BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Kanker Payudara 2.1.1. Etiologi dan Patogenesis Kanker payudara berasal dari unit sekretorius payudara, yaitu unit duktuslobulus terminal. Beberapa faktor risiko kanker payudara telah diketahui saat ini antara lain faktor genetik (5 - 7%), riwayat keluarga menderita kanker payudara, riwayat pernah menderita kanker payudara sebelumnya, faktor menstruasi dan reproduksi, paparan radiasi, penggunaan terapi sulih hormon, alkohol dan diet tinggi lemak.
27
Meskipun telah banyak diketahui faktor risiko, ternyata 75%
kanker payudara tidak ada hubungan dengan faktor risiko yang ada.28 Faktor-faktor etiologi tersebut secara garis besar bisa dikelompokkan menjadi tiga, yaitu: a. Faktor genetik. Setiap kanker bisa dipandang sebagai proses genetik karena kanker terjadi dari perubahan genetik atau mutasi. Hanya sebagian kecil kanker herediter, sisanya adalah sporadik dan berhubungan dengan mutasi somatik yang didapatkan selama hidup. Individu yang membawa mutasi genetik, lahir satu langkah lebih dekat dengan timbulnya tumor dan mempunyai kecenderungan menderita kanker pada usia muda.29 Pada kanker payudara, proses ini bisa berlangsung mulai dari mutasi genetik, hiperplasia, karsinoma in situ, kemudian kanker metastatik. Pada kanker payudara herediter, terjadi pertama kali adalah mutasi yang berhubungan dengan repair DNA dan apoptosis.30 7
b. Faktor hormonal. Hormon estrogen merupakan hormon utama pemicu timbulnya kanker payudara. Pada wanita dengan kadar estrogen yang tinggi seperti nuliparitas, menarche awal, usia paparan estrogen lama, tidak laktasi dan terapi sulih hormone pada menopause akan mempunyai risiko lebih tinggi terkena kanker payudara. Estrogen dan progesteron mempengaruhi perkembangan dan perubahan dari kelenjar payudara yang memiliki berbagai macam reseptor hormon. Paparan estrogen akan meningkatkan faktor-faktor proliferasi sel dan bila tidak terkendali secara biologis akan berkembang menjadi kanker mengikuti tahapan-tahapannya. 31
c. Faktor lingkungan Paparan agen karsinogenesis dari lingkungan dapat berupa zat kimia, zat makanan, infeksi dan faktor fisik seperti radiasi radioaktif, dan trauma.
32
Beberapa faktor lingkungan seperti bahan kimia organoklorin, lapangan elektromagnetik, merokok aktif dan pasif dan penggunaan implan silikon sampai saat ini belum terbukti menaikkan risiko terjadinya kanker payudara. 33,34 2.1.2. Klasifikasi Klasifikasi Karsinoma payudara oleh World Health Organization (WHO).35 1. NONINVASIVE CARCINOMA Ductal carcinoma in situ Lobular carcinoma in situ 2. INVASIVE CARCINOMA Invasive ductal carcinoma Invasive lobular carcinoma Mucinous carcinoma 8
Medullary carcinoma Papillary carcinoma Tubular carcinoma Adenoid cystic carcinoma Secretory (juvenile) carcinoma Apocrine carcinoma Carcinoma with metaplasia (metaplastic carcinoma) Inflammatory carcinoma Other (specify) 3. PAGET'S DISEASE OF THE NIPPLE
2. 2. Peran sistem imun pada tumor Fungsi sistem imun adalah fungsi protektif dengan mengenal dan menghancurkan sel – sel abnormal itu sebelum berkembang menjadi tumor atau membunuhnya kalau tumor itu sudah tumbuh. Peran sistem imun ini disebut immune surveillance, oleh karena itu maka sel – sel efektor seperti limfosit B, Tsitotoksik
dan
sel
NK
harus
mampu
mengenal
antigen
