: Klebsiella planticola, Enterobanter agglomerans, dan Escherichia coli. Kata-kata kunci: bakteri enterik, biakan murni, reaksi biokimia, orangutan.
ABSTRACT Orangutans are among protected animals by the law. One of orangutans’ main health problems is gastrointestinal disease due to bacterial infection. Microbiological data of causative agent of illness in orangutan still not much reported scientifically. This research aim was to identify causative agent of bacterial infection on gastrointestinal disorder in orangutan isolated from stool samples. The samples were collected from Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta and Borneo Orangutan Survival, Semboja, Kalimantan Timur. Fresh fecal samples were collected using sterile swab and put them into a sterile transport media. To achieve pure cultures, bacterial isolation was performed by using plate streaking on selective media. Gram stain was done to confirm the cell uniformity and morphology. Bacterial identification was performed according to Bergey’s Manual Determinative Bacteriology on some biochemical characters to determine the isolated bacteria. The result showed that three bacteria were identified from stool samples orangutan from Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta, i.e.: Citrobacter amalonaticus, Providensia rustigianii, and Proteus mirabilis. Meanwhile, three bacteria, which were Klebsiella planticola, Enterobanter agglomerans and Escherichia coli, were also identified in samples taken from Borneo orangutan. Key words: enteric bacteria, pure culture, biochemical reaction, orangutan.
7
Wibowo et al.
Jurnal Veteriner
CITES tersebut. Sebagai implementasinya adalah menetapkan pelarangan penangkapan satwa liar dari alam, dan apabila karena sesuatu hal yang amat penting hal tersebut harus dilakukan maka ijin hanya bisa diberikan oleh Presiden (Harahap, 1989). Berbagai upaya untuk melindungi orangutan tersebut belum sepenuhnya dapat dicapai, oleh karena upaya pendekatan bidang kesehatan orangutan belum diterapkan secara optimal. Berbagai kasus infeksi baik virus (Warren et al, 1999; Grethe et al, 2000; Verschoor et al, 2001; Sa-nguanmoo et al., 2010), bakteri (Lawson et al., 2006; Pazzaglia et al., 1994; Rahmi et al., 2014), dan parasit (Rianawati dan Prastowo, 2003; Supriadi et al., 2012; Nasution et al., 2013; Rahmah et al., 2013) terbukti menjadi kendala pelestarian orangutan. Pada orangutan kasus infeksi bakteri yang banyak dilaporkan dominan pada kasus penyakit respirasi (Iverson dan Cornelly, 1981; Shin et al., 1995; Lawson et al., 2006; Zimmer-mann et al., 2011). Penelitian medis pada orangutan merupakan penelitian yang kurang mendapatkan perhatian di Indonesia. Sejauh ini penelitian orangutan lebih banyak pada bidang tingkah laku, fisiologi, ekologi, dan survival, serta biodiversitas. Data mikrobiologi penyebab penyakit pada orangutan belum banyak diungkap, meskipun penelitian penyakit parasit pada orangutan di Indonesia telah lebih banyak dilaporkan. Hal ini menyebabkan informasi medis terkait mikroorganisme penyebab penyakit yang merupakan penunjang penting dalam penyelamatan satwa tersebut, belum banyak dipublikasikan. Penelitian ini bertujuan mengisolasi dan mengidentifikasi mikroorganisme penyebab penyakit pada kasus gangguan gastrointestinal orangutan, dalam usaha mempertahankan kehidupan orangutan yang dilindungi.
