Baktériumok
Dr. Varga Csaba
Mikroorganizmusok •Akariota •Prokariota •Eukariota Vírusok, prionok, mikorplazmák, rickettsiák, clamidiák, baktériumok, sugárgombák, gombák, algák, protozoák.
Prokariota • Baktériumok • Nincs maghártya, nincsenek hisztonok, nincs mitokondrium, kloroplasztisz, vakuolum, ET, Golgi-készülék, lizoszóma, riboszóma az organellumokban. • A magállomány egyetlen DNS molekula.
Eukariota • Alga, gomba, protozoon, magasabb rendű növények és állatok • Sejtmaghártya, DNS, legalább 3 kromoszóma, mitózis, hisztonok, mitokondrium, vakuolum, Golgi-készülék, lizoszóma, ER, kloroplasztisz
Maghártya DNS+ fehérje DNS sejtszervecskében Kromoszómaszám Mitózis Riboszóma Riboszóma sejtszervecskében Mitokondrium Kloroplasztisz Citoplazma-membránszerkezet Plazmamozgás
Prokariota Eukariota + + + 1 >1 + 70 S 80 S 70 S + +/+/+ +
Baktériumok
Előfordulás • • • • •
Talaj Víz Levegő Élelmiszer Takarmány
Jelentőség • Alkalmazkodóképesség • Anyagok körforgalma • Szerves és szervetlen vegyületek átalakítása • Élelmiszerek (takarmányok) tartósítása, romlása • Bioszintézis • Teszt
talajban 100 millió baktérium, 16 millió sugárgomba, 50100 ezer alga, 10 ezer protozoa minden gramm termőtalajban! Évszakos változás, a nedvességtartalom miatt. pH, humusztartalom
hőmérséklet és a
vízben • • • •
Bennszülött+ideiglenes fajok (levegőből) Plankton: a nyílt vízben szabadon élnek Bentosz: felületeken telepednek meg. Neuszton: a víz felszínén
• Szaprofiták és patogének
levegőben • Mennyiségük a szennyezettséggel arányos. • Szabad légkör 500-1000 csíra/m3 • Szoba, váróterem, iskola 5000-500000 csíra/m3
élelmiszerekben • • • •
Viaszos héj, emberi közvetítés Darált hús! Toxin Fajspecifikus
takarmányokban • • • •
Szántóföld, állat+környezet. Gombák-baktériumok Szántóföldi, raktári, korhasztó Toxin.
1500 baktérium /cm
2
Baktériumok Alak szerint: • Gömb, pálcika, csavar • Fonalas, elágazó, sugaras
Baktériumok Gömb: • Monokokkusz • Diplokokkusz • Sztreptokokkusz • Tetrakokkusz • Sztafilokokkusz • Szarcina 1 μm
Baktériumok Pálcika: • Spóraképzők (Bacillus, Clostridium) • Spórát nem képzők • Aerob, anaerob Gömbölyded, rövid, vastag, hosszú, vékony, törékeny 0,6-200 μm x 0,4-3 μm
Baktériumok Csavar: 0,2-0,5 μm x 1-5 μm • Vibrio • Spirillum • Spirochatea 200 μm Fonalas Elágazó Sugaras
Baktériumok Vitális részek: • Sejtfal • Citoplazmahártya • Citoplazma • Magállomány
Baktériumok Járulékos részek: • Tok • Ostor, csilló • Spóra • Fimbria • Zárványok
A sejtfal Legkülső, összetett réteg (di-amino pimelinsav) 0,1-0,2 μm vastag. Funkciói: Szilárd támasz Táplálkozásban Antigéneket tartalmaz G+, G-
G+ • Kevesebb féle aminosav, • Több aminocukor
G• Didezoxihexózok • Magas lipidtartalonm (1520%) • Bonyolultabb
A sejthártya • 0,1 μm vastag • Fehérje, lipoid, poliszacharid • Folyékony mozaikegység modell: a folyamatos poláris, lipid kettős rétegben a membránfehérjék viszonylag szabadon mozoghatnak
A sejthártya szerepe • • • • •
Anyagcsere legfontosabb szerve Az enzimszintézis helye Elektronátvitel Spóraképzés Sejtalkotók bioszintézise
Citoplazma A magállománytól és a volutinszemcséktől megszabadított belső sejttartalom. Zárvány, granulum, vakuólum, mitokondrium, endoplazmatikus retikulum, riboszómák, szénhidrát metabolizmus enzimei.stb. Redox reakciók, enzimek szintézise, fehérjék és nukleinsavak bioszintézise
A magállomány • • • •
Feulgen + Nincs maghártya és nukleolusz. Csak DNS-t tartalmaz. Funkcióval rendelkező része a kromoszóma.