tumor
dan
memperantarai/menyebabkan kematian sel – sel tumor. 35,36 Beberapa bukti yang mendukung bahwa ada peran sistem imun dalam melawan tumor ganas diperoleh dari beberapa penelitian, diantaranya yang mendukung teori itu adalah : 1) banyak tumor mengandung sel – sel mononuklear yang terdiri atas sel T, sel NK dan makrofag; 2) tumor dapat mengalami regresi secara spontan; 3) tumor lebih sering berkembang pada individu dengan imunodefisiensi atau bila fungsi sistim imun tidak efektif bahkan imunosupresi seringkali mendahului pertumbuhan tumor; 4) dilain pihak tumor seringkali menyebabkan imunosupresi pada penderita. Bukti lain yang juga mendukung bahwa tumor dapat merangsang sistem imun adalah ditemukannya limfosit berproliferasi dalam kelenjar getah bening yang merupakan draining sites dari pertumbuhan tumor disertai peningkatan
ekspresi MHC dan intercellular 9
adhesion molecule (ICAM) yang mengindikasikan sistem imun yang aktif. 35,36 Sebukan limfosit disekitar sel kanker secara histologik mempunyai nilai prognostik yang baik karena kecepatan pertumbuhan sel kanker akan menurun. Secara in vitro, beberapa sel imun di sekitar sel kanker terbukti dapat membunuh sel kanker disekelilingnya.36Hubungan antara banyaknya limfosit yang ditemukan di antara kelompok sel kanker secara histologi dengan prognosis penderita telah ditunjukkan pada kanker leher rahim.40 Sel imun yang berada
di sekitar sel kanker yang berperan dalam
perondaan terhadap kanker adalah limfosit T sitotoksik (CTL), sel NK (Natural Killer) dan makrofag. Setelah mengenal sel kanker sebagai benda asig, ketiga sel imun tersebut akan menghancurkan sel kanker.
35,37
Sel CTL dan sel NK
melakukan cara sitotoksisitas yang sama yaitu dengan mengeluarkan perforin, sedangkan makrofag menggunakan cara fagositosis. Proses antigen tumor in vivo akan melibatkan baik respon imun humoral maupun seluler. Sampai saat ini belum ada bukti antibodi secara sendiri dapat menghambat perkembangan / pertumbuhan sel tumor. Dengan demikian respon imun humoral dalam bentuk antibodi terhadap tumor selalu memerlukan bantuan efektor imun seluler.35 2.2.1. Limfosit T sebagai Efektor anti tumor Subpopulasi limfosit T, limfosit T-helper dan T- sitotoksik sama-sama berperan dalam mengeliminasi antigen tumor. Sel yang mengandung antigen tumor akan mengekspresikan antigennya bersama molekul MHC kelas I yang kemudian membentuk komplek melalui TCR (T-cell Receptor) dari sel Tsitotoksik (CD8), mengaktivasi sel T-sitotoksik untuk menghancurkan sel tumor 10
tersebut. Sebagian kecil dari sel tumor juga mengekspresikan antigen tumor bersama molekul MHC kelas II, sehingga dapat dikenali dan membentuk komplek dengan limfosit T-helper (CD4) dan mengaktivasi sel T-helper terutama subset Th1 untuk mensekresi limfokin IFN-
-
merangsang sel tumor untuk lebih banyak lagi mengekspresikan molekul MHC kelas I, sehingga akan lebih mengoptimalkan sitotoksisitas dari sel T-sitotoksik (CD8).35,36 Konsep ini diaplikasikan dalam pengobatan tumor menggunakan TIL (tumor infiltrating lymphocytes), yaitu sel – sel mononuklear yang berinfiltrasi menuju ke sekitar jaringan tumor padat karena adanya reaksi inflamasi, sel tersebut diperbanyak secara kultur invitro dengan penambahan IL-2.35 Th 1 juga mensekresi IL-2, IL-3. Th 2 mensekresi IL-4, IL-5 dan IL-6.