PENDAHULUAN Orangutan adalah satu-satunya kera besar yang ditemukan di wilayah Asia, tepatnya di Pulau Sumatera dan Kalimantan. Habitat orangutan sebagian besar berada di wilayah Indonesia (Sumatera dan Kalimantan), dan sebagian kecil di wilayah Malaysia (Sabah dan Serawak), tetapi tidak ditemukan di Brunei (Rijksen, 1978; Acrenaz et al., 2004; Singleton et al., 2008). Orangutan (Pongo pygmaeus) dalam bahasa lokal sering disebut sebagai kahiyu di Kalimantan atau mawas di Sumatera. Orangutan sumatera dan borneo merupakan dua spesies yang berbeda. Orangutan sumatera disebut P. abelii (Singleton et al., 2008) sementara orangutan borneo disebut P. pygmaeus (Acrenaz et al., 2004, Brandon-Jones et al., 2004). Orangutan borneo selanjutnya dikelompokkan ke dalam sub populasi dalam tiga sub spesies, yaitu: P. pygmaeus pygmaues, P. pygmaeus wurmbii, dan P. pygmaeus morio (Acrenaz et al., 2004). Berdasarkan umur orangutan Rijksen (1978) membagi kelompok usia orangutan sebagai: infant (kurang dari 2,5 tahun), juvenile (2,5-5,0 tahun), adolescent (5,08,0 tahun), sub adult (8,0-15,0 tahun, khusus pada jantan), dan adult (di atas 15 tahun untuk jantan atau delapan tahun untuk betina). Habitat alami orangutan adalah hutan dataran rendah, daerah rawa, wilayah kaki gunung maupun di lembah alluvial dengan ketinggian di bawah 400 meter di atas permukaan laut (van Schaeik dan Azwar, 1991). Secara umum orangutan jarang ditemukan di atas ketinggian 1200 meter, namun demikian terdapat pengecualian dengan ditemukannya orangutan pada ketingigan tersebut di Sumatera dan Sabah (Sugardhito dan van Schaik, 1991). Pada dasarnya orangutan adalah pemakan buah (frugivora), tetapi orangutan juga makan daun, kulit kayu, umbut maupun serangga (Rijksen, 1978; Galdikas, 1981; Acrenaz et al., 2004; Singleton et al., 2008). Upaya perlindungan orangutan sebenarnya sudah dinilai cukup, dengan dikeluarkannya Peraturan dari Pemerintah Hindia Belanda pada tahun 1925 yang melarang perburuan, memelihara, tindakan yang membahayakan, dan pembunuhan orangutan. Pada tahun 1975, orangutan masuk dalam kategori Appendix-1 dari Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora (CITES). Sejak tahun 1978, pemerintah Indonesia telah menandatangani dan meratifikasi
METODE PENELITIAN Persiapan Sampel dan Bahan Isolasi Sampel ulas tinja (swab feces) yang dikoleksi dan disiapkan oleh petugas kesehatan dari Yayasan Konservasi Alam (YKA) Yogyakarta, Kulon Progo, Yogyakarta, ditempatkan dalam bacterial transport media (Transport swabs®, Oxoid). Sampel swab feses juga diperoleh dari Yayasan Borneo Orangutan 8
® a
Jurnal Veteriner Maret 2016
Vol. 17 No. 1 : 7-15
Survival (BOS), Semboja, Kalimantan Timur. Swab feses disiapkan oleh petugas kesehatan Yayasan BOS dari orangutan dengan kasus gangguan pencernaan yang teramati gejala klinis diare, dalam periode pengamatan bulan Juli sampai Agustus 2014. Media isolasi dan identifikasi bakteri enterik, disesuaikan dengan referensi Bergey’s Manual Determinative Bacteriology (1994).
dilakukan kultur bakteri untuk mencari penyebab penyakit pada kasus diare tersebut. Tahap isolasi menggunakan media selektif Gram negatif, seperti media BGA, EMB, atau MCA untuk memperoleh biakan murni. Streak dilakukan dengan metode T, yang merupakan metode terbaik untuk memisahkan koloni bakteri. Pasase koloni terduga bakteri penyebab penyakit pada kultur primer tersebut, dilakukan untuk memperoleh biakan murni. Dalam setiap tahapan plating dilakukan pengecatan untuk konfirmasi bentuk sel bakteri. Hasil pengecatan bakteri teramati bakteri bentuk batang dan tersifat sebagai Gram negatif. Bakteri enterik merupakan bakteri Gram negatif dan secara umum berbentuk batang (Bergey’s Manual, 1994; Simmons dan Gibson, 2012). Hasil pengecatan disajikan pada Gambar-1. Identifikasi biokimia mengacu pada Bergey’s Manual Determinative Bacteriology (1994). Hasil berbagai