7.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Tabel Karakteristik Bakteri Asam Laktat.
Tabel 7. Karakteristik Bakteri Asam Laktat
Karakteristik
Bentuk
Gas CO2
Carnobacterium Lactobacillus Aerococcus Enterococcus Lactococcus Vagococcus Leuconostoc Pediococcus Streptococcus Tetragenococcus
Batang Batang Bulat Bulat
Pertumbuhan NaCl NaCl 6,5% 18% ND +/+ + -
-/+ +/-
Suhu 100C + +/+ +
Suhu 450C +/+
Bulat
-
+
-
-
Bulat Bulat Bulat Bulat
+ +
+ +/+
+/+/-
+/+/+
Keterangan : + = positif +/- = bervariasi - = negatif ND = tidak diuji (Salminen et al., 2004)
56
pH 4,4
pH 9,6
ND +/+
+ +
-
+/-
-
+
+/+ -
+
57
Lampiran 2. Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada Suhu, Kondisi pH dan Kadar NaCl Berbeda.
Tabel 8. Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada Suhu 10oC dan 45oC 10oC Kode P1 P3 P5 P6 P7 P8 P9 P11 P12 P13 P14 P15 P17 P18 P19 P20 P22 P23 P24 R1 R3 R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11 R12 R13 R17 R18 Keterangan : Ul : Ulangan
24 Jam Ul 1 Ul 2 0,7747 0,3654 0,8851 0,6627 0,7710 0,6556 0,7914 0,7487 0,3687 0,4070 0,6885 0,6882 0,5955 0,6158 0,6165 0,7086 0,5911 0,7697 0,5341 0,5911 0,4126 0,4637 0,6678 0,6648 0,6982 0,6613 0,6873 0,6753 0,6235 0,7921 0,7196 0,8348 0,4954 0,5786 0,5559 0,5963 0,7449 0,5623 0,5696 0,7332 0,5577 0,5153 0,6547 0,6158 0,6097 0,8004 0,4504 0,3104 0,4954 0,5004 0,5592 0,6857 0,4009 0,4353 1,0411 1,2084 0,9635 1,1973 1,0782 1,2050 0,9799 1,0151 1,2223 0,9869
48 Jam Ul 1 Ul 2 0,5400 0,2874 0,6688 0,5414 0,6770 0,5925 0,3845 0,6208 0,3055 0,2862 0,5798 0,5560 0,5588 0,5646 0,4707 0,5284 0,5054 0,5325 0,4580 0,4741 0,4335 0,4788 0,4594 0,4995 0,5525 0,5417 0,5068 0,5745 0,4882 0,5872 0,5880 0,5789 0,4440 0,4747 0,4766 0,4462 0,5568 0,4695 0,5303 0,4994 0,3973 0,4226 0,4460 0,5052 0,4779 0,5341 0,4268 0,4982 0,3690 0,3928 0,4293 0,5645 0,3680 0,4073 1,3870 1,4693 1,2422 1,4122 1,6753 1,5709 1,2339 1,2258 1,5189 1,4435
45oC 24 Jam Ul 1 Ul 2 2,2799 2,3223 2,1973 2,2412 2,1809 2,3005 2,3005 2,3223 2,2601 2,3005 2,2321 2,2601 2,2321 2,3005 2,1809 2,2321 2,1425 2,2321 2,1351 2,2601 2,1891 2,2900 2,2699 2,3335 2,2799 2,2412 2,1652 2,2900 2,1973 2,2799 2,1575 2,2506 2,1499 2,3005 2,1575 2,2799 2,1652 2,2799 2,1891 2,3005 2,2231 2,2799 2,2144 2,1973 2,1210 2,2144 2,1072 2,1425 2,1425 2,1809 2,1351 2,2900 2,1499 2,2321 0,4441 1,2500 0,5573 1,3717 0,3608 0,8341 0,3231 0,5436 0,3103 0,5571
48 Jam Ul 1 Ul 2 2,3113 2,4818 2,1499 2,2335 2,1144 2,3051 2,2601 2,2144 2,2321 2,3005 2,2144 2,2799 2,3005 2,3799 2,2601 2,3730 2,1072 2,2900 2,2144 2,3601 2,1809 2,2799 2,2506 2,3005 2,2699 2,2005 2,1575 2,2799 2,1891 2,2058 2,1575 2,2231 2,2412 2,4799 2,2144 2,3113 2,2412 2,3005 2,1809 2,3113 2,1973 2,2321 2,1730 2,1005 2,1425 2,2799 2,1281 2,1144 2,1210 2,1412 2,2144 2,3799 2,2058 2,3799 0,4285 1,2463 0,5741 1,3901 1,3417 1,0477 0,2617 0,5870 0,4294 0,6099
58
Tabel 9.
Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada pH 4,4 dan 9,6 4,4
Kode P1 P3 P5 P6 P7 P8 P9 P11 P12 P13 P14 P15 P17 P18 P19 P20 P22 P23 P24 R1 R3 R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11 R12 R13 R17 R18 Keterangan : Ul : Ulangan
24 Jam Ul 1 Ul 2 2,0620 1,9310 2,1140 2,0157 2,0620 1,9310 2,0103 1,9890 2,0382 1,8881 2,0441 1,9738 2,0325 2,0157 2,0325 1,9591 2,0325 2,0808 2,1005 2,0325 2,0620 2,0620 2,1072 2,0382 2,0325 1,9689 1,9995 2,0325 2,0212 1,9543 2,0441 2,0049 2,1425 1,9839 2,0500 2,0049 1,9640 1,9543 2,0382 2,0620 1,9789 1,9890 2,0382 2,0049 2,0938 1,9943 2,0500 2,0500 2,0325 1,9310 2,0560 2,0103 2,0103 1,9689 2,3113 2,3325 2,3451 2,3005 2,3335 2,3571 2,1973 2,1499 2,2601 2,1973
9,6 48 Jam Ul 1 Ul 2 2,1072 2,1809 2,1973 2,2900 2,1072 2,1973 2,1425 2,1425 2,1210 2,1351 2,1210 2,1575 2,1210 2,1730 2,0873 2,1575 2,1809 2,2321 2,1809 2,2412 2,1499 2,2412 2,2499 2,2799 2,1351 2,1575 2,1730 2,1730 2,1210 2,1005 2,1575 2,2321 2,2809 2,3005 2,1682 2,9640 2,1072 2,2412 2,1809 2,3223 2,1005 2,1730 2,1281 2,2412 2,1809 2,3571 2,1499 2,1809 2,1499 2,2412 2,1140 2,1891 2,1425 1,1809 2,3693 2,5516 2,4113 2,4984 2,4818 2,4220 2,2321 2,3223 2,3973 2,3005
24 Jam Ul 1 Ul 2 2,1575 1,8270 1,1786 2,3938 0,0764 0,1366 0,0587 1,6167 1,5422 1,6779 0,1490 0,7855 1,7734 0,0765 1,6392 2,3113 0,1797 1,5631 1,5829 0,0751 2,2412 2,3451 0,1093 2,3451 2,2699 2,3948 2,0382 2,4662 2,214 2,3693 0,0511 0,0844 0,1718 2,2601 2,0620 0,3933 0,1339 2,2231 2,2900 2,3571 2,2058 1,4772 1,4756 1,6438 0,8583 1,4109 0,1084 1,5497 2,3818 1,6556 0,1213 0,0814 0,0629 0,0736 2,2799 2,4220 2,0620 2,3571 2,3818 2,3818 2,2601 2,3818 2,4662 2,3335
48 Jam Ul 1 Ul 2 2,6581 2,2231 2,7372 2,7092 2,5911 2,6829 0,1172 2,7372 1,5402 1,5799 2,6829 2,7672 2,1210 2,6345 2,3571 2,7092 2,7092 2,1499 1,8096 2,6345 2,6581 2,5911 2,5911 2,4611 2,7092 2,7092 2,7098 2,7372 2,6345 2,0792 0,0663 0,1155 2,4362 2,4220 2,4220 2,5911 2,6123 2,4984 2,2984 2,3335 2,2984 1,4281 2,4984 2,1730 2,5331 2,3948 2,6123 2,7092 2,6123 2,1730 0,1211 0,0911 2,2799 2,5911 2,5911 2,7092 2,6581 2,7372 2,7994 2,7092 2,4424 2,4220 2,6581 2,3451
59
Tabel 10. Hasil Absorbansi Kemampuan Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat pada NaCl 6,5% dan 18%
Kode P1 P3 P5 P6 P7 P8 P9 P11 P12 P13 P14 P15 P17 P18 P19 P20 P22 P23 P24 R1 R3 R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11 R12 R13 R17 R18 Keterangan : Ul : Ulangan
6,5% 24 Jam 48 Jam Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 1,7119 1,4646 2,3571 2,3948 1,8341 2,0269 2,3451 2,3335 2,1499 2,1891 2,2900 2,2699 2,1140 1,8062 2,2231 2,2900 1,9890 2,1730 2,3335 2,3005 2,0441 2,0560 2,2799 2,2412 2,0745 2,1575 2,2799 2,2699 2,0325 2,0682 2,3005 2,2506 1,8799 2,1351 2,3335 2,3948 1,8234 1,8799 2,2571 2,3451 1,6278 1,8378 2,3948 2,3571 1,8489 1,7863 2,2571 2,3335 1,7579 1,4615 2,3113 2,3005 2,0620 1,9890 2,4082 2,3948 1,4319 1,6211 2,3005 2,3223 2,0049 1,9640 2,3571 2,3571 1,6906 1,7119 2,3571 2,3571 1,7039 1,8680 2,4220 2,3113 2,1281 1,8451 2,2699 2,3335 1,9133 2,0103 2,3571 2,3005 2,0560 1,9310 2,3451 2,2699 2,0382 2,1140 2,3335 2,3335 1,8270 1,7830 2,3818 2,3335 1,9640 1,9402 2,3005 2,3223 1,8759 1,7703 2,3571 2,3005 2,1351 2,1351 2,3571 2,3571 2,0938 2,1652 2,2900 2,3113 2,2321 2,1809 2,3900 2,3113 2,0620 2,1891 2,2321 2,2809 2,3005 2,3005 2,3571 2,3571 2,2058 2,1652 2,3506 2,2900 2,1652 2,1575 2,2506 2,2799