Gambar 1. Fungsi sel-sel Th1.34 Diambil dari :Abbas AK, Lichtman AH, Pober JS.
11
2.2.2. Makrofag Makrofag
juga
berperan
sebagai
APC
dalam
mengolah
dan
mempresentasikan antigen tumor kepada sel T helper, maupun bertindak langsung sebagai efektor dengan melisiskan sel tumor.35,37 Makrofag yang berperan dalam mekanisme tersebut adalah makrofag aktif yaitu makrofag yang telah diaktifasi oleh Macrofag Activating Factors (MAF), suatu sitokin yang dihasilkan limfosit T yang distimulasi antigen. Makrofag yang tidak aktif telah dibuktikan tidak memiliki kemampuan melisis sel tumor.31,35 Seperti juga pada sel NK, mekanisme pengenalan sel tumor sasaran oleh makrofag juga belum jelas. Kemampuan untuk berikatan dengan sel tumor terjadi karena sel makrofag juga memiliki reseptor Fc dari IgG, sehingga dapat bekerja sama dengan IgG dalam melisiskan sel tumor. Penyebab terjadinya lisis sel tumor disebabkan oleh pengaruh enzim lisosomal, metabolit yang reaktif terhadap oksigen dan NO. Makrofag aktif juga mensekresi sitokin antara lain IL-12 dan Tumor Necrosis Factor (TNF). IL-12 berperan memacu proliferasi dan aktivasi sel T CD4+, sel T CD8+ serta sel NK. TNF, sesuai namanya mampu melisis sel tumor melalui cara : 1) TNF berikatan dengan reseptor permukaan dari sel tumor dan secara langsung melisis sel tumor, 2) TNF dapat menyebabkan nekrosis dari sel tumor dengan cara memobilisasi berbagai respon imun tubuh.36
12
Gambar 2. Respon imun terhadap sel kanker. Diambil dari : Contran RS, Kumar V, Robbins SL. Robin 36
Gambar 3. Peran makrofag, sel NK, CTL terhadap sel target, Diambil dari : Contran RS, Kumar V, Robbins SL. Robin 36
Proses pengaktivan makrofag bukanlah proses tunggal. Untuk melihat apakah makrofag teraktivasi maka dilakukan pengukuran tertentu misalnya adalah kemampuan killing terhadap sel tumor. Aktivasi makrofag diakibatkan adanya peningkatan transkripsi gen – gen.
Adanya peningkatan ekspresi gen – gen 13
tersebut maka makrofag dapat melakukan fungsi yang tidak dapat dilakukan oleh sel yang sama dalam keadaan istirahat. Fungsi tersebut antara lain adalah killing bacteria yang sudah difagositosis. Sitokin aktivator makrofag yang poten adalah IFN- . IFN- bukanlah satu – satunya sitokin yang mengaktivasi makrofag, tetapi makrofag juga diaktifkan oleh kontak dengan limfosit T melalui CD 4. Beberapa ciri yang menunjukkan makrofag teraktivasi diuraikan sebagai berikut35 : 1. Makrofag teraktivasi akan meningkat kemampuan killing-nya terhadap mikroorganisme. Killing
terhadap
bakteri
menyangkut
proses
fagositosis
pembentukan reactive oxygen species (ROS). Sitokin seperti IFN-
dan akan
meningkatkan baik endositosis maupun fagositosis oleh monosit. Fagositosis terhadap partikel tertentu dapat ditingkatkan dengan opsonisasi bakteri yaitu dengan melapisi bakteri dengan molekul Ig
atau komplemen. IFN-