A tok • A sejtfal felszínén nyálkahártya. • Szénhidrátban gazdag, de foszforban és nitrogénben szegény körülmények között. • Genetikailag determinált, de lehet mutáció • Táptalajon sima fényes felületű, folyékony közegben stabil szuszpenziót képeznek (S-típus). • Az S-típus öröklődően átalakulhat R típussá. Ez a baktériumdisszociáció.
homopolimer
heteropolimer
Tok típusok • Poliszacharid tok: dextrán • Aminosav tok:D-glutaminsav polimer • Cukor+uronsav+aminocukrok
A tok szerepe • Védelem • Tartalék tápanyag: oldódást segíti • Összefüggésben van a baktérium virulenciájával
Baktériumspóra Endospóra: a sejten belül képződik, ellenálló képlet, öregedő tenyészetekben. A szaporodás szerve, a pálcikákra jellemző. A plazmának egy meghatározott ponton való tömörülésével kezdődik. Itt halmozódik fel a citoplazma és az örökítőanyag és spórafalakkal elkülönül a sejt többi részétől. Aerob, anaerob
• A spóra általában ovális alakú, de lehet gömb is. • Ellenálló: alacsony víztartalom és magas DPS.
Ostor (flagellum) • Aktív és passzív mozgás. • Nem mindig rendelkezik ostorral az ostoros. • 12-19 nm vastag és akár többször hosszabb mint maga a sejt.
atrich
amphitrich
monotrich
lopho-amphitrich
lophotrich
peritrich
• • • •
Fehérje ATP? Proton gradiens? 5-5000 μm/s Bazális szemcse.
10 μm/s
Fimbria • G-, mikrométeres nagyságrendű • A citoplpazmából ered, üreges, csöves, fehérje a fő alkotója. • Nagyfokú tapadóképesség • A citoplazmamembrán és a környezete közötti anyagcsere • szexfimbriák
Riboszóma Szabadon a citoplazmában vagy a membrán belső oldalához kötődve. Szintézis
Mezoszómák A citoplazma gomolyszerű betüremkedései A sejtfal polimereinek szintézisében van szerepe. Sejtosztódás, endospóra képzés, replikálódó kromoszóma lehorgonyzása. Különböző funkciók kooordinálása.
Zárványok Tápanyagkészlet, anyagcseretermék Poliszacharid Lipoid Metakromatikus (volutin) szemcse Organikus polifoszfát, RNS, fehérje, lipoid. Növekvő szaporodó baktériumban csak kevés van.
Pigmentek • Intracelluláris • Extracelluláris
Baktériumok keletkezése • • • •
Az élet kezdetleges formái (idegen bolygó) Autotróf elmélet Heterotróf elmélet A vírusokból alakultak ki
A baktériumok tenyésztése, telepmorfológia • Táptalaj összetétel, sterilitás • Parazita nehezebb • Nincs univerzális táptalaj A tenyésztés célja: számlálás, kinyerés és elszaporítás.