18% 24 Jam 48 Jam Ul 1 Ul 2 Ul 1 Ul 2 0,1029 0,0929 0,1182 0,0930 0,0956 0,0980 0,0967 0,0923 0,0936 0,0940 0,0945 0,0976 0,0909 0,1034 0,0973 0,1182 0,0948 0,1024 0,0981 0,1166 0,1057 0,0878 0,1138 0,0879 0,0975 0,0977 0,1108 0,1216 0,0923 0,0905 0,0949 0,1046 0,1034 0,1139 0,1096 0,1198 0,0970 0,1035 0,1107 0,1405 0,1055 0,0900 0,1191 0,1033 0,0974 0,0879 0,1141 0,1035 0,1001 0,0963 0,1227 0,1184 0,1144 0,1003 0,1219 0,1085 0,0983 0,0963 0,1020 0,1132 0,1123 0,1100 0,1256 0,1184 0,1018 0,1047 0,1334 0,1328 0,0865 0,0983 0,1033 0,1101 0,1088 0,0796 0,1208 0,0952 0,0988 0,1095 0,1213 0,1268 0,0948 0,1052 01195 0,1184 0,0907 0,0927 0,1014 0,1115 0,1044 0,0768 0,1224 0,0938 0,1027 0,1083 0,1206 0,1277 0,1000 0,1041 0,1195 0,1246 0,1094 0,0957 0,1140 0,1248 0,0873 0,0909 0,1006 0,1127 0,1715 0,1648 0,1934 0,1980 0,1672 0,1696 0,1782 0,1849 0,1040 0,1091 0,1160 0,1299 0,1537 0,1450 0,1655 0,1650 0,1229 0,1289 0,1408 0,1284
60
Lampiran 3. Tabel Hasil Uji SPSS. Tabel 11. Tabel Duncan Nilai pH dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5% pH Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
Hari_Ke-7
6
3,6850
Hari_Ke-10
6
3,7300
Hari_Ke-14
6
3,7867
Hari_Ke-0
6
6,8500
Sig.
,153
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
Tabel 12. Tabel Duncan Nilai pH dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5% pH Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
Hari_Ke-10
6
3,5833
Hari_Ke-7
6
3,6083
Hari_Ke-14
6
3,6150
Hari_Ke-0
6
Sig.
6,3450 ,903
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
1,000
61
Tabel 13. Tabel Duncan Total Asam dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5% Total_Asam Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
3
Hari_Ke-0
6
Hari_Ke-7
6
Hari_Ke-14
6
,6330
Hari_Ke-10
6
,6510
Sig.
,0270 ,4470
1,000
1,000
,448
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
Tabel 14. Tabel Duncan Total Asam dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5% Total_Asam Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
3
Hari_Ke-0
6
Hari_Ke-7
6
Hari_Ke-10
6
,6240
Hari_Ke-14
6
,6450
Sig.
,0270 ,4686
1,000
1,000
,477
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
Tabel 15. Tabel Duncan Total HCN dari Fermentasi dalam Larutan Garam 2,5% HCN Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
3
Hari_Ke-14
6
Hari_Ke-10
6
Hari_Ke-7
6
169,9762
Hari_Ke-0
6
190,6635
Sig.
110,3597 139,5906
1,000
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
,062
62
Tabel 16. Tabel Duncan Total HCN dari Fermentasi dalam Larutan Garam 5% HCN Duncan Hari
N
Subset for alpha = 0.05 1
2
Hari_Ke-14
6
99,3613
Hari_Ke-10
6
112,5449
Hari_Ke-7
6
Hari_Ke-0
6
Sig.