menyebabkan ekspresi reseptor dengan ikatan kuat terhadap bagian Fc dari IgG pada makrofag meningkat. Setelah bakteri masuk ke dalam sel maka makrofag akan melakukan pembunuhan dengan pembentukan reactive oxygen species (ROS) melalui jalur reactive oxygen intermediates (ROI). 2. Makrofag teraktivasi akan memacu inflamasi akut dengan mengeluarkan mediator - mediator inflamasi. Beberapa mediator seperti platelet activating factor (PAF), prostaglandin dan leukotrien adalah lipid. Beberapa disintesis oleh makrofag sendiri dan yang lainnya dihasilkan dari molekul-molekul plasma. Sebagai contoh, makrofag dapat menghasilkan tissue factor yang dapat menginisiasi clotting cascade ekstrinsik. 14
Trombin sebagai protease darah yang teraktivasi selama clotting cascade akan menyebabkan neutrofil dan sel endotel mensintesa PAF. Pemberian IFN- akan meningkatkan kapasitas
biosintesis makrofag untuk membentuk mediator
semacam tissue factor. Akibat mediator – mediator yang dilepaskan maka terjadilah inflamasi lokal. 3. Makrofag teraktivasi akan meningkat efisiensinya sebagai sel APC. Peningkatan kapasitas presentasi antigen berhubungan dengan ekspresi molekul MHC kelas II pada permukaannya. IFN-
diketahui sebagai aktivator
untuk transkripsi gen – gen MHC kelas II, tetapi di makrofag granulocytemacrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) juga mempunyai efek serupa. Fungsi kostimulator juga meningkat pada makrofag yang terkativasi. Pada keadaan teraktivasi, makrofag akan mengekspresikan molekul-molekul keluarga B7 dan meningkatkan kadar ICAM-1 dan LFA-3. Pada akhirnya makrofag teraktivasi menghasilkan sitokin seperti IL-12 atau IFN-
yang memacu
diferensiasi limfosit. Apabila proses inflamasi dan aktivasi makrofag gagal mengeradikasi mikroba
maka
produk-produk
makrofag
teraktivasi
akan
memodifikasi
lingkungan jaringan lokal, selanjutnya dimulailah penghancuran jaringan lokal dan digantikan jaringan ikat lain. 4. Makrofag teraktivasi akan membunuh sel – sel tumor
Meskipun
makrofag
teraktivasi
biasanya
dihubungkan
dengan
mekanisme efektor pada pertahanan terhadap organisme infeksius tetapi dari pengamatan didapatkan bukti bahwa makrofag teraktivasi akan membunuh sel-sel 15
ganas. Efek antitumor makrofag ini berhubungan dengan kemampuannya menghasilkan TNF yang menyebabkan kematian sel – sel tumor. Mekanisme antitumor kedua yang terjadi pada mencit adalah kemampuannya menghasilkan NO yang akan membunuh sel – sel tumor. Apoptosis adalah suatu kematian sel yang terprogram atau programmed cell death. Sekali terjadi aktivasi akan menyebabkan reaksi enzymatic intraseluler. Enzyme, protein, dan DNA akan terurai, dan tidak ada komponen intraseluler yang terdispersi ke ekstraseluler. Sel mengalami apoptosis akan mengeluarkan signal ke ekstraseluler berupa phospolipid pada membran selnya yang dapat dikenali oleh sel-sel imun, terutama makrofag.37 Apoptosis dapat dipicu melalui beberapa stimulus dari luar maupun dalam sel, dapat berupa signal ke reseptor membran sel, kerusakan DNA yang menyebabkan defek DNA, kemoterapi, radiasi dan lainnya. Proses apoptosis dapat melalui jalur ekstrinsik dan intrinsik. Jalur ekstrinsik melalui stimulasi reseptorreseptor kematian tranmembran seperti reseptor Fas yang berlokasi pada membran sel. Untuk jalur intrinsik, inisiasi dimulai dari mitokondria yang melepaskan signal-signal. 38,39. Jalur Ekstrinsik, molekul penanda dikenal sebagai ligand, yang dilepaskan oleh sel yang lain atau dari lingkungan, terikat ke reseptor kematian transmembran sel target Jalur ekstrinsik ada 2 tipe yaitu, I melalui aktifasi death reseptor dilanjutkan pembentukan death-inducing signal complex (DISC) dan caspase mengambil alih kelanjutannya.37Tipe II, signal yang tidak cukup kuat dari