uji identifikasi bakteri disajikan pada Tabel 1 dan Tabel 2. Berdasarkan data yang diperoleh (Tabel 1) tersebut, maka dapat disimpulkan bahwa sampel feses dari kasus penyakit gastrointestinal yang diperoleh dari Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta tersebut dapat diisolasi tiga jenis bakteri, yaitu: Citrobacter amalonaticus (sampel 1), Providensia rustigianii (sampel 2), dan Proteus mirabilis (sampel 3 dan 4). Uji sukrosa menunjukkan hasil positif yang menurut referensi 76% sampai 89% sampel adalah negatif. Demikian juga hasil uji laktosa menunjukkan hasil negatif, sedangkan berdasarkan data referensi menunjukkan nilai “d”, yang berarti bahwa sebanyak 11% sampai
Isolasi dan Identifikasi Sampel Proses isolasi dan identifikasi dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi, FKH, UGM. Isolasi dikerjakan dengan metode streak plate T method yang diawali dengan menggoreskan ose atau swab sampel ke atas permukaan media selektif Gram negatif. Sampel dari YKA Yogyakarta digoreskan pada media brilliant green agar (BGA), sedangkan sampel dari BOS digoreskan pada media Eosin Methylene Blue Agar (EMB) atau Mac Conkey agar (MCA) sampai didapatkan koloni tunggal yang diteruskan untuk memperoleh biakan murni. Untuk mengetahui bentuk bakteri maka dikonfirmasi dengan pengecatan Gram. Biakan murni yang diperoleh disimpan dalam agar miring sebagai stok. Identifikasi bakteri dilakukan dengan pengujian sifat-sifat biokimiawi bakteri. Identifikasi biokimiawi berdasarkan Differentiation of Enterobacteraceae menurut Bergey’s Manual Determinative Bacteriology (1994). Uji yang dilakukan meliputi: uji triple sugar iron (TSI), karakter fermentasi karbohidrat pada media: glukosa, laktosa, sukrosa, mannitol, dulcitol, adonitol, inositol, sorbitol, arabinosa, rafinosa, serta uji biokimiawi yang lain yaitu: uji indol, Methyl Red, Voges-Proskauver, sitrat, uji urea, uji gelatin, dan motilitas. Penentuan spesies bakteri didasarkan pada hasil reaksi biokimia bakteri pada media uji dan dikonfirmasi dengan acuan pustaka (Bergey’s Manual Determinative Bacteriology, 1994).
HASIL DAN PEMBAHASAN Data sampel yang diperoleh menunjukkan bahwa pada umumnya orangutan menunjukkan gejala- gejala sebagai berikut: lesu, kurang aktif bermain, nafsu makan, minum, dan bobot badan turun. Gejala klinis lain yang teramati adalah diare dengan feses cair. Pada umumnya orangutan tersebut pernah mengalami kasus diare berulang. Sejauh ini belum pernah
Gambar 1. Contoh hasil pengecatan Gram, bakteri yang diisolasi dari sampel YKA Yogyakarta, tersifat sebagai Gram negatif, dan berbentuk batang. Perbesaran 1000 kali. 9
Wibowo et al.
Jurnal Veteriner
Tabel 1. Hasil identifikasi bakteri sampel feses yang diperoleh dari Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta. No Jenis Uji
Sampel 1 Ref.
Sampel 2 Ref.
Sampel 3
Sampel 4
Ref.
1 2 3 4
NFL Grambatang Merah/ kuning + + + + + + + + -
NFL Grambatang Merah/ kuning + D (-) + + + + + -
NFL Gram batang Merah/ merah + -
NFL Grambatang Merah/ merah d d + d -
NFL Gram batang Merah/ kuning + -
NFL Gram batang Merah/ kuning + -
NFL Grambatang Merah/ kuning + (-) + d
+ + + Ca
(+) (+) + + Ca
+ + Pr
(-) d + Pr
+ + + Pm
+ + + Pm
d + + + + Pm
5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
BGA Sifat Gram Bentuk bakteri Uji TSI (miring/tegak) Glukosa Laktosa Sukrosa Mannitol Dulsitol Adonitol Inositol Sorbitol Arabinosa Rafinosa Indol Methyl Red VogesProskauver Citrat Urea Motilitas KCN Gelatin Kesimpulan
Keterangan : positif/+: 90 % lebih strain positif; negatif/-: 90% lebih strain negatif. Notasi (+) dan (-): 76 sampai 89% strain positif atau negatif; notasi “d” adalah bahwa 11 sampai 75% strain positif. Ref.: Referensi, NFL: non lactose fermenter, BGA: Briliant Green Agar, TSI: TripleSugar Iron, KCN: Kaldu potassium cyanide; Ca: Citrobacter amalonaticus; Pr: Providensia rustigianii; Pm: Proteus mirabilis.