3
112,5449 128,1305 182,5915
,285
,209
1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 6,000.
Lampiran 4. Media Pertumbuhan Bakteri Asam Laktat dalam Penelitian. Media deMan Rogosa Sharp Agar (MRSA) “MERCK”
Pembuatan media MRSA dilakukan dengan melarutkan sebanyak 68,2 gram MRSA dalam 1 liter aquades. Media MRSA + aquades diaduk menggunakan stirrer sambil dipanaskan diatas hot plate hingga mendidih. Kemudian disterilisasi menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC. Komposisi media MRSA tiap 1 liter yaitu 14 gram agar-agar, 0,2 gram magnesium sulfate, 2 gram ammonium-hydrogencitrate, 10 gram pepton kasein, 0,04 gram manganese sulfate, 4 gram ekstrak yeast, 2 gram diKalium hydrogen phosphate, 1 gram tween 80, 20 gram D (+)-glucose, 10 gram ekstrak daging dan 5 gram sodium acetate. Media deMan Rogosa Sharpe Broth (MRSB) “MERCK”
Pembuatan media MRSB dilakukan dengan melarutkan sebanyak 52,2 gram MRSB dalam 1 liter aquades. Media MRSB + aquades diaduk menggunakan stirrer hingga seluruh media larut. Komposisi media MRSB tiap 1 liter yaitu 5 gram sodium acetate, 2 gram di-ammonium hydrogen citrate, 10 gram kasein/daging pepton, 1 ml tween 80, 2 gram di-Potassium hydrogen phosphate, 20 gram D (+)-glucose, 4 gram ekstrak yeast, 0,04 gram manganese sulfate, 0,2 gram magnesium sulfate dan 8 gram ekstrak daging.
63
Media Nutrient Agar (NA) “MERCK” Pembuatan media NA dilakukan dengan melarutkan sebanyak 20 gram NA dalam 1 liter aquades, kemudian diaduk hingga seluruh media larut menggunakan stirrer sambil dipanaskan diatas hot plate. Kemudian disterilisasi menggunakan autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC. Setiap liter NA mengandung 5 gram pepton daging, 12 gram agar dan 3 gram ekstrak daging.
Lampiran 5. Larutan Standar McFarland No. 3 dan 5 yang Digunakan pada Uji Aktivitas Antimikroba. Larutan Standar McFarland No. 3
Pembuatan larutan Standar McFarland No. 3 dilakukan dengan mencampurkan 0,3 ml BaCl2 1% dengan 9,7 ml H2SO4 1%. Larutan standar McFarland No. 3 tersebut menunjukkan konsentrasi bakteri 900 CFU (x106 /ml).
Larutan Standar McFarland No. 5
Pembuatan larutan Standar McFarland No. 5 dilakukan dengan mencampurkan 0,5 ml BaCl2 1% dengan 9,5 ml H2SO4 1%. Larutan standar McFarland No. 5 tersebut menunjukkan konsentrasi bakteri 1500 CFU (x106 /ml).
Lampiran 6. Berbagai Larutan yang Digunakan untuk Uji Kimia. Larutan NaOH 0,1 N
Sebanyak 2 gram bubuk NaOH dicampurkan dalam 500 ml aquades, lalu diaduk hingga seluruh bubuk NaOH larut.
64
Larutan Chloramine T 0,15%
Sebanyak 75 mg (0,075 gram) bubuk Chloramine T dicampurkan dalam 50 ml aquades, lalu diaduk hingga seluruh bubuk Chloramine T larut.
Larutan CH3COONa.3H2O (Na-asetat) 0,2 M
Sebanyak 27,22 gram bubuk CH3COONa.3H2O dicampurkan dalam 1000 ml aquades, lalu diaduk hingga seluruh bubuk CH3COONa.3H2O larut.
Larutan NaH2PO4 0,15 M
Sebanyak 2,67 gram bubuk NaH2PO4 dicampurkan dalam 100 ml aquades, lalu diaduk hingga seluruh bubuk NaH2PO4 larut.
Larutan 1,3 asam dimetilbarbiturat 0,3 M
Sebanyak 70 mg (0,070 gram) bubuk 1,3 asam dimetilbarbiturat dicampurkan dalam 1,4 ml acetate buffer, lalu diaduk hingga seluruh bubuk 1,3 asam dimetilbarbiturat larut.
Larutan Acetate Buffer
Sebanyak 4,8 ml asam asetat ditambah dengan 42,5 ml Na-asetat (CH3COONa.3H2O), lalu diencerkan dengan aquades hingga 100 ml dalam labu takar.