16
death receptor harus diamplifikasi oleh pelepasan enzim mitokondria (sitokrom C) dengan perantara Bcl2. 41 Fas Ligand (FasL) akan terikat ke reseptor Fas sel target yang akan memicu berbagai macam reseptor beragregasi di permukaan sel target. Agregasi tersebut merekrut protein adaptor yaitu Fas-associated death domain protein (FADD) yang berada pada sitoplasma disekitar reseptor. FADD kemudian menarik caspase-8, suatu protein inisiator, untuk membentuk DISC. Caspase-8 yang terlibat dalam DISC akan teraktifasi dan akan mengaktifkan caspase-3, suatu protein efektor yang menginisiasi degradasi sel. Caspase-8 yang aktif juga akan memicu pelepasan sitokrom dari mitokondria setelah mengaktifkan protein BID yang bekerja pada tBID pada membran mitokondria dan di mulailah jalur intrinsik. 42 Jalur intrinsik dipicu oleh adanya stress seluler, khususnya stress mitokondrial yang disebabkan oleh kerusakan DNA dan paparan panas. Dengan menerima signal stress, protein-protein proapoptosis dalam sitoplasma seperti BAX dan BID, mengikatkan diri ke membrane mitokondria untuk memberikan signal internal. Signal oleh BAX dan BID saja tidak cukup untuk menginisiasi, sehingga diperlukan pelepasan sitokrom c dari mitokodria dan muatan intramembran mitokondria. Sitokrom c yang terlepas membentuk komplek dengan adenosine triphosphat (ATP) dan apoptotic protease activating factor 1 (Apaf-1), suatu enzim, di dalam sitoplasma akan mengaktifkan caspase-9, suatu protein inisiator. Caspase-9 aktif bersama dengan sitokrom c, ATP dan Apaf1membentuk komplek apoptosom, komplek tersebut disebut sebagai komplek 17
protein cytosolic death signaling, 7, protein efektor degradasi.
44
43
yang akan mengaktifkan caspase-3, -6, and Selain sitokrom c, muatan intra membran
melepaskan pula apoptosis inducing factor (AIF), yang memfasilitasi fragmentasi DNA dan Smac/protein Diablo yang menghambat faktor penghambat apoptosis. 45
Gambar 4. Proses apoptosis 34 Diambil dari :Abbas AK, Lichtman AH, Pober JS.
2.3. Nigella sativa Jintan Hitam, Habattus Sauda, Black Seed, Black Cumin, Kalunji, Nutmeg Flower, Kalajira, Fennel flower, and Roman Coriander adalah nama-nama yang umum dipakai untuk Nigella sativa L. Tanaman ini termasuk family Ranunculaceae dan genus Nigella, adalah tanaman yang berasal dari Mediterania dan Asia Timur. Bijinya digunakan sebagai stimulant meningkatkan produksi susu di India, pada jaman kerajaan Romawi digunakan sebagai bumbu masak dan di Perancis digunakan sebagai pengganti merica. 9
18
Gambar 5. Bunga dan Daun serta biji Nigella sativa Diambil dari Khan M45