lemezöntés
Nyers (kevert) tenyészet: sok különböző faj. Tiszta tenyészet: egyetlen faj vagy törzs. Telep (kolónia): szabad szemmel is látható. Alak, méret, szín, konzisztencia. CFU= Cell Forming Unit
Baktériumok vegyi összetétele • • • • • • •
Víz C,H,O,N P,S,K,Na,Ca,Mg,Fe,Cl Cu,Zn,Mn,B,Mo,I,Ni,Br,As,Si,Sn,Ti,Se Fehérjék 15-81% Szénhidrátok 50% Lipidek: 1,5-40 %
Baktériumok tápanyagigénye • CO2, szénhidrogének, alkoholok, szerves savak, szénhidrátok, peszticid, • N2, NH3, NH4, aminosavak, fehérjék, peptonok
Baktériumok anyag és energiacseréje • Anabolizmus (asszimiláció, felépítő): E igényes. • Katabolizmus (disszimiláció, lebontó): E termelő. Egyensúly, növekedés, pusztulás. Raktározó anyagcsere. 1 g tejsavas erjesztő baktérium 1 óra alatt 180-15 000 g cukrot bont le és alakít át.
Transzportfolyamatok Víz, szerves sók, hőmérséklet, pH, légzési feltételek, koncentrációs viszonyok. • CM áteresztőképessége • Koncentráció a sejten belül és kívül • Tápanyag oldhatósága • Átalakulás sebessége Enzimrendszerek, növekedési faktorok.
Transzport típusok • Diffúzió: apoláros, kicsi, koncentrációgradiens. • Közvetített transzport: telítési kinetika, szubsztrátspecifitás, gátolhatóság – Passzív:koncentrációgradiens – Aktív:ATP K-Na-adenozin-trifoszfát – Csoporttranszlokáció: kémiai változás is G6P
Baktériumok termékei • • • • • • • •
Extracelluláris enzimek Toxinok Antibiotikumok Pigmentek Íz és zamatanyagok Bioszanyagok Savak Gázok
Extracelluláris baktérium enzimek
• Főleg poliszacharidokat bontó enzimek és • Proteolitikus enzimek
Baktérium toxinok Olyan fehérjetermészetű anyagok, melyek bioszintézise a baktériumsejtbe az evolúció során bejutott extrakromoszomális DNS molekulák kontrollja alatt áll. •Exotoxin: nagyon mérgező, hőérzékeny •Endotoxin: kevésbé mérgező Toxoid vagy anatoxin
Előfordulás Mérgező hatás Hő Proteolitikus enzimre Kémiailag Antigén sajátosság Inkubációs idő Formalin Kórok Farmakológiai hat.
Exotoxin (G+) Cl. tetani, Cl. botulinum Sejten kívül Rendkívül mérgező Érzékeny Érzékeny
Endotoxin Bact. cholerae, Mycob. tubercolosis
Fehérje Magasfokú Van méregtelenít Primer patogén Fajlagos
foszfolipid Kisebb mértékű Nincs Nem méregtelenít Nem tisztázott Nem specifikus
Sejten belül Kevésbé mérgező Nem érzékeny Ellenálló
Antibiotikumok Mikroorganizmusok által termelt olyan anyagok, melyek más mikroorganizmusok élettevékenységét gátolják vagy elpusztítják azokat. Bakteriosztatikus Baktericid
Pigmentek • Extra és intracelluláris • A sejten belül maradnak
Íz és zamatanyagok • Tej • Sajt • Streptococcus • Penicillium • Actinomyces
Bioszanyagok A plazmatikus növekedést serkenti, gyorsítja a környezet anyagainak felhasználását. (vitamin, hormon, aminosav, mikroelem)
Savak Gátolja más baktériumok tevékenységét. Tejsav, vajsav, propionsav, hangyasav, stb.