75% positif laktosa (Bergey’s Manual, 1994). Kondisi tersebut menunjukkan hasil uji memungkinkan diperoleh positif pada uji sukrosa, ataupun hasil negatif pada uji laktosa. Beberapa uji yang lain yang menunjukkan hasil yang berbeda dengan referensi, misalnya hasil Voges-Proskauver dan sitrat pada sampel 3 dan 4 adalah negatif, sedangkan referensi menunjukkan hasil “d”, yang berarti 11 sampai 75% dapat menunjukkan reaksi positif. Kondisi tersebut juga memberikan alasan bahwa sebanyak 25 sampai 89% di antara isolat menunjukkan peluang hasil negatif. Uji motilitas semua bakteri menunjukkan non motil, namun demikian menurut Bergey’s Manual (1994) dinyatakan bahwa secara umum bakteri enterik bersifat motil. Kondisi tersebut memberikan argumen bahwa tidak semua
bakteri enterik bersifat motil, oleh karena itu hasil uji pada penelitian ini meneguhkan ada bakteri enterik yang bersifat non motil. Hal yang sama disampaikan oleh Simons dan Gibson (2012) yang menyatakan bahwa tidak semua bakteri enterik adalah motil, beberapa strain bersifat non motil. Menurut data hasil uji sampel lain (Tabel 2), menunjukkan bahwa sampel feses dari Yayasan BOS, Semboja berhasil diidentifikasi sebanyak tiga jenis bakteri yaitu: Klebsiella planticola (sampel 1), Enterobacter agglomerans (sampel 2 dan 3), dan Escherichia coli (sampel 4). Beberapa uji biokimiawi untuk bakteri Klebsiella, menunjukkan hasil berbeda dengan referensi yaitu: dulcitol dan indol adalah positif sedangkan menurut referensi adalah negatif (-). Namun demikian, penjelasan dari referensi 10
Jurnal Veteriner Maret 2016
Vol. 17 No. 1 : 7-15
Tabel 2. Hasil identifikasi bakteri sampel feses yang diperoleh dari Yayasan Borneo Orangutan Survival, Semboja, Kalimantan Timur. No Jenis Uji 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
MCA/EMB
Sampel 1 Ref.
Merah/ LF Sifat Gram GramBentuk bakteri batang Uji TSI KK/gas Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Mannitol + Dulsitol + Adonitol + Inositol + Sorbitol + Arabinosa + Rafinosa + Indol + Methyl Red + VogesProskauver Citrat + Urea + Motilitas KCN + Gelatin + Kesimpulan Kp
Sampel 2
Sampel3 Ref.
Sampel 4
Ref.
Merah/ LF Grambatang KK/gas + + + + (-) + + + + + (-) + +
Merah/ LF Grambatang KK/gas + + + + + + + + + + -
Merah/ LF Grambatang KK/gas + + + + + + + + + + -
Merah/ LF Grambatang KK/gas + d (+) + (-) (-) d + d (-) d d
Metallic sheen Grambatang KK/gas + + + + + (+) (+) + + + -
Metallic sheen Grambatang KK/gas + (+) d + d (+) (+) d (+) + -
+ + + Kp
+ + Ea
+ + Ea
d (-) (+) d Ea
E.coli
(+) E.coli
Keterangan :positif/+: 90 % lebih strain positif; negatif/-: 90% lebih strain negatif. Notasi (+) dan (-): 76 sampai 89% strain positif atau negatif; notasi “d”: bahwa 11 sampai 75% strain positif. Ref: Referensi, NFL: non lactose fermenter; EMB: Eosin Methylen Blue; MCA: Mac Concey Agar; TSI: TripleSugar Iron, KCN: Kaldu potassium cyanide; Kp: Klebsiella planticola, EA: Enterobacter agglomerans; E. coli: Escherichia coli; LF: Lactose fermenter; KK: Kuning kuning
bahwa kode (-), menyatakan persentase hasil negatif adalah 76 sampai 89%. Kondisi tersebut memberikan alasan bahwa sebanyak 24 sampai 11% bakteri uji dapat menunjukkan hasil positif. Demikian juga beberapa hasil uji yang lain, berdasarkan penjelasan lebih lanjut dari referensi yang diacu, di antara strain bakteri dimaksud dapat menujukkan variasi atau hasil yang berbeda, meskipun persentase data tersebut lebih sedikit, misalnya hasil referensi positif tetapi hasil uji negatif menunjukkan 90% atau lebih hasil adalah positif (Bergey’s Manual, 1994). Kondisi tersebut dapat dimaknai masih ada di antara galur bakteri yang populasinya kurang lebih 10% dapat menujukkan hasil negatif. Data mikrobiologi yang terkait erat dengan kasus penyakit, baik penyakit gastrointestinal
maupun respirasi pada orangutan di Indonesia sangat terbatas. Namun demikian, pernah dilaporkan bahwa beberapa kasus infeksi bakteri pada orangutan, seperti: infeksi Pseudomonas sp, Campylobacter sp, dan Klebsiella pneumonia (Pazzaglia et al., 1994; Lawson et al., 2006). Beberapa kasus identifikasi bakteri pada hewan primata yang pernah dilaporkan antara lain: infeksi Yersinia enterocolitica telah dilaporkan sebagai penyebab fatal enteritis primata di kawasan Karibia (Soto et al., 2013). Kasus infeksi E. coli galur enteroinvasif dan enterohemoragik telah dilaporkan terjadi dalam kasus diare monyet Rhesus. Kasus tersebut juga dilaporkan terjadi ko-infeksi oleh Campylobacter spp dan Helicobacter bilis (Kolappaswamy et al., 2014). Bakteri C. jejuni dan C. coli dilaporkan dapat diisolasi dalam kasus diare berulang pada 11
Wibowo et al.