Nigella Sativa telah ratusan tahun dimanfaatkan oleh orang Timur Tengah untuk mengobati segala penyakit, sesuai dengan keterangan dari Mohammad (Nabi penganut agama Islam) yang menyatakan bahwa biji tanaman ini dapat menyembuhkan segala penyakit kecuali kematian. Pada tahun-tahun terakhir Nigella Sativa banyak diteliti dan kandungan kimiawinya telah banyak dianalisis46 termasuk aktifitas farmakologisnya terhadap penyakit pada hewan maupun manusia.4 Ekstrak biji Nigella sativa mengandung komponen komponen yang terdapat dalam tabel di bawah,
19
Tabel 1. Komposisi kimiawi Nigella sativa Diambil dari Kamal El-Din Hussein El-Tahir Ph D, Dana M Bakeet.48
Komposisi
Range % (w/w)
Minyak
31-35,5
Protein
16-19,9
Karbohidrat
33-34
Fibra
4,5-6,5
Ash
3,7-7
Sapponins
0,013
Moisture
5-7
Tabel 2. Komposisi minyak dalam Nigella sativa. Diambil dari Kamal El-Din Hussein El-Tahir Ph D, Dana M Bakeet.48
Komposisi
Range % (w/w)
Asam linoleat
44,7-56
Asam Oleat
20,7-24,6
Asam Linolenat
0,6-1,8
Asam Arachidonat
2-3
Asam Palmitoleat
3
Asam Eikosadienoit
2-2,5
Asam Palmitat
12-14,3
Asam Stearat
2,7-3
Asam Miristat
0,16
Sterol
0,5
Metode thin layer chromatography (TLC) didapatkan 4 macam kandungan minyak dalam Nigella sativa yaitu timoquinon, karmakrol, tanetol dan 4terpineol.46 Salah satu komponen minyak volatil yang temukan dalam Nigella sativa adalah timoquinon (C10H12O2, berat molekul: 164,2)49
pertama kali 20
berhasil diisolasikan oleh El-Dakhakhny et al. pada tahun 1963. Penelitianpenelitian selanjutnya tentang timoquinon sebagai komponen terbesar minyak volatil menunjukkan bahwa zat ini mempunyai efek anti bakterial, antioksidan, antihistamin, anti inflamasi, anti diabetik, analgesik, anti piretik dan anti neoplastik. Studi anti neoplastik dari timoquinon mendapat perhatian yang besar. 50,51
Gambar 6. Struktur molekul timoquinon Diambil dari Yi T, Cho, Yi Z, Pang, Rodriguez, Ying W52
Timoquinon sebagai zat aktif terbesar dalam Nigella sativa menginduksi terjadinya apoptosis sel kanker melalui mekanisme yang belum pasti. 53,54. Asumsi sementara ini efek anti kanker timoquinon adalah melalui aktifitas antioksidan, imunomodulator dan sitotoksik.
Mekanisme sitotoksisitas golongan quinon
adalah dengan memutuskan rantai DNA yang dimediasi oleh radikal bebas, alkilasi DNA dan cross link DNA. Studi in vitro pada kanker kolon menunjukkan kemampuan timoquinon menginduksi apoptosis dengan jalur dependen p53 dan melalui jalur independen p5355 dengan aktifasi caspase-3, -8 dan -9 pada sel p53null myeloblastic leukemia HL-60. Didapatkan aktifitas caspase-8 tertinggi 1 jam dan caspase-3 tertinggi 6 jam setelah pemberian timoquinon. 55 Studi anti kanker dari Nigella sativa dilakukan secara in vitro pada beberapa jenis sel kanker manusia dengan paparan ekstrak berkonsentrasi 120-380 21
µg/ml menunjukkan efek sitotoksik dan berakibat kematian sel.56 Studi in vitro lain dengan ekstrak metanolik Nigella sativa menunjukkan efek sititoksik 50% terhadap Karsinoma Ehrlich pada konsentrasi 1,5 µg/ml, Limfoma pada 3 µg/ml dan Sarkoma pada 1,5 µg/ml serta karsinoma epidermal terhambat 60% pada konsentrasi 0,5 µg/ml.59 Nigella sativa dalam bentuk serbuk mempunyai batas dosis toksik yang sangat tinggi yaitu 28 g/kg BB yang diuji pada kelinci. Minyak produk ekstraksi dari Nigella sativa juga sangat aman, peroral