Gázok • CO2, • H 2, • NH3, • CH4
Baktériumok növekedése és szaporodása Növekedés: mennyiségi változás, az összetevők arányos gyarapodása. A baktériumok sejttömege 20-30 percenként megkétszereződik. Ez nem arányos a felszín (telep) növekedésével.
felület
r3 r2
tömeg
Baktériumok növekedése és szaporodása Hasadás (szaporodás): növeli a felszínt. Schizomycetes. A magállomány megkettőződik. A sejtek megnyúlnak, választófal képződik, mely két részre osztja a baktériumot. Szétválnak a leánysejtek. A hasadás iránya lehet a hossztengelyre merőleges vagy azzal párhuzamos. A talajban 72 óra alatt 1,4 ·1017 t. (Fjodorov)
Baktériumszám logaritmusa
A baktériumok szaporodásának szakaszai Összes baktérium I.
II.
III.
IV.
Élő baktériumok
idő
I. Lappangó (látens, lag fázis) • • • • •
Nyugalmi szakasz Pl. friss oltás Tömegük nő nem a számuk 2-3 óra. A sejtek megfiatalodnak
II. Exponenciális (log) fázis • Fokozatosan minden sejt osztódni kezd • Számuk generációs időnként megduplázódik (geometriai sort követ) Osztódások száma =
Generációs idő =
lg N1- lg N0 lg 2 az eltelt idő Osztódások száma
III. Stacioner (egyensúlyi szakasz) • Az egyenletes szaporodás végén kezdődik. • Az élő baktériumok száma változatlan
Elfogy a szubsztrát, toxinok keletkeznek, megváltozik a táptalaj, biológiai tér?
IV. Csökkenő (pusztuló, hanyatló) fázis • A szaporodással már nem képesek pótolni az elhaltak számát. • Az élők száma rohamosan csökken. Nyílt tenyésztési rendszer spórások Liofilizálás
Baktériumok rendszerezése Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology 19 csoport 33 szekció • Strukturális sajátosság, • Fiziológiai karakter • Biológiai táplálkozási karakter • Ökológiai karakter • Genetikai adatok • Referencia törzs
Baktériumok rendszerezése • • • • • • • • • •
Fototrófok Csúszó mozgásra képesek Hüvellyel körülvettek Sarjadó és/vagy függelékkel rendelkező Spirochaetak Spirális és hajlott alakú G- aerob pálcika és kokkusz G-anaerob pálcika G- anaerob baktériumok G- kokkusz és kokkobacillus
Baktériumok rendszerezése • • • • • • • • •
G- aerob kokkusz G- kemolititrófok Metánt képzők G+ kokkusz Endospórát képző pálcikák és kokkuszok G+ spórátlan pálcikák Aktinomyceták és hasonló organizmusok Rickettsiák Micoplazmák
A baktériumok meghatározása • • • • • •
Morfológia Tenyésztési sajátosság Fiziológiai tulajdonságok Biokémiai reakciók Szerológiai reakciók Állatkísérletek
Mikoplazmák • Micéliumhoz hasonló plazma. • Nincs szilárd sejtfaluk • Protoplazmájuk 3 rétegű membránnal borított • Sarjadzással szaporodnak • Nem mozgékonyak • G• Nem obligát paraziták
Mikoplazmák • • • • • •
Baktérium típusú riboszómákat tartalmaznak A baktériumszűrőn áthaladnak Táptalajon is növekednek Vírusokkal fertőződnek Polimorf mikroorganizmusok A legkisebb szabadon élő mikroorganizmusok
Mikoplazmák Csoportosításuk: • • • •
Légzőszervi megbetegedés Húgyivari traktus megbetegedései Szív és izületi megbetegedések Szaprofiták
Rikettsiák • • • • • • •
GMozdulatlan Ploemorf Nem szűrhető 450-550 nm Mesterséges táptalajon nem tenyészthető Obligát parazita
Rikettsiák • • • • •
Sejtfallal rendelkeznek Sejtmagekvivalenst tartalmaznak Hasadással szaporodnak DNS-t és RNS-t is tartalmaznak Szulfonamidokra és antibiotikumokra érzékenyek • Tífusz, szívvizenyő, papagájkór, sziklás hegységi foltos láz.