Jurnal Veteriner
rans, dan E. coli. Bakteri tersebut secara umum merupakan mikroflora normal dalam saluran pencernaan, kecuali E. agglomerans. Strain E. agglomerans dikenal sebagai Erwinia herbicola yang banyak terdapat pada tanaman atau biji tanaman. Bakteri tersebut juga ditemukan di alam, air, tanah, dan sayuran. Ditemukannya bakteri ini pada kasus gastroenteritis pada orangutan sangat masuk akal, karena kebiasaan makan buah-buahan atau daun muda memungkinkan penularan penyakit, meskipun dalam kasus ini tidak bisa ditentukan sebagai penyebab primer atau infeksi sekunder. Rodriquez-Rodriquez (2007) melaporkan sejumlah bakteri yang berhasil diisolasi dari cavum buccalis pada squirell monkey, termasuk Enterobacter dan merupakan bakteri yang terbanyak diisolasi, mencapai 42%. Lawson et al. (2006) melaporkan salah satu penyebab airsakulitis pada anak-anak orangutan adalah Enterobacter sp, K pneumonia, dan Pseudomonas sp. Enterobacter dapat diisolasi dari sampel 2/9 orangutan dan 2/11 sediaan ulas pada kasus yang didiagnosis airsakulitis. Sebelum penggunaan antibiotik meluas, jarang ditemukan Enterobacter yang patogen dan dewasa ini patogenisitas mikro-organisme tersebut meningkat, mampu menimbulkan kasus penyakit, seperti infeksi nasokomial, infeksi saluran kencing, dan bakteriemia. Kasus E. agglomerans pernah dilaporkan teridentifikasi dari sampel darah, urin, dan luka pada manusia. Sementara itu, di Amerika Serikat E. agglomerans dilaporkan sebagai penyebab Enterobacter bakteriemia pada manusia (Grimont dan Grimont, 2006). Klebsiella sp merupakan bakteri komensal dalam saluran pencernaan hewan dan manusia, serta dapat ditemukan di alam baik dalam air dan di tanah. Pada hewan nonhuman primata Klebsiella sp merupakan mikroflora normal dalam feses dan mulut. Beberapa galur Klebsiella telah dikenal dan dilaporkan bersifat patogenik dan mampu menyebabkan sakit pada manusia. Faktor virulensi bakteri berhubungan dengan adanya fimbria yang berperan sebagai adhesin, phili, dan kapsula bakteri (Simmons dan Gibson, 2012). Podschun et al. (2000), melaporkan patogenesitas K. planticola mirip dengan patogenisitas dengan K. pneumonia, oleh karena itu berdasarkan data penelitian tersebut dinyatakan bahwa K. planticola sebagai patogenik Klebsiella. Peneliti lain menyatakan Klebsiella dan Citrobacter dilaporkan dapat diisolasi dari rongga pipi dan merupakan
orangutan yang dipelihara di kebun binatang (Pazzaglia et al., 1994). Hasil kultur teridentifikasi beberapa bakteri penyebab airsakulitis pada orangutan di suatu lembaga konservasi di Kalimantan, yaitu: Pseudomonas sp, Campylobacter sp, dan Klebsiella pneumonia yang menyebabkan timbulnya gejala batuk, halitosis, serta adanya leleran hidung dan cairan eksudat di dalam rongga kantong hawa (Lawson et al., 2006). Rahmi et al. (2014) melaporkan hasil monitoring sampel feses pelepasliaran orangutan di Cagar Alam Pinus Jantho, Aceh. Hasil isolasi dari sampel tersebut diketahui bakteri dari genus Salmonela sp. dan Shigella sp., serta E.coli. Iverson dan Cornelly (1981) melaporkan kasus yang diduga tuberkulosis pada orangutan ternyata terisolasi bakteri Acinetobacter calcoaceticus. Bakteri tersebut mampu menyebabkan bronchopneumonia fibrinosa dan airsacculitis. Mycobacterium tuberculosis dilaporkan dapat diisolasi dari hati dan dikonfirmasi dengan teknik deteksi reaksi polimerasi berantai pada orangutan yang dipelihara di Kebun Binatang Yongin, Cina, oleh Shin et al. (1995). Bakteri enterik yang dapat diisolasi dari sampel feses YKAY, yaitu: Citrobacter amalonaticus, Providensia rustigianii, dan Proteus