pada tikus, LD50: 28,8 ml/kg. Hasil ekstrak berupa timoquinon mempunyai dosis toksik yang tinggi, LD50 2,4 g/kg. Bila timoquinon diberikan intraperitoneal pada mencit/tikus LD50 bervariasi mulai 10 mg/kg - 90,3 mg/kg. LD 50 intraperitoneal rendah diduga karena adanya iritasi peritoneum local. Penelitian lain yang dilakukan di King Faisal University (KFU), Dammam, Saudi Arabia mengkofirmasi LD50 timoquinon peroral adalah 1000 mg/kg dan intraperitoneal 100 mg/kg.23 Pengujian toksisitas akut dan subkronik timoquinon pada mencit, peroral akut LD50 (95% CL) adalah 2.4 g/kg (1.52-3.77). Tanda toksisitas berupa hipoaktif dan kesulitan bernapas. Pengujian dilakukan setelah 24 jam pemberian timoquinon 2 dan 3 g/kg peroral dengan menguji kadar enzim serum hati (glutathione /GSH, alanine amino transferase /ALT), ginjal (urea dan kreatinine) dan jantung (kreatine phosphokinase /CPK) mengalami peningkatan yang bermakna. Pada uji toksisitas subkronik, mencit diberikan timoquinon peroral dengan konsentrasi 0,01% dan 0,02% serta 0,03% selama 90 hari, sehingga dosis yang diterima 30, 60 dan 90 mg/kg/hari. Hasil yang didapat tidak ada mortalitas dan toksisitas, kadar enzim hati, ginjal dan 22
jantung tidak mengalami perubahan serta histologi dari organ tidak mengalami kerusakan. Pemberian jangka panjang dengan dosis tersebut dapat ditoleransi dengan baik. 58 Penelitian lain juga menunjukkan Nigella sativa dapat merangsang peningkatan sel splenosit, Th 2 dan aktivitas NK sel24. Studi anti kanker lainnya menyebutkan Nigella sativa merangsang peningkatan TNF, IL-6 dan produksi VEGF oleh sel monosit, mekanismenya belum sepenuhnya dimengerti25. Terhadap sel adenokarsinoma pankreas disebutkan bahwa Nigella sativa dapat menghambat inhibisi NF-
um diketahui26.
Asam lemak mempunyai rantai hidrofobik hidrokarbon dengan terminal karboksil. Asam lemak dibagi menjadi asam lemak esensial dan non esensial. Asam lemak esensial diperoleh dari luar melalui diet.59 Dua Polyunsaturated fatty acid (PUFA), yaitu asam linoleat (omega 6) dan asam linoleat sangat dibutuhkan untuk kesehatan tubuh.59 Asam lemak esensial berperan dalam pembentukan energi, pembentukan hemoglobin, pengambilan oksigen. Juga dalam proses pertumbuhan, pembelahan sel dan fungsi saraf. Ditemukan dalam konsentrasi tinggi di otak, berperan dalam impuls saraf normal dan fungsi otak. Kekurangan asam lemak esensial dapat menyebabkan fatique, problem kulit, kelemahan sistim imun,
gangguan
gastrointestinal, sterilitas, gangguan jantung dan pembuluh darah, gangguan pertumbuhan.59
23
Pengaruh Asam Lemak terhadap sistem imun Telah diketahui pengaruh asam lemak dapat mempengaruhi tumor dengan cara meningkatkan limfosit T dan NK sel.13 Juga mempengaruhi proses apoptosis, mekanisme pengaruh asam lemak terhadap proses apotosis diduga melalui penekanan terhadap bcl-2, sementara bcl-2 dapat menekan apoptosis. Mekanisme lain diduga melalui pengaruh Bax protein.13 2.4 Peran Nigella sativa dalam imunitas kanker