mirabillis. Bakteri C. amalonaticus terdistribusi di tanah, air, dan makanan. Bakteri tersebut merupakan bakteri enterik yang pada umumnya sebagai mikroflora normal saluran pencernaan, tetapi dapat diisolasi dari sampel klinik dan dianggap sebagai bakteri patogen oportunistik (Bergey’s Manual, 1994). Bakteri P. rustigianii telah dilaporkan diisolasi dari feses manusia dan hewan, termasuk burung pinguin. Spesies bakteri tersebut dapat berkolonisasi pada saluran pencernaan dan telah dibuktikan dapat sebagai sumber infeksi sejumlah kasus diare pada manusia (Manos dan Belas, 2006). Bakteri P. mirabillis merupakan mikroorganisme normal dari berbagai spesies hewan dan mamalia. Bakteri tersebut terdistribusi secara luas di alam, seperti: di tanah, air, limbah, dan feses. Bakteri P. mirabillis telah dilaporkan dapat sebagai penyebab beberapa kasus infeksi pada manusia, termasuk infeksi nasokomial. Infeksi Proteus mampu menyebabkan derajat kerusakan sel yang lebih parah dibandingkan dengan infeksi E.coli (Manos dan Belas, 2006). Bakteri yang dapat diisolasi dari sampel yang berasal dari Yayasan BOS, yaitu: Klebsiella planticola, Enterobanter agglome12
Jurnal Veteriner Maret 2016
Vol. 17 No. 1 : 7-15
feses dari kasus penyakit gastrointestinal pada orangutan yang diperoleh dari YKA Yogyakarta, dapat diidentifikasi tiga jenis bakteri yaitu: C. amalonaticus, P. rustigianii, dan P. mirabilis. Sampel feses dari Yayasan BOS Samboja, Kalimantan Timur dapat diidentifikasi tiga bakteri yaitu: K. planticola, E. agglomerans, dan E. coli.
mikroflora mulut pada squirell monkey di Kosta Rika (Rodriquez-Rodriquez, 2007). Bakteri E. coli merupakan mikroflora normal saluran pencernaan hewan berdarah panas dan manusia. Beberapa galur menghasilkan enterotoksin dan faktor virulensi untuk dapat menginvasi jaringan dan mampu menyebabkan diare (Bergey’s Manual, 1994). Pada primata beberapa kasus infeksi E. coli strain enteroinvasif dan enterohemoragik pernah dilaporkan dalam kasus diare monyet Rhesus, yang diikuti ko-infkesi oleh Campylobacter spp dan Helicobacter bilis (Kolappaswamy et al., 2014). Kasus terkait infeksi E. coli, Salmonella dan Shigella pada orangutan juga dilaporkan oleh Rahmi et al. (2014). Data penelitian tersebut menunjukkan bahwa semua sampel feses orangutan yang diperiksa positif terisolasi E. coli, meskipun tidak ada informasi lebih lanjut tentang patogenisitas bakteri tersebut. Beberapa faktor penting penyebab infeksi bakteri enterik pada orangutan dalam rehabilitasi adalah lingkungan dan kualitas makanan. Dalam rehabilitasi orangutan dapat kesulitan mencari makan sendiri karena dalam tataran latihan, dan akibatnya akan mengambil sisa makanan yang jatuh dan terkontaminasi feses (Rahmi et al., 2014). Kasus diare koloni orangutan yang disebabkan Campylobacter spp. terjadi karena infeksi feko-oral melalui makanan orangutan tersebut karena penyebaran bakteri oleh lalat (Pazzaglia et al., 1994). Zimmerman et al. (2011) menekankan pentingnya sanitasi dan desinfeksi dalam kandang dan linkungan orangutang di kebun binatang. Pencucian lantai kandang dengan detergen dan pemberian desinfektan merupakan langkah penting untuk mengurangi patogen penyebab penyakit. Faktor kebersihan kandang, kualitas makanan dan minuman menjadi penting untuk dijaga agar orangutan terhindar dari penyakit gangguan pencernaan karena infeksi bakteri enterik patogen. Dalam kasus ini tidak ada informasi mengenai kualitas makanan, praktek sanitasi, dan desinfeksi yang dilakukan, dan lingkungan orangutan yang telah diambil sampelnya, tetapi analisis ini dapat dijadikan bahan evaluasi lebih lanjut.