Timoquinon sebagai zat aktif terbesar dalam Nigella sativa menginduksi terjadinya apoptosis sel kanker melalui mekanisme yang belum pasti. 50,51. Asumsi sementara ini efek anti kanker timoquinon adalah melalui aktifitas antioksidan, imunomodulator dan sitotoksik. Studi in vitro pada kanker kolon menunjukkan kemampuan timoquinon menginduksi apoptosis dengan jalur dependen p53 dan melalui jalur independen p5355 dengan aktifasi caspase-3, -8 dan -9 pada sel p53null myeloblastic leukemia HL-60. Didapatkan aktifitas caspase-8 tertinggi 1 jam dan caspase-3 tertinggi 6 jam setelah pemberian timoquinon. 54 Sementara peran asam lemak yang juga merupakan kandungan dalam Nigella sativa mempunyai pengaruh terhadap apoptosis melalui penekanan terhadap bcl-2. Penekanan terhadap bcl-2 disebabkan karena asam lemak dapat menyebabkan down regulasi sinyal ErbB3, phosphoinositide3-kinase, Akt pathway, yang dapat menekan ekspresi bcl-2 sehingga dapat menyebabkan apoptosis.13 2.4.1 Peran Nigella sativa terhadap limfosit Penelitian yang menunjukkan pengaruh Nigella sativa terhadap jumlah limfosit pada kanker payudara belum ada. Sel yang mengandung antigen tumor 24
akan mengekspresikan antigennya bersama molekul MHC kelas I dan kelas II yang akan membentuk komplek dengan CD4 dan CD8, dimana CD8 ( sel Tsitotoksik)
untuk menghancurkan sel tumor dan CD4
mengsekresi IFN-
(sel T-helper) untuk
-
untuk lebih mengoptimalkan sitotoksisitas sel T-sitotoksik.35,36 Penelitian lain juga menunjukkan Nigella sativa dapat merangsang peningkatan sel splenosit, Th 2 dan aktivitas NK sel24. Studi anti kanker lainnya menyebutkan Nigella sativa merangsang peningkatan TNF, IL-6 dan peningkatan produksi VEGF oleh sel monosit,
mekanismenya
belum
sepenuhnya
dimengerti25.
Terhadap
sel
adenokarsinoma pankreas disebutkan bahwa Nigella sativa dapat menghambat 26.
inhibisi NF-k 2.4.2 Peran Nigella sativa terhadap makrofag
Penelitian yang menunjukkan pengaruh Nigella sativa terhadap makrofag pada kanker payudara belum ada. Makrofag yang berperan dalam mekanisme tersebut adalah makrofag aktif yaitu makrofag yang telah diaktifasi oleh Macrophage Activating Factors (MAF), suatu sitokin yang dihasilkan limfosit T yang distimulasi antigen. IFN-
bukanlah satu – satunya sitokin yang
mengaktivasi makrofag, tetapi makrofag juga diaktifkan oleh kontak dengan limfosit T melalui CD 4. CD4 akan mengaktivasi makrofag, makrofag yang aktif ini akan mengekspresikan IL-12 dan TNF yang akan memacu proliferasi dan aktivasi CD4 dan CD8. TNF sendiri mempunyai kemampuan untuk melisiskan sel tumor.3
25
2.4.3 Skema Patogenesis dan mekanisme kerja Nigella sativa
Asam lemak dalam Nigella sativa
Timoquinon dalam NIgella sativa
dapat menyebabkan down regulasi sinyal ErbB3, phosphoinositide3-kinase, Akt pathway, yang dapat Menekan ekspresi
Akan mengaktivasi
Meningkatkan TNF , NK sel, VEGF, sel limfosit Th 2
Sel kanker, mengekspresikan antigen bersama MHC kelas Idan MHC kelas II, membentuk kompleks dg
mensekresikan IFN dan TNF akan merangsang sel tumor untuk lebih banyak lagi mengekspreikan molekul MHC
Limfosit
CD4 dan CD8, akan mengaktifkan
Jumlah APC teraktivasi
IL-1, IL-6, IFN , TNF
Akan mengekspresikan IL-12 dan TNF Yg akan memacu proliferasi dan Aktivasi CD4 dan CD8
Makrofag
26