SARAN Hasil penelitian ini menambah informasi dan data bakteri penyebab penyakit pada kasus gangguan gastrointestinal pada orangutan. Selanjutnya perlu dilakukan uji sensitivitas dengan berbagai antibiotik terutama yang digunakan dalam penanganan kasus tersebut, agar dapat diketahui efektivitas pengobatan yang dilakukan.
UCAPAN TERIMA KASIH Penelitian ini dapat dilaksanakan atas dukungan dana DIPA Nomor: 001/SP/LPPMDIT.KEU/DIPA/UGM/2014. Terima kasih penulis sampaikan kepada Direktorat Jenderal Perlindungan Hutan dan Konservasi Alam, Kementerian Kehutanan, Republik Indonesia, atas ijin pengambilan sampel pada orangutan yang digunakan dalam penelitian ini. Kepada kolega Yayasan Borneo Orangutan Survival, Samboja, Kalimantan Timur dan Yayasan Konservasi Alam Yogyakarta, Kulon Progo, Yogyakarta, yang telah membantu proses pengambilan sampel pada penelitian ini. Terima kasih juga disampaikan kepada Dr. drh. AETH Wahyuni, MSi yang telah membantu koleksi sampel.
DAFTAR PUSTAKA Acrenaz M, Marshall A, Goossens B, van Schaik C, Sugardjito J, Gumal M, Wich S. 2008. Pongo pygmaeus. The IUCN Red List of Treathened Species. Version 2014.3. www.iucnredlist.org. Diunduh tanggal 02 Mei 2015. Bergey’s Manual Determinative Bacteriology, 1994. Facultatively Anaerobic GramNegative Rods. 9th edition. (Eds). Holt JG, et al., Williams & Wilkins, 423, East Preston Street, Baltomore, Maryland, USA. Hlm. 175-289.
SIMPULAN Berdasarkan data yang diperoleh dalam penelitian ini dapat disimpulkah bahwa, sampel 13
Wibowo et al.
Jurnal Veteriner
Rahmi E, Agustina D, Jamin F. 2014. Isolasi dan Identifikasi Genus Salmonella dan Shigella dari Faeses Orangutan Sumatera (Pongo abelii) di Pusat Reintroduksi Orangutan Jantho. Jurnal Medika Veterinaria 8: 5-8.
Brandon-Jones D, Eudey AA, Geissmann T, Groves CP, Melnick DJ, Morales JC, Steward CB. 2004. Asean Primate Classification. Inter J Primatol 25(1): 97155. Galdikas BMF. 1981. Wild Orangutan Studies at Tanjung Putting Reserve, Central Indonesian Borneo, 1971-1977. National Geographic Society Research Report 13: 110.
Rianawati, Pratowo J. 2003. Infeksi Nematoda Gastrointestinal pada Orangutan (Pongo pygmaeus) di Kebun Binatang Gembiraloka Zoo Yogyakarta. J Sain Vet 21(1): 64-67. Rijksen HD. 1978. A Field Study on Sumatran Orang Utans (Pongo pgymaeus abelii) Lesson 1827: Ecology, Behavior and Conservation. (Thesis). Wagenigen. Agriculture University of Wagenigen. Hlm. 22, 38-42, dan 52-62.
Grethe S, Heckel J, Rietschel W, Hufert F. 2000. Molecular Epidemiology of Hepatitis B Virus Variant in Nonhuman Primates. J of Virol 74(11): 538-5381. Grimont F, Grimont PD. 2006. The Genus Enterobcater. Prokaryotes 6: 197-214.
Rodriguez- Rodriguez CE, Cavalin ER, Coronado M, Cuadra SJ, Porras RS, Espeleta G, 2007. Flora Bacteriana de la Cavidad Oral del Mono Titi (Samiri Oerstedii) Y Superfil de Sensibilidad a Antibioticos. Neotropical Primates 14(3): 103-109.
Harahap H. 1989. Keputusan Menteri Kehutanan No. 556/Kpts-II/1989. Jakarta. Departemen Kehutanan. Iverson WO, Cornelly R. 1981. Acinetobacter Infection Associated with Pneumonia in Orangutan. Primates 22(4): 587-589.
Simmons J, Gibson S, 2012. Bacterial and Mycotic Diseases of Nonhuman Primates, Nonhuman Primates in Biomedical Research, 32 Jamestown Road, London NW1 7BY UK. Elsevier Inc. Hlm. 126-130.
Kolappaswamy K, Nazareno J, Porter WP, Klein HJ. 2014. Outbreak of Pathogenic Eschericia coli in an Outdoor Houshed Non Human Primate Colony, J Med Primatol 43: 122124.
Singleton I, Wich SA, Griffifths M. 2008. Pongo abelii. The IUCN Red List of Trathened Species. Version 2014.3. www.iucnredlist. org. Diunduh tanggal 02 Mei 2015.
Lawson B, Garriga R, Galdikas BMF. 2006. Airsaculitis in Fourteen Juvenile Southern Bornean Orangutans (Pongo pygmaeus wurmbii). J Med Primatol 35(1): 49-54.
Shin NS, Kwon SW, Han DH, Bai GH, Yoon J, Cheon DS, Yon YS, AHn K, Chae C, Lee YS. 1995. Mycobacterium tuberculosis infection in orangutan (Pongo pygmaeus). J Vet Med Sci 57(5): 951-953.
Manos J, Belas R. 2006. The Genera Proteus, Providencia, and Morganella. Prokaryotes 6: 245-269. Nasution IT, Fahrimal Y, Hasan M. 2013. Identifikasi Parasit Nematoda Gastrointestinal Orangutan Sumatera (Pongo abelii) di Karantina Batu Mbelin, Sibolangit, Provinsi Sumatera Utara. Jurnal Medika Veterinaria 7(2): 67-70.
So-nguanmo P, Thawornsuk N, Rianhavorn P, Sommanustweechai A, Ratanakorn P, Poovoravan Y. 2010. High Prevalence of Antibodies against Hepatitis A Virus among Captive Nonhuman Primates. Primates 51: 167-170.
Pazzaglia G, Widjaja S, Soebekti D, Tjaniadi D, SImanjutak L, Lesamana M, Jennings G. 1994. Persistent, Recuring Diarrhea in a Colony of Orangutans (Pongo pygmaeus) caused by Multiple Strains of Campylobacter spp. Acta Tropica 57(1): 1-10.
Soto E, Griffin M, Verma A, Alcala FC, Beierschimitt A, Marfisi JB, Arauz M, Illanes O. 2013. An Outbreak of Yersinia entercolitica in a Captive Colony of African Green Monkeys (Chlorocebus aethiops sabaeus) in the Caribbean. Comparative Medicine 5(63): 439-444.
Podschun R, Fisher A, Ullman U. 2000. Expression of Putative Virulence Factors by Clinical Isolates of Klebsiella planticola. J Med Microbiol 49: 115-119. 14
Jurnal Veteriner Maret 2016
Vol. 17 No. 1 : 7-15
Sugardjito J, van Schaik CP. 1991. Orangutans: Current Population Status, Threats and Conservation Methods. Procedings of the Great Aps Conference, Jakarta. Departemen Kehutanan dan Departemen Pariwisata. Hlm. 142-145.
Verschoo EJ, Warren KS, Langenhuijzen, Heriyanto S, Swan RA, Heeney JL. 2001. Analysis of Two Genomic Variant of Orangutan Hepadnavirus and Their Relationship to Other Primate Hepatitis Blike Viruses. J of Gen Virol 82: 893-897.
Supriadi W, Fitria RW, Nurcahyo RW. 2012. Balantidium sp. Infection in Faeces Samples of Orangutan (Pongo pygmaeus) from Care Center and Tanjung Putting National Park Area, Central Borneo. Biologi, Medicine & Natural Product Chemistry 1(1): 47-52.
Zimmermann N, Pirovino M, Zingg R, Clauss M, Kaup FJ, Heistermann M, Hatt JM, Steinmets HW. 2011. Upper Respiratory Tract Disease in Captive Orangutans (Pongo sp): Prevalence in 20 Eurepean Zoos adn Predispoing Factors. J Med Primatol 40: 365-375.
Warren KS, Heeney JL, Swan RA, Heriyanto, Verschoor EJ. 1999. A New Group of Hepadnavirus Naturally Infecting Orangutan. J of Virol 73(9): 7860-7865. Van Schaik CP, Azwar. 1991. Orangutan Densities in Different Forest Types in the Gunung Leuser National Park (Sumatera), as Determined by Nest Counts, Medan. Report for Department Kehutanan/Leuser Development Program